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王建举: 作品数：10 被引量：50H指数：4; 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>; 发文基金：中国博士后科学基金河南省科技攻关计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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猪繁殖与呼吸障碍综合征的免疫学特性和控制措施被引量：3: 2007年; 猪繁殖与呼吸障碍综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种高度传染性疾病，临床上以母猪发热、厌食、早产、流产、产木乃伊胎、死胎、弱仔等繁殖障碍症状及各种年龄猪的呼吸症状和仔猪的高死亡率为特征。该病传播速度快，尤其在经济发达国家，猪群密集、流动频繁，更易引起流行。在一个严重流行期过后，该病常呈地方流行性，长期危害养猪生产，给养猪业造成巨大的经济损失。; 周海范尹育涛张立新方韬文王建举; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫学特性呼吸症状传染性疾病地方流行性

猪α干扰素的原核表达及重组杆状病毒载体的构建: 无菌采集健康猪的前腔静脉血，分离培养淋巴细胞，加入ConA诱导培养后，提取总RNA，参照GenBank上猪a干扰素基因序列设计一对引物，应用RT-PCR克隆不含信号肽的猪α干扰素的基因片段，插入pGEM-T Easy载体...; 王建举; 关键词：猪Α干扰素原核表达; 文献传递

整合猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的重组鼠白血病病毒特性被引量：1: 2008年; 通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒完整的GP5基因并进行了克隆与鉴定。序列测定结果与已经登陆GenBank的EF488048高致病性江西株比对分析表明碱基同源性达98.7%。构建含GP5基因的真核表达载体pcDNA-GP5,通过与鼠白血病病毒(MuLV)假病毒构建体系的两种质粒pHIT60和pHIT111共转染人胚肾细胞293T,48h后收集假病毒上清,超离后通过Western-blot证明GP5蛋白在假型病毒颗粒表面存在,表明GP5蛋白被整合到此假型病毒粒子表面。通过感染293T、Mark-145不同的靶细胞,证实所构建的假型病毒粒子具有感染性。成功构建了具有感染性的MuLV-GP5假病毒体系,为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入细胞的机理及其组织嗜性的变异提供一种新方法。; 党占国夏平安周斌尹彦涛王建举柴春霞崔保安陈溥言; 关键词：鼠白血病病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因假病毒

蜂素信号肽介导猪干扰素-γ在杆状病毒中分泌表达及抗病毒活性检测被引量：5: 2010年; 应用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统,将编码成熟的猪干扰素-γ基因插入供体质粒pFastBacTM1polyhedrin启动子控制下的多克隆位点,引入昆虫细胞可识别的蜂素信号肽(Honeybee melittin signal peptide)取代猪干扰素-γ原有信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以利于纯化。将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体质粒,转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒。重组蛋白通过SDS-PAGE、间接免疫荧光、Western-blot证明在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中获得分泌表达。通过在猪肾细胞(PK-15)上抑制水泡性口炎病毒(VSV)致病变作用检测重组蛋白的抗病毒活性是1.38×106U/mL。; 王彦彬魏战勇陈红英王建举郭小参崔保安; 关键词：干扰素杆状病毒抗病毒活性

猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白的高效表达及间接ELISA方法的建立被引量：19: 2009年; 根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株ATCC VR2332的N蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从PRRSV Hn-1/06株中克隆了大小为372bp的N蛋白基因(EU025136)。将N蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-N,在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为33000的可溶性融合蛋白N-His;经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析,融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的29%。将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱,经300mmol/L咪唑磷酸盐缓冲液洗脱,其纯度可达91%。用Western blotting分析纯化后的融合蛋白,显示良好的生物学活性。利用纯化融合蛋白作包被抗原及优化ELISA反应条件,建立了可检测抗PRRSV N蛋白抗体的间接ELISA方法(N-ELISA),并将所建立的N-ELISA与国外进口的PRRS检测试剂盒IDEXX-ELISA对200份临床送检血清进行平行检测,阳性符合率为92.7%。结果表明,本试验建立的N-ELISA与IDEXX-ELISA具有同样高的特异性。; 夏平安尹彦涛李素平党占国王建举王中明李伟娟崔保安; 关键词：PRRSV N蛋白 ELISA

鸡干扰素的研究进展被引量：7: 2008年; 干扰素自发现以来,它的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节机制逐渐清晰,而现在它的抗病毒机制中信号传导途经及分泌表达的调节正成为研究热点。作者就上述方面作一综述。; 王建举夏平安尹彦涛柴春霞党占国王彦彬高卫科; 关键词：鸡干扰素抗病毒作用信号传导分泌调节

MxA抗病毒蛋白的研究概况被引量：3: 2008年; MxA抗病毒蛋白是新发现的由I型干扰素(IFNα/β)诱导产生的分布于细胞质中的78 kD的蛋白质,具有广谱的抗病毒作用。随着对MxA研究的深入,现已清楚,MxA蛋白对多种RNA病毒和部分DNA病毒均有抑制作用(Arloric等,1990;Ordien等,2001),而且其水平高低可以作为机体IFN诱导状态的适宜标志。因此开展MxA蛋白研究具有很高的医学价值。; 尹彦涛夏平安崔保安赵云航王建举党占国柴春霞; 关键词：MXA蛋白

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒河南分离株ORF3-7基因克隆与序列分析被引量：12: 2008年; 参照GenBank中公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株ATCC VR2332的ORF3～7基因序列,利用Pri mer软件分别设计合成了针对PRRSV ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株分别扩增得到了大小约964、675、718、566和501 bp的片段,并将扩增的片段插入PGEM-T-easy载体进行测序。利用DNAStar软件进行序列分析表明,河南分离株Hn-1/06株属于美洲型,同时将Hn-1/06株ORF3～7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR2332、LV、Resp、CH-1a、BJ-4、S1、CC-1、HB-1、JX0612、HUB1等分离株进行了同源性分析。; 尹彦涛夏平安崔保安王建举党占国柴春霞陈红英李新生; 关键词：PRRSV 克隆与序列分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株GP5基因的克隆及在293T细胞中表达: 2008年; 根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株GP5基因序列设计1对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增PRRSV Hn/06-1分离株GP5基因片段.将扩增片段克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,测序后用DNAstar序列分析.构建的pcDNA-GP5重组质粒瞬时转染293T细胞,48 h后用Western-blot检测,证明GP5基因在293T细胞中获得了表达,可与PRRSV阳性血清发生特异性反应.; 党占国夏平安高进勇尹彦涛王建举崔保安陈溥言; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因克隆真核表达

PRRSV Hn-1/06株N蛋白基因高效表达及其间接ELISA方法的建立: 根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF7基因序列,利用Primer软件设计合成了针对PRRSV ORF7基因的特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为501 bp...; 尹彦涛夏平安崔保安张红英党占国王建举王中明李伟娟; 关键词：PRRSV N蛋白原核表达 ELISA; 文献传递

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