王宝峰
- 作品数：9 被引量：18H指数：2
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- Oct-4在骨髓间充质干细胞定向诱导分化中的甲基化研究
- 王菊符毓豪谢松松王宝峰周宗瑶
- 小鼠精原干细胞体外分化中Stra8、mina53表达的研究被引量：5
- 2010年
- 为检测Stra8、mina53在小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cells,mSSCs)体外分化中的表达,采用1)体外培养mSSCs并通过全反式视黄酸(ATRA,all-trans retinoic acid)进行诱导分化;2)通过间接免疫荧光反应鉴定mSSCs体外分化前后情况;3)通过RT-PCR检测mSSCs诱导分化前后(0h,2h,72h)Stra8、mina53mRNA的水平,初步了解Stra8、mina53的表达状况。结果表明:1)形态学变化显示ATRA使mSSCs向精母细胞方向发生了分化,并通过间接免疫荧光反应进行鉴定。2)Stra8在mSSCs诱导分化2h、72h的水平高于成年小鼠和未诱导分化的水平,其中72h时水平低于2h,各对照组间差异具有统计学意义。3)mina53的表达在诱导后增加,其水平高于成年小鼠和未诱导mSSCs的水平,但差异无统计学意义。这表明ATRA在体外使mSSCs向精母细胞方向分化,Stra8基因呈高表达,但mina53基因呈高表达不确定。
- 王宝峰王菊谢松松周宗瑶
- 关键词：精原干细胞MINA53全反式视黄酸分化
- 小鼠精原干细胞体外分化及相关基因表达的研究
- 目的：体外培养小鼠精原干细胞（mouse spermatogonial stem cells,mSSCs）,并通过全反式视黄酸（ATRA, all-trans retinoic acid）进行诱导分化,观察小鼠精原干细胞...
- 王宝峰
- 关键词：精原干细胞MINA53OCT-4全反式维甲酸分化
- 文献传递
- 小鼠精原干细胞体外培养相关基因的表达
- ＜正＞建立一种简单、有效体外分离和培养精原干细胞（Sper-matogonia stem cell,SSCs）的方法;在体外培养条件下,观察小鼠SSCs相关基因的表达。本实验应用酶消化6～8d新生小鼠睾丸制备睾丸细胞悬液...
- 王菊符毓豪谢松松王宝峰周宗瑶
- 小鼠精原干细胞体外培养相关基因的表达
- 2009年
- 王菊符毓豪谢松松王宝峰周宗瑶
- 关键词：体外培养条件精原干细胞小鼠睾丸形态学观察体外分离
- DNA甲基化的研究进展被引量：9
- 2009年
- 甲基化修饰是脊椎动物DNA唯一的自然修饰方式,动物基因组甲基化与基因表达密切相关。DNA甲基化通过与反式作用因子相互作用或通过改变染色质结构而影响表达,在细胞分化、发育、X染色体失活、基因组印记及肿瘤发生发展中起重要作用。
- 谢松松王宝峰周宗瑶
- 关键词：DNA甲基化
- Oct-4在精原干细胞定向诱导分化中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的:检测Oct-4在小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cells,mSSCs)体外诱导分化中的表达。方法:①体外培养mSSCs;②用干细胞因子(SCF,stem cell factor)对mSSCs进行精母细胞方向诱导分化;③通过形态学观察和c-kit,GCNF间接免疫荧光染色鉴定mSSCs是否发生分化;④通过间接免疫荧光染色和RT-PCR分别从蛋白水平和mRNA水平检测Oct-4在mSSCs诱导分化前后的表达情况。结果:①形态学观察mSSCs细胞核较大,细胞质少,SCF诱导培养后,随着培养时间的延长,细胞克隆逐渐增长缓慢,并出现衰退、凋亡的细胞;②c-kit,GCNF间接免疫荧光染色结果显示,mSSCs经SCF诱导后发生分化;③Oct-4间接免疫荧光染色和RT-PCR结果显示,Oct-4在mSSCs诱导前表达水平最高,诱导2天后下降,5天后几乎不表达。结论:Oct-4是mSSCs未发生分化的标志。
- 谢松松王菊王宝峰周宗瑶
- 关键词：OCT-4精原干细胞分化
- 小鼠精原干细胞与胚胎干细胞样细胞
- 2009年
- 近年来,通过培养小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)获得了胚胎干细胞样细胞(,embryonic stem cell-like cells,ES样细胞)。这些研究表明小鼠精原干细胞不仅具备特异分化为精子的干细胞潜能,而且具备胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)分化为三胚层的多向分化潜能。因此,这将有助于研究干细胞的分化调控机制,并且这些研究成果延伸至人类精原干细胞,也将为再生医学获取特殊的胚胎干细胞样细胞或特异分化的精子细胞开辟了蹊径。
- 王宝峰谢松松周宗瑶
- 关键词：精原干细胞多向分化潜能
- 不同固定方法对冰冻切片间接免疫荧光结果的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:寻找一种冰冻切片间接免疫荧光染色以及HE染色过程中最佳的组织固定方法。方法:取健康成年小鼠双侧睾丸冰冻切片,分别采用3种方法进行固定:①丙酮4℃固定15分钟,-20℃保存24h;②95%酒精4℃固定15分钟,-20℃保存24h;③切片-20℃保存24h后,再用4℃丙酮固定15分钟。然后做间接免疫荧光和HE染色,观察组织结构及染色情况。结果:4℃丙酮固定的组织切片HE染色以及间接免疫荧光效果良好。-20℃保存24h后,4℃丙酮固定15分钟的冰冻切片HE染色和间接免疫荧光结果最差。结论:酒精和丙酮都可以固定组织,但是4℃丙酮固定效果最好。
- 谢松松王菊王宝峰周宗瑶
- 关键词：冰冻切片间接免疫荧光HE染色
