王卓
- 作品数：9 被引量：36H指数：5
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>
- 急性白血病儿童在长期治疗中的心理问题与对策被引量：5
- 2009年
- 李百芳王卓高红梅曹励之
- 关键词：儿童急性白血病儿童时期心理问题恶性肿瘤
- 小儿白血病危险因素调查被引量：6
- 2008年
- 目的研究儿童白血病的可能危险因素。方法自行设计白血病危险因素调查表,对2005年1月至2007年1月中南大学湘雅医院儿科住院的136例白血病患儿进行1∶1配对对照研究,对所得资料进行单因素分析,选择其中有意义的进行多因素条件Logistic回归分析。结果88项指标单因素分析中有15项有统计学意义;其中出生体重、家族肿瘤病史、母亲生育年龄、房屋附近有高压线、家中进行装修、患儿既往频繁感染6项指标在多因素条件Logistic逐步回归分析中有统计学意义。结论本次调查提示出生体重、家族肿瘤病史、母亲生育年龄、房屋附近有高压线、家中进行装修、患儿既往频繁感染病史,可能为较显著的儿童白血病危险因子。
- 俞燕陈可可康睿王卓胡婷黄琼许望琼曹励之
- 关键词：儿童白血病LOGISTIC回归分析
- 儿童急性淋巴细胞白血病及阿霉素所致Jurkat细胞凋亡时WAVE1表达研究被引量：6
- 2008年
- 目的初步探讨WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)在急性淋巴细胞白血病(ALL)发病中可能的作用及意义。方法运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法和蛋白质印迹(Western blotting)分别检测40例ALL初治患儿、15例化疗完全缓解半年、4例复发、10例非白血病患儿BMMCs中WAVE1 mRNA和蛋白的表达水平。以不同浓度阿霉素处理Jurkat细胞:采用MTT法测细胞增殖;②采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;③采用RT-PCR和Western blotting检测WAVE1表达。结果ALL初治和复发患儿BMMCs均有WAVE1 mRNA和蛋白的表达,对照和缓解组BMMCs中mRNA和蛋白低表达或无表达,初治和复发组的WAVE1 mRNA和蛋白的表达表达水平显著高于化疗后缓解组和对照组(P<0.01)。阿霉素明显抑制Jurkat细胞增殖,抑制作用呈剂量时间依赖效应(P<0.05);阿霉素作用24h后,细胞凋亡随药物浓度增增高而增加,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);细胞WAVE1 mRNA和蛋白表达水平随阿霉素处理浓度的增高而降低,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论WAVE1在ALL患儿BMMCs中高表达;WAVE1可能与儿童ALL病程相关,它可能成为动态检测儿童ALL病情的一个新指标。
- 王卓胡婷曹励之康睿赵明一俞燕许望琼
- 关键词：急性淋巴细胞白血病WAVE1凋亡儿童
- 有血液特征的原发性免疫缺陷病被引量：4
- 2008年
- 某些原发性免疫缺陷病(PID),如性连锁丙种球蛋白血症、严重联合免疫缺陷病、普通变异型免疫缺陷病、Chediak-Higashi综合征、Wiskott-Aldrich综合征等临床与血液学表现均有相似之处,均易并感染及恶性肿瘤,常导致一个或多个细胞系列抑制和(或)功能缺陷。血液学表现虽不能作为PID的诊断依据,但对鉴别诊断、合并症判断、预后判断及指导治疗均有重要的临床意义。
- 曹励之王卓
- 荧光定量聚合酶链反应检测儿童白血病骨髓GRIK2基因的表达被引量：1
- 2008年
- 目的分析骨髓中GRIK2基因产物在白血病患儿、白血病细胞株及非血液病患儿中的表达差异。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量PCR(FQ-PCR)方法分别检测100例白血病患儿、3个白血病细胞株(Jurkat、Raji和HL-60细胞株)及30例对照组骨髓中GRIK2的表达情况。结果RT-PCR和FQ-PCR检测标本的阳性率分别为4.51%(6/133例)和7.52%(7/133例),2种检测方法均显示GRIK2基因在白血病和正常造血细胞间的表达无统计学差异(P>0.05),但GRIK2mRNA在无6q缺失的T-急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿中较B-ALL患儿表达高,在有6q缺失的T-ALL和B-ALL患儿中GRIK2表达为阴性,T细胞株Jurkat有阳性表达,B细胞株Raji和HL-60细胞株为阴性表达;30例对照组中3例有较高水平表达。结论GRIK2mRNA在骨髓中水平低或不表达,GRIK2基因是否为ALL的肿瘤抑制基因(TSG)有待进一步探讨。
- 胡婷王卓曹励之俞燕康睿许望琼
- 关键词：肿瘤抑制基因荧光定量聚合酶链反应儿童
- WAVE1基因在K562/A02白血病细胞多药耐药中的作用被引量：9
- 2007年
- 目的探讨 WASP 家族 Verprolin 同源蛋白1(WAVE1)基因在 K562/A02白血病细胞多药耐药机制中的作用。方法将 pEFBOS-WAVE1真核表达质粒转染 K562细胞构建 WAVE1高表达的 K562细胞,将 WAVE1基因的特异性小片段干扰 RNA(WAVE1 siRNA)转染 K562/A02细胞构建WAVE1低表达的 K562/A02细胞。Western blot 和 RT-PCR 法检测基因转染前后 K562/A02细胞及K562细胞 WAVE1基因及蛋白的表达;可溶性噻唑盐 WST-8染色法检测阿霉素对转染前后细胞的半数抑制浓度(IC_(50));Hoechest33258染色法检测细胞形态学改变并计算凋亡细胞百分率;RT-PCR 检测多药耐药基因 mdrl mRNA 表达;Western blot 检测 Bcl-2表达。结果①与 K562细胞相比,K562/A02细胞 WAVE1 mRNA 表达水平增加70%,蛋白表达水平增加63%。②转染 WAVE1基因的 K562细胞WAVE1过表达,并降低了对阿霉素的药物敏感性,使 IC_(50)从转染前的(0.35±0.00)μg/ml,增加到(2.99±0.12)μg/ml,在阿霉素浓度为1、5μg/ml时,凋亡细胞分别下降30%、35%。③转染 WAVE1siRNA 的 K562/A02细胞 WAVE1蛋白表达水平与未转染组相比明显降低,并可增强对阿霉素的药物敏感性,使 IC_(50)从转染前的(4.29±0.15)μg/ml下降到(1.85±0.07)μg/ml,阿霉素浓度为1、5μg/ml时,凋亡细胞分别增加24%、21%。④转染 WAVE1的 K562细胞 mdr1基因和 Bcl-2蛋白表达水平均增高,而转染 WAVE1 siRNA 的 K562/A02细胞 mdr1基因和 Bcl-2蛋白表达水平比转染前明显降低。结论 WAVE1参与了 K562/A02细胞多药耐药的形成,其机制可能与调控 mdr1和 Bcl-2水平有关。
- 康睿曹励之俞燕胡婷王卓许望琼谢岷
- 儿童急性髓细胞性白血病WAVE1基因对耐药相关基因表达影响的研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨儿童急性髓细胞性白血病（AML）中WASP家族Verprolin同源蛋白1（WAVEl）基因参与P糖蛋白（P—gP）、多药耐药相关蛋白1（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）表达和调控的机制。方法将52例患儿依据是否在随访期内持续缓解（CCR）分为难治／复发组和缓解组，应用实时定量PCR（RQ-PCR）法和蛋白印迹（Western blot）分别检测52例AML患儿治疗前及疾病发展过程中骨髓单个核细胞（BMMCs）中WAVE1、P—gP、MRP1、LRP及BCRP蛋白和基因mRNA的表达水平。将PCDNA3．1-WAVEl真核表达质粒转染HL60细胞构建WAVEl高表达HL-60细胞，将WAVEl基因的特异性小片段干扰RNA（WAVEl siRNA）转染HL60／ADR构建WAVE1低表达HL60／ADR细胞；Western blot和RQ—PCR法检测基因转染前后白血病细胞系grAVE1、MRP1及BCRP蛋白及基因的表达水平。结果①复发／难治组病例的WAVE1及耐药相关基因水平明显高于缓解组患儿WAVE1基因表达水平（P〈0．05）；②同一患儿初治及复发时的WAVE1基因水平明显高于缓解期表达水平（P〈0．05）；③与HL60细胞相比较，HL60／ADR细胞WAVE1mRNA及蛋白表达水平增加3．53倍及95％；④转染WAVE1后HL60细胞系MRP1 mRNA和蛋白表达水平分别增加16．54倍、129％，BCRPmRNA和蛋白表达水平分别增加4．93倍及96％，而转染WAVE1 siRNA的HL60／ADR细胞MRP1 mRNA和蛋白的表达水平为干扰前的0．11倍及43％，BCRPmRNA和蛋白的表达水平为转染前的0．14倍及71％。结论WAVE1与儿童AML的病程及预后相关，参与了髓系白血病细胞多药耐药的形成并可影响MRP及BCRP1等多个重要的耐药相关基因的表达和作用。
- 杨明华赵明一贺钰磊汪敏慧王卓谢岷吴秀山曹励之
- 实时荧光定量PCR检测细胞周期蛋白C在小儿急性淋巴细胞白血病中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测人细胞周期蛋白C(CCNC)在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达,以探讨CCNC基因与儿童ALL的关系。方法提取正常儿童、初治儿童ALL骨髓组织及ALL细胞系6T-CEM的总RNA并逆转录为cDNA,应用RQ-PCR法检测CCNC的表达。结果在正常儿童、初治儿童ALL骨髓及6T-CEM细胞系的CCNC的阳性表达率均为100%,在正常儿童CCNC基因平均相对表达强度为13.5±0.30,而在初治儿童ALL中为2.35±0.83,两者比较有统计学意义(P<0.05)。结论CCNC在初治ALL患儿中低表达,提示其有可能是一个抑癌基因。
- 张朝霞曹励之黄琼杨明华王卓俞燕
- 关键词：细胞周期蛋白类急性淋巴细胞白血病荧光聚合酶链反应儿童
- 中国儿童急性淋巴细胞性白血病染色体6q16.3～21区域候选肿瘤抑制基因的定位与鉴定被引量：7
- 2006年
- 为了克隆儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)候选肿瘤抑制基因,首先选取分布于6q16.3～21上的11个多态性微卫星标记,对139例中国儿童ALL标本进行杂合性缺失(LOH)分析.分析显示32%的患者存在至少一个位点的LOH,且高频缺失区位于D6S1709～D6S301之间,大小为2cM.各位点LOH与白细胞总数、病态细胞数有显著性相关(P<0.05),与年龄、性别、形态学分型和免疫学分型无显著相关(P>0.05).进一步在高频缺失区域内,采用定位候选克隆策略、生物信息学技术及RT-PCR技术筛选、鉴定与儿童ALL相关的候选肿瘤抑制基因及其cDNA片段.在D6S1709～D6S301之间筛选到一个在儿童ALL细胞中低表达的EST(GenBank登录号:AA403058),与正常外周血单个核细胞比较,在15例ALL患者中有10例表达下调(P<0.05).采用数字化差异表达分析显示,位于6q16.3～21区域内的AMD1基因、PPIL6基因和WASF1基因在肿瘤组织中的表达丰度要低于正常组织(P<0.05).上述结果为进一步在6q16.3～21区域克隆肿瘤抑制基因提供了线索.
- 康睿曹励之俞燕杨明华张朝霞郭碧贇谢岷陈英谭志红王卓胡婷吴秀山
- 关键词：儿童急性淋巴细胞性白血病肿瘤抑制基因杂合性缺失
