欧阳胜荣 作品数:25 被引量:78 H指数:5 供职机构: 首都儿科研究所 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
TGF-β和IGF-1信号通路调控肾母细胞瘤细胞增殖机制探讨 被引量:7 2017年 目的肾母细胞瘤是一种高发的儿童实体瘤,发病率占儿童恶性肿瘤8%~10%,多发生于<5岁儿童,有研究表明某些信号通路可调控其增殖过程。本研究探讨TGF-β和IGF-1信号通路是否共同参与调控肾母细胞瘤细胞的增殖过程。方法采用siRNA转染实验将TGFBR1-siRNA和IGF1R-siRNA转至肾母细胞瘤细胞株G401,以转染不同siRNA分为TGFBR1-siRNA组和IGF1R-siRNA组,siRNA无关序列(non-siRNA)转染组作为对照组,每组设6个复孔。MTS方法检测TGFBR1-siRNA和IGF1R-siRNA对细胞增殖率的影响,蛋白质印迹法检测TGF-β信号通路TGFBR1及下游蛋白p-ERK、SMAD2/3和p-AKT蛋白表达情况;蛋白质印迹法检测IGF-1信号通路IGF1R及下游蛋白p-AKT蛋白表达情况。ELISA法检测细胞上清中FGF9蛋白表达。结果抑制TGFBR1和IGF1R72和96h后,细胞的增殖率受到抑制,对照组增殖率设为100%。与其相比,转染TGFBR1-siRNA 72h后的实验组和对照组的增殖率分别为(80±14)%和(100±7)%,实验组低于对照组,P=0.034;转染IGF1R-siRNA 72h后实验组和对照组的增值率分别为(85±21)%和(100±7)%,实验组低于对照组,P=0.028。转染TGFBR1-siRNA 96h后的实验组和对照组的增殖率分别为(81±13)%和(100±11)%,实验组低于对照组,P=0.021;转染IGF1R-siRNA 96h后实验组和对照组的增殖率分别为(82±17)%和(100±11)%,实验组低于对照组,P=0.038。抑制TGFBR1后,与non-siRNA组相比,下游蛋白FGF-9、p-ERK、SMAD2/3和p-AKT明显受到抑制。TGFBR1-siRNA转染72h后,实验组细胞上清中FGF9蛋白表达量显著下降,实验组为(533.85±54.64)ρg/mL,对照组为(587.34±46.83)ρg/mL,P=0.041;96h后实验组FGF9蛋白表达量仍显著低于对照组,实验组为(495.03±59.26)ρg/mL,对照组为(605.34±49.28)ρg/mL,P=0.018。TGFBR1-siRNA转染48h后,p-ERK、SMAD2/3和p-AKT蛋白表达量出现降低;72h后,p-ERK和SMAD2/3蛋白表达量仍降低。与non-siRNA转染对照组相比,IGF1R-siRNA转染72和96h后,p-AKT蛋白表达量出现降低。� 刘卓 何峰 李媛媛 欧阳胜荣 曹丁丁 常会波 马斐斐 吴建新关键词:肾母细胞瘤 信号通路 IGF1R 肿瘤增殖 癫痫患儿家长焦虑、抑郁现状调查及其影响因素分析 被引量:22 2013年 目的:了解癫痫患儿家长的焦虑、抑郁现状并分析其影响因素。方法:采用一般情况问卷、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)对2011年5-10月在某儿童医院神经内科就诊或住院的癫痫患儿父亲或母亲共104名进行问卷调查。结果:癫痫患儿家长SAS总得分为(49.41±6.99)分;SDS总得分为(59.68±8.47)分;家长学历和服药疗程知识是家长焦虑的影响因素,家长学历是家长抑郁的影响因素。结论:癫痫患儿家长存在焦虑和抑郁的心理问题,家长学历和服药疗程知识是其焦虑或抑郁的影响因素,可以通过加强对家长进行健康教育、改善患儿治疗效果来改善癫痫患儿家长的心理状况。 杨淑霞 郭柳 欧阳胜荣 宋文红 王秋月 王洪柳 杨健关键词:癫痫患儿 焦虑 抑郁 家长 婴幼儿期血肌酸激酶检测对早期诊断杜氏肌营养不良价值 李媛媛 刘卓 欧阳胜荣 邓莉 王立文 吴建新文献传递 Dystrophin基因3-7号外显子缺失后下游新翻译区启动与BMD关系的生物信息学分析 2009年 目的:研究dystrophin基因3-7号外显子缺失后下游新翻译区启动与贝克氏肌营养不良(Becker muscular dystrophy,BMD)的关系及可能机制。方法:用生物信息学方法对dystrophin基因3-7号外显子缺失后可能的启动子、开放阅读框、翻译起始位点、蛋白疏水性性质改变及重要结构域进行分析。结果:3-7号外显子缺失后,起始于正常肌肉启动子的转录体,其翻译阅读框提前终止,但在8号外显子内可能启动一个新的翻译阅读框;内含子2或7里可能含有类似启动子的元件,也可能导致8号外显子内翻译区的启动。新阅读框编码的蛋白仍然保留有重要的功能区,患者可以表现为BMD。结论:dystrophin基因3-7号外显子缺失后下游新翻译区仍有存在启动的可能,患者可以表现为BMD表型。 欧阳胜荣 李媛媛 刘卓 王立文 吴建新关键词:肌营养不良症 开放阅读框 NanoString nCounter分析系统进行多基因表达计数的评价 2015年 目的:Nano String n Counter是近年发展起来的进行基因表达谱检测的新平台,它利用分子条形码直接对基因表达进行多重计数。本实验通过对m RNA表达量的检测,分析n Counter系统进行基因表达计数的可靠性。方法:应用Nano String公司提供的CAE Kit试剂盒,通过杂交(m RNA样品与报告探针和捕获探针杂交)、纯化(清洗未结合探针)和计数(读取m RNA的条数)三个步骤,检测由人参考RNA和人脑RNA构成的4个样品中48个目的基因的m RNA表达量;对获得的未进行标准化的原始数据,应用Excel 2007软件进行线性分析,从再现性、稳定性、准确性方面对n Counter分析系统进行评估。结果:再现性分析所有R2均大于0.998,线性拟合良好;试剂盒中阳性控制所有R2均大于0.99,高于质控要求的0.95;样品H70B30和H30B70的预期表达量与实测值线性R2大于0.999,预期值与实测值一致性良好。结论:n Counter分析系统稳定性好,准确性高,检测m RNA表达可靠。 欧阳胜荣 刘卓 唐认桥 李媛媛 赵欣 吴建新神经内分泌瘤标志物的检测方法的建立及其临床应用 常会波 李媛媛 刘卓 欧阳胜荣 吴建新MicroRNA在肿瘤发生发展和诊断中作用的研究进展 被引量:9 2016年 microRNA是一类由内源基因编码的长度约为18-25个核苷酸的非编码单链RNA分子,可以与靶基因mRNA的3'非编码区结合,通过降解靶m RNA或(和)抑制靶m RNA转录后翻译调节靶蛋白的生成,从而发挥其生物学作用。目前,在人体基因组内发现的microRNA已经超过2500多个,可能调节着人类1/3的基因,在维持正常干细胞功能、调控细胞增殖分化及恶性肿瘤发生过程中均起重要作用。既往的研究表明microRNA与基因之间相互调控的失衡导致肿瘤的发生。从分子水平上研究microRNA与肿瘤发生的关系,检测microRNA与肿瘤相关基因表达情况的改变,分析肿瘤组织和血清中microRNA表达量与肿瘤分型的关系,将有利于肿瘤的病因学研究,早期发现和肿瘤治疗及预后判断。本文主要就microRNA在肿瘤发生发展和诊断中作用的研究进展进行了综述。 刘卓 欧阳胜荣 李媛媛 常会波 吴建新关键词:MICRORNA 肿瘤发生 儿童胚胎性肿瘤微卫星不稳定性和杂合性缺失的研究 2008年 目的探讨二种儿童胚胎性肿瘤——肾母细胞瘤和神经母细胞瘤中微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)与杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)的状态。方法提取30例肿瘤组织及15例外周血DNA,选取14个微卫星位点(BAT25、BAT26、D2S119、D2S123、D2S136、D2S288、D2S367、D2S391、D3S1029、D3S1076、D3S1277、D3S1561、D3S1611及D3S1612),用PCR扩增及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测微卫星不稳定性和杂合性缺失。结果30例肿瘤标本中8例出现MSI,包括5例肾母细胞瘤和3例神经母细胞瘤。1例神经母细胞瘤出现LOH;BAT25、D2S119、D2S123、D2S136、D2S288、D2S391、D3S1076、D3S1277及D3S16119个位点的MSI阳性率分别为16.7%(5/30),14.3%(1/7),14.3%(1/7),14.3%(1/7),28.6%(2/7),28.6%(1/7),14.3%(1/7),14.3%(1/7)和14.3%(1/7);D2S119、D3S1029、D2S367、及D3S16114个位点的LOH阳性率均为14.3%(1/7)。结论微卫星不稳定性和杂合性缺失现象存在于部分儿童胚胎性肿瘤中,提示此类肿瘤具有基因组不稳定性,DNA错配修复系统异常可能与其发生有关。 刘卓 张丽丽 吴建新 李媛媛 欧阳胜荣关键词:微卫星 杂合性 肾母细胞瘤 神经母细胞瘤 学龄前儿童血铅水平研究(英文) 2003年 目的 了解北京市推广使用无铅汽油后学龄前儿童血铅水平。方法 采用ASV方法对 136 0名 2~ 6岁保健门诊儿童血铅水平进行测定 ,同期检测 6 16名幼儿园儿童并比较。结果 检测 1976名儿童中 ,铅中毒 (血铅水平 >10 μg/dl,1μg/dl=0 .0 4 83μmol/L)儿童 2 5 8人 ,占 13.1% ,幼儿园和儿童保健门诊儿童平均血铅水平分别为 (4 .93± 3.3) μg/dl、(6 .6 2± 4 .5 7) μg/dl,两组间差异有显著性P <0 .0 0 1。 结论 北京市儿童血铅水平及流行率明显下降 ,幼儿园儿童低于保健门诊儿童。 杨慕兰 金春华 宋文红 吴建新 李媛媛 欧阳胜荣 陈隽 李梅 张霆关键词:学龄前 儿童 血铅水平 铅中毒 环境污染 3岁以下儿童铅中毒临床分析 被引量:3 2008年 目的了解婴幼儿铅中毒状态及程度。方法对前来保健门诊健康体检的4543例3岁以下儿童进行血铅含量测定,并将婴幼儿分为1个月~、6个月~、12个月~、18个月~、24个月~、30~36个月6组。以SAS8.0统计软件进行统计分析。结果铅中毒检出率为2.05%,3岁以下儿童血铅水平随月龄的增长而增高。结论在接受血铅水平检测的婴幼儿中,高铅血症的检出率随年龄增长而增加,铅中毒则年龄越小检出率越高。要注意控制婴幼儿接触铅的各种途径。 张悦 李媛媛 金春华 杨慕兰 杨瑞华 王春霞 欧阳胜荣 吴建新关键词:婴幼儿 血铅水平 铅中毒