梁晶晶
- 作品数:39 被引量:42H指数:4
- 供职机构:广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生政治法律经济管理更多>>
- 鬼针草对产ESBLs大肠杆菌耐药逆转作用机理的研究
- 司红彬何家康王秋华夏娟梁晶晶郑艳青宋剑武
- 大肠杆菌是常见的条件致病菌和易产生耐药性的细菌,研究证实耐药的主要机制之一是产生β-内酰胺酶为主的多种耐药基因,尤其是超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),可较强和快速的水解β-内酰胺环,使这类抗生素丧失抗菌活性。ESBLs...
- 关键词:
- 关键词:大肠杆菌中药药性抗生素药物
- 猪肺炎支原体PCR检测方法的建立及初步临床应用被引量:6
- 2010年
- 根据GenBank中猪肺炎支原体(Mhp)J株P36蛋白基因(登录号X67286)的核苷酸序列设计1对引物,建立了快速检测Mhp的PCR方法。该方法能扩增出948bp的Mhp特异性条带,其敏感性达到可检测出0.735ng的Mhp DNA,但对鸡毒支原体、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、猪流感病毒、猪呼吸与繁殖综合征病毒均未检测出相应目的条带;将克隆获得的目的片段与GenBank已发表的Mhp J株的P36基因进行比较,同源性达到99.9%。采用所建立的PCR方法对42份疑似猪支原体肺炎(MPS)病料进行临床诊断,发现有13份呈阳性(31.0%)。可见,该PCR方法适合于MPS的临床诊断,可为其防控提供可靠依据。
- 张红云梁晶晶李回孟先明潘艳冯励罗廷荣
- 关键词:猪支原体肺炎猪肺炎支原体PCR
- ISG15蛋白泛素结合酶UBCH6的原核表达及多克隆抗体制备被引量:4
- 2020年
- 通过抽提接毒猪瘟病毒(CSFV)的PK-15细胞RNA,以RT-PCR方法克隆UBCH6基因,并与pMD18-T载体连接,再通过双酶切法将UBCH6基因与原核表达载体pGEX-4T-1、真核表达载体pcDNA3.0连接。重组原核表达载体pGEX-UBCH6用感受态细胞BL21转化,并在低温条件下,用低浓度的IPTG诱导表达UBCH6重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色结果显示,在30℃、用0.05 mmol/L IPTG诱导时UBCH6表达效果最好,而且UBCH6重组蛋白主要以可溶性的形式在菌液中表达。UBCH6重组蛋白经过Ni-NTA纯化后与弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂等体积混合乳化并免疫4周龄昆明小鼠,从而制备出UBCH6多克隆抗体,重组真核表达载体pcDNA3.0-UBCH6以化学转染人工脂质体法导入293T细胞中,Western blot检测制备的UBCH6多克隆抗体能与真核表达细胞蛋白发生反应,反应效价可达1∶10000,反应性良好。Western blot检测UBCH6多克隆抗体的特异性,ISG15多克隆抗体、UBCH6多克隆抗体都能与接毒CSFV、转染PolyI:C的PK-15细胞蛋白发生良好反应,且蛋白表达量与时间呈正相关。
- 李玉霄唐榕泽高跃美冯佳佳李晓泉梁晶晶梁晶晶罗廷荣
- 关键词:多克隆抗体猪瘟病毒
- 猪源IKKγ在原核和真核表达系统中的表达及其多克隆抗体制备被引量:5
- 2020年
- 【目的】制备猪源IKKγ多克隆抗体,为进一步研究IKKγ蛋白生物学特性及揭示IKKγ蛋白与猪瘟病毒(CSFV)间相互作用机制打下基础。【方法】利用RT-PCR从猪肾细胞(PK-15)中克隆原核表达的IKKγ基因功能片段(561 bp),与原核表达载体pET-32a(+)构建原核重组质粒pET-IKKγ,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后进行IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经纯化和浓缩后,免疫小鼠制备猪源IKKγ多克隆抗体。同时克隆IKKγ基因全长序列(1356 bp),与真核表达载体pCMV-HA构建真核重组质粒pCMV-HA-IKKγ,分别转染293T细胞和PK-15细胞,检测融合蛋白表达情况。【结果】以原核重组质粒pET-IKKγ转化BL21感受态细胞,经IPTG诱导能表达出约40 kD的融合蛋白,且融合蛋白主要以可溶性蛋白形式进行表达,可通过Ni-NTA亲和层析柱进行纯化,已获得较高纯度的融合蛋白IKKγ。构建的真核重组质粒pCMV-HA-IKKγ能在293T细胞中成功表达出IKKγ蛋白;制备获得的猪源IKKγ多克隆抗体能与293T细胞表达融合蛋白IKKγ发生特异性反应,其抗体效价为1∶16000,与PK-15细胞表达IKKγ蛋白也具有良好的反应性,其中CSFV感染后36 h是IKKγ蛋白表达高峰期。此外,制备获得的猪源IKKγ多克隆抗体能在PK-15细胞中成功检测到IKKγ蛋白,说明猪源IKKγ多克隆抗体与真核细胞瞬时表达的IKKγ蛋白特异性良好。【结论】制备获得的猪源IKKγ多克隆抗体具有效价高、特异性强等特点,可用于检测CSFV感染PK-15细胞中IKKγ蛋白表达水平,为下一步研究IKKγ蛋白生物学特性及揭示NF-κB信号通路转录调节功能机制提供技术支持。
- 赵祥秀黄茂发高跃美唐榕泽胡仁俊梁晶晶李晓宁李晓宁
- 关键词:真核表达多克隆抗体
- 泰国中学汉语课堂教学管理研究——以泰国素攀府乌通中学为例
- 在对外汉语教学中,课堂教学可谓是重中之重,教学任务得以顺利开展、完成是对外汉语教学工作的最终目标,而课堂管理是课堂教学得以顺利进行的保障。因此,课堂管理对课堂教学的完成尤为重要。但是,在课堂教学实践中,汉语教师常常会发现...
- 梁晶晶
- 关键词:中等教育汉语教学课堂管理
- 钦北区强化农村家犬免疫促进狂犬病的防控被引量:2
- 2019年
- 狂犬病(Rabies)是由弹状病毒科的狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)侵入中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)引起的一种高度嗜神经性急性致死性人兽共患传染病,也称“恐水症”,俗称“疯狗病”,可导致包括人在内的几乎所有温血动物死亡。狂犬病呈世界性流行,WHO估计全球每年约5.9万人因该病死亡,其中95%人患狂犬病由疯狗咬伤引起[1]。亚洲每年有1100万人被犬咬伤,中国是受该病危害最严重的国家之一[2],人死亡病例仅次于印度,世界排名第二,集中于广西广东及周边省份等南部地区。目前尚无药物治疗狂犬病,只能做好预防才能有效控制该病的发生和传播。
- 苏萍谢民班克满曹频英何大展张红云梁星雪曹晗梁晶晶李晓宁罗廷荣
- 关键词:人兽共患传染病狂犬病病毒嗜神经性恐水症犬咬伤
- 广西三个猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5及NSP2基因的克隆与分析被引量:1
- 2022年
- 本研究对从广西某猪场采集3份疑似感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的病料进行RT-PCR鉴定、GP5基因及NSP2部分基因测序分析。结果显示,从3份病例样品中扩增得到PRRSV GP5全基因和NSP2部分基因片段,并对其进行测序分析,3株PRRSV毒株均与参考毒株JXA1存在高度的亲缘关系,与PRRSV美洲经典VR-2 332株不同,其NSP2蛋白不连续缺失30个氨基酸为HP-PRRSV毒株的典型特征,这与国内其他变异株的缺失情况一致。从遗传进化角度分析,本研究得到的毒株与JXA1及TJ毒株具有相似来源。
- 唐紫燕高跃美张红云梁晶晶罗廷荣李晓宁
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因GP5基因遗传进化分析
- 一种对产ESBLs大肠杆菌产生耐药抑制的中药筛选方法
- 一种对产ESBLs大肠杆菌产生耐药性影响的中药筛选方法,在96孔板上采用微量试管二倍稀释法测定西药和拟筛选中药对产ESBLs大肠杆菌株的最小抑菌浓度,然后在培养基中加入亚抑菌浓度的中药再次使用微量试管二倍稀释法培养测定西...
- 司红彬黄凯夏娟蒋利和何家康何山红王秋华梁晶晶郑艳青宋剑武
- 文献传递
- CRISPR多重基因编辑技术敲除鸡TVB基因及新型多重基因编辑体系的建立
- 禽白血病(avian leukosis)被认为是造成养禽业严重经济损失的重要原因之一,但目前对该病缺乏有效的防治手段。鸡TVB(tumor virus locus B)是控制B亚型禽白血病病毒(avian leukosi...
- 梁晶晶
- 关键词:禽白血病
- 一种利用基因编辑鸡生物反应器表达的重组曲妥珠单抗及应用
- 一种利用基因编辑鸡生物反应器表达的重组曲妥珠单抗及应用,属于基因工程技术领域。其核苷酸序列如序列表No.1所示,其表达两段氨基酸序列如序列表No.2和No.3所示。根据CRISPR/Cas9基因编辑系统构建了含有该基因的...
- 唐小川梁晶晶魏姣梁瑞益