林恒
- 作品数:5 被引量:4H指数:2
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程环境科学与工程更多>>
- 乳糖对甲基对硫磷水解酶的诱导作用及培养条件的优化
- 基因工程菌E. coli BL21/pET32a-mpd可以诱导表达重组的甲基对硫磷水解酶(MPH),为了实现工业化大量生产MPH,使用乳糖为诱导剂,首先考察了碳源、氮源、金属离子、培养温度、乳糖浓度及诱导时间等对产酶的...
- 林恒赵晓丽刘卫东曹慧李顺鹏崔中利
- 关键词:甲基对硫磷水解酶正交实验高密度发酵乳糖
- 文献传递
- 邻单胞菌M6中甲基对硫磷水解酶(MPH)的纯化及性质的研究被引量:2
- 2006年
- 通过热变性、硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex-A50阴离子交换层析和CM Sepharose Fast Flow阳离子交换层析等一系列步骤从有机磷农药降解菌Plesiomonas sp.M6中获得了甲基对硫磷水解酶(Methyl parathion hydrolase,MPH,EC3.1.8.3)的电泳纯。酶谱显示和SDS-PAGE电泳表明纯化的酶只有一条条带,其分子量约为33kD。该酶热稳定性比较高,55℃、15min处理后酶活保持稳定,最适反应pH为9.0,景适反应温度在10℃左右。动力学分析表明其对甲基对硫磷的米氏常数(Km)为2.14mmol/L,最大反应速度(Vmax)为14.08μmol/L.min,转换数(kcat)为2863s^-1。
- 徐玮林恒刘卫东李顺鹏崔中利
- 关键词:纯化
- 重组有机磷水解酶发酵条件的优化和酶制剂的研究
- 本文进行了重组甲基对硫磷水解酶(MPH)在大肠杆菌(Fscherichia coli)中表达条件优化研究,根据重组表达菌株Ecoli B121(DE3)/pET29a-mpd的生长特性及产酶情况,在乳糖诱导下,经过单因素...
- 林恒
- 关键词:酶制剂
- 文献传递
- 一种有机磷水解酶重组表达菌株高密度发酵方法及产品保存方法
- 本发明涉及一种有机磷水解酶重组表达菌株高密度发酵方法及产品保存方法,属于环境生物技术领域。本发明将有机磷水解酶MPH重组表达菌株Eshcherichia coliBL21(DE3)pETMb进行了高密度培养条件优化,使得...
- 崔中利曹慧林恒顾海莎李顺鹏
- 文献传递
- 重组有机磷水解酶MPH的发酵条件的优化研究被引量:2
- 2007年
- 有机磷水解酶在去除有机磷农药残留中具有重要的应用前景。在Escherichia coli BL21(DE3)中实现了有机磷水解酶(MPH)的重组诱导表达之后,为了实现工业化生产MPH,考察了以乳糖为诱导剂,碳源、氮源、金属离子、培养温度、乳糖浓度及诱导时间等对产酶的影响,得到了优化的发酵条件,L9(34)正交实验进一步确定了最佳的碳源、氮源及乳糖浓度。在此基础上利用7L自控发酵罐进行了发酵过程研究,经12h培养,得到菌体12.65g(DCW)/L,MPH表达量为14.56%,酶活18.69I U/mL。
- 林恒赵晓丽刘卫东曹慧李顺鹏崔中利
- 关键词:甲基对硫磷水解酶乳糖正交实验