李伟
- 作品数：36 被引量：93H指数：5
- 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：扬州大学校科研和教改项目国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术医药卫生更多>>
- 一种酶免疫传感器的制备和性能测试被引量：2
- 2002年
- 这种酶免疫传感器是采用丝素蛋白溶液将待测抗原(兔IgG)固定在基础电极表面,选用抗体(山羊抗兔IgG-HRP)与其识别结合.利用H2O2将抗原抗体结合的电位响应信号放大而检测抗原的浓度.该传感器测定抗原的最低检测浓度1.0×10-10mol/L,线性范围1.0×10-8～1.0×10-10mol/L,响应时间为10 s.通过电泳的方法加速抗原抗体的识别结合,反应时间由原来的90 min缩短到30 min,这在国内外鲜有报道.这种以固定化抗原结合酶标抗体量的多少作为检测抗原标准的新型酶免疫传感器,在临床检测、生物医学研究等领域将会有广阔的应用前景.
- 刘印林李伟潘宁李幼荣
- 关键词：生物敏电极再生丝素IGG
- 稀土元素对生物体CaM水平调节的剂量效应的研究被引量：2
- 2002年
- 从 Ca2 + 、 Ca M、 Ca2 + ATP酶 3个层次综述了稀土元素对生物体 Ca M水平调节的剂量效应及其作用机理。
- 李伟梁建生潘志明李幼荣邱关明
- 关键词：生物体稀土元素生物体
- 再生丝素固定的酶免疫传感器及其应用前景的研究被引量：1
- 2002年
- 酶免疫传感器是采用再生丝素将待测抗原 (免IgG)固定在石墨电极表面 ,选用抗体 (山羊抗兔IgG-HRP)与其识别结合。利用H2 O2 将抗原抗体结合的电位响应信号放大 ,采用直接电位法检测IgG的浓度。该传感器测定IgG的最低检测浓度可达 1.2× 10 -10 mol/L ,标准曲线的线性范围在 4.1× 10 -7～ 1.2× 10 -10 mol/L ,响应时间为 15s。通过电泳的方法加速抗原抗体的识别结合 ,反应时间由原来的 90min缩短到 30min ,这在国内外鲜有报道。以固定化抗原结合酶标抗体量的多少作为检测抗原标准的新型酶免疫传感器 ,不仅在临床检测、生物医学研究领域中 ,而且在动植物疾病检测、环境监测、HLA个人身份鉴定、PC安全、物理访问 (门禁 )、军事等领域都有着广阔的应用前景。
- 李伟李幼荣潘宁
- 关键词：再生丝素IGG电泳固定化酶
- 山羊iPS细胞诱导及培养体系的优化
- 2014年
- 为了高效、持续的诱导获得并培养山羊诱导性多能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS),本研究从饲养层和培养液方面进行优化。将分离获得3代以内的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast,MEF)、山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblast,GEF)用丝裂霉素C处理后,分别按1×105 mL-1 MEF、1×105mL-1 GEF、5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的密度接种,以高糖DMEM+20%胎牛血清(FBS)和KnockoutDMEM+20%血清替代物(KSR)为培养液,研究不同饲养层种类和培养液对山羊iPS细胞获得和培养的影响。结果显示,山羊iPS细胞在接种密度为5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的饲养层上,使用KnockoutDMEM+20%KSR组合的培养液,山羊iPS细胞的诱导效率以及消化传代后的克隆形成率均极显著高于其他5组(P<0.01)。对该组培养的山羊iPS细胞进行碱性磷酸酶(AKP)染色呈阳性;Oct4、SSEA-1、Tra-1-60、Tra-1-81免疫荧光检测呈阳性;RT-PCR检测有Oct4、Sox2、Klf4和Nanog基因的表达;体外能分化形成类胚体。结果表明,将细胞接种在密度为5×104 mL-1 MEF+5×104 mL-1 GEF的饲养层上,使用KnockoutDMEM+20%KSR的培养液更适合山羊iPS细胞的获得和培养。本试验为山羊iPS细胞的体外研究、临床试验、动物基因组修饰和山羊胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES)的建系奠定基础。
- 邱峰龙左其生李东李伟陈庭锋韦光辉李碧春
- 关键词：饲养层培养液IPS细胞山羊
- 徐淮山羊H-FABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备被引量：7
- 2012年
- 旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆徐淮山羊H-FABP基因cDNA,进行生物信息学分析,构建其融合表达载体pEGFP-H-FABP。脂质体(LTX)介导基因转染山羊成纤维细胞(GEF),48h后进行荧光检测,RT-PCR检测mRNA在细胞内的表达。利用睾丸注射将目的基因转入小鼠体内,在DNA和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。结果,徐淮山羊H-FABP基因完整编码区(CDS)大小为402bp,编码133个氨基酸,GenBank登录号为AY466498.1。徐淮山羊H-FABP序列与人、鸡、褐家鼠、奶牛、野猪、驴及斑马鱼相应编码区同源性为89%、76%、85%、84%、93%、91%、70%,氨基酸序列同源性为90%、79%、88%、97%、95%、94%、72%。成功构建融合表达载体pEGFP-H-FABP,目的基因在mRNA水平上成功表达。目的蛋白定位于细胞质中,与在线预测结果相同(无信号肽,定位于细胞质中)。通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内实现暂态表达和持续性表达。本研究成功克隆了徐淮山羊H-FABP基因cDNA,而且H-FABP基因在进化过程中是保守的。该蛋白无信号肽,在单细胞水平上可表达于细胞质中,在小鼠体内也可以成功表达。
- 阴彦辉韦光辉李伟朱才业张亚妮杜立新曹文广李碧春
- 关键词：徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白荧光蛋白转基因鼠
- T-DNA插入突变体导致甘蓝型油菜种子脂肪酸含量的变化
- 本文通过农杆菌介导方法将双元载体pCambia2031转化快速生长型甘蓝型油菜,收获的T0代种子及T1代植株经PCR鉴定和遗传分析,获得单拷贝的纯合的T-DNA插入突变体51株。对T-DNA插入突变体T2代种子进行了脂肪...
- 吴磊刘银李伟Eicke Rudloff王幼平
- 关键词：甘蓝型油菜T-DNA插入突变体脂肪酸含量
- 文献传递
- 人转铁蛋白为载体的两种免疫毒素对肿瘤细胞体外杀伤作用的比较
- 李伟
- 稀土元素对生物体DNA剂量效应被引量：4
- 2002年
- 综述了稀土元素对生物体DNA的剂量效应,从稀土元素对DNA的含量、与DNA的结合、对DNA热变性、DNA的水解及DNA损伤的影响等方面探讨了其剂量效应的机理,以期为该领域的进一步研究提供参考。
- 李伟梁建生李幼荣邱关明潘宁
- 关键词：稀土元素
- 稀土元素对蛋白质的影响的剂量效应及其机理被引量：1
- 2001年
- 本文综述了稀土元素对生物体蛋白质的剂量效应,并从稀土元素对CaM、ATP酶、同 工酶及其它蛋白质和酶的影响等方面探讨了其剂量效应的机理,以期为该领域的进一 步研究提供参考。
- 张明李幼荣李伟潘宁
- 关键词：稀土元素蛋白质活性生物效应
- 稀土生物调节剂——细胞篇
- 稀土可对细胞膜、细胞防御系统、核酸代谢酶和核酸等起生物调节作用,能有效清除细胞内的自由基,增强细胞免疫能力,抑制癌细胞的增殖。稀土主要通过竞争取代生物分子(如ATPase)中重要的靶生物金属(如钙)以及与配体分子(如维生...
- 李伟邱关明李喜坤严长浩周威
- 关键词：生物无机化学细胞稀土
- 文献传递
