徐小洁 作品数:135 被引量:176 H指数:7 供职机构: 北京大学第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 北京市科技新星计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 文化科学 更多>>
一种胸腹腔积液引流装置 本实用新型公开了一种胸腹腔积液引流装置,包括引流管,其特征在于,所述引流管上部的外壁上设有侧孔,胸腹腔积液通过侧孔进入引流管内;所述引流管的下部套有漏液收集袋;所述漏液收集袋的底部密闭固定在引流管的外壁上,漏液收集袋的上... 宋琪 盛炜 刘芳 张晓玲 陈美玲 汪丹 焦顺昌 冀全博 徐小洁文献传递 miR-424对雌激素受体α表达的抑制作用 被引量:1 2014年 目的:筛选能够抑制在乳腺癌发生中起关键作用的雌激素受体α(ERα)表达的microRNA(miRNA)分子,并在ERα阳性的乳腺癌细胞株中初步检测其生物学功能。方法:在ERα阳性的乳腺癌细胞ZR75-1中转染多种miRNA的表达载体,Western印迹检测ERα的表达水平,找到可以抑制ERα表达的miRNA分子;将该miRNA的表达载体转染ZR75-1后,在雌激素E2的作用下,检测该miRNA分子对细胞生长的影响。结果:经过筛选,得到能够抑制ERα表达的miRNA分子miR-424;生长曲线结果显示,miR-424能够在不依赖于E2的情况下阻抑ZR75-1的生长。结论:该研究为进一步研究miR-424在ERα信号通路中的生物学功能及研究乳腺癌的发生发展机制奠定了基础。 秦玺 徐小洁 饶春明 高凯 杨琦 史新昌 于雷 周勇 杨玉帅 程龙 叶棋浓 王军志关键词:雌激素受体Α MICRORNA 乳腺癌 人自噬相关基因3原核表达及蛋白纯化和鉴定 被引量:3 2015年 自噬相关基因3(autophagy related gene 3,ATG3)及其对应的蛋白是一种泛素样缀合酶。研究发现,细胞自噬体的形成,离不开2个必需系统的参与:1个是对于ATG12与ATG5两种自噬蛋白结合形成微管相关蛋白-轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)前体的调节系统,此阶段需要El样酶ATG7和E2样酶ATG10共同参与活化,1个是对于自噬体LC3蛋白的脂化系统[1],它们都属于泛素样蛋白结合系统,而ATG3作为泛素样缀合酶,在LC3蛋白的脂化系统中起到重要作用。 纪贝贝 徐小洁 张立 黄蓉 范忠义 王涛 叶棋浓 杜楠关键词:原核表达 纯化 自噬 人抑癌基因NKX2-3真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞生长的作用 被引量:1 2015年 目的:构建人抑癌基因NKX2-3的真核表达载体,并验证其对肿瘤细胞生长的影响。方法:采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人NKX2-3基因,将其克隆到Flag-pc DNA3.0载体中,酶切和测序验证后转染人胚肾293T细胞,蛋白免疫印迹鉴定其表达;转染人结肠癌细胞HCT-116和肝癌Hep G2细胞,通过CCK8法测定细胞生长曲线。结果:从人乳腺文库中扩增得到约1080 bp的DNA片段,并克隆至Flag-pc DNA3.0载体上,测序结果与目的序列完全一致;转染人胚肾293T细胞后,目的基因获得表达;细胞生长曲线结果显示,转染Flag-NKX2-3的人结肠癌、肝癌细胞较空载体细胞生长慢。结论:构建了Flag-NKX2-3真核表达载体,为进一步研究NKX2-3在肿瘤中的功能奠定了基础。 冯滢滢 郭靖 刘家宏 徐小洁 张云静 陈云萍 叶棋浓 赵克关键词:真核表达 肿瘤细胞 利用GST融合蛋白表达系统表达与纯化人N-Ras蛋白 被引量:1 2015年 目的:克隆人N-ras蛋白全长编码区基因,获得其原核表达产物,并对融合蛋白进行纯化。方法:采用PCR技术从人乳腺文库中扩增出人N-ras蛋白全长编码区基因,将其克隆到p GEX-KG载体中,在大肠杆菌Rossate中表达后,利用GST-Sepharose 4B亲和珠对原核表达产物进行纯化,SDS-PAGE鉴定表达与纯化产物。结果:从人乳腺文库中扩增获得约600 bp的DNA片段,并克隆至p GEX-KG载体上,经测序与目的序列完全一致;在大肠杆菌Rossate中诱导表达出相对分子质量约47×103的目的蛋白;纯化后,经鉴定获得了纯度较高的重组蛋白GST-N-Ras。结论:获得了重组蛋白GST-N-ras,为后续深入研究Ras基因与其他癌基因、抑癌基因的相互作用奠定了基础。 张云静 冯滢滢 徐小洁 梁迎春 张立 王涛 李玲 郭靖 纪贝贝 张蓉 叶棋浓关键词:小G蛋白 原核表达 纯化 敲低EYA3基因抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长 2019年 为了探讨人眼缺失基因(EYA3)在人视网膜母细胞瘤发生发展中的生物学作用,构建了EYA3小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,并验证敲低效果和观察其对人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞生长的影响.根据人EYA3的cDNA序列,将设计含有小发卡结构的寡核苷酸序列克隆到siRNA表达载体上;将重组质粒转染HEK293T细胞中,通过实时定量RT-PCR及Western印迹检测EYA3基因的表达水平;重组质粒稳定转染人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞并利用生长曲线检测EYA3对其生长的影响.结果表明:构建的siRNA能够抑制EYA3基因的表达,生长曲线验证EYA3 siRNA基因能抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长.最后结论是EYA3 siRNA能够抑制人视网膜母细胞瘤WERI-Rb-1细胞的生长,本实验为进一步研究EYA3在视网膜母细胞瘤中的功能奠定了基础. 韩笑 燕正强 徐小洁 李佳 刘园园 梁九思 闫志风 叶棋浓 刘丹关键词:SIRNA 细胞生长 Wnt经典信号通路在兔激素性股骨头坏死中的作用 目的 动态观察Wnt经典信号通路相关蛋白和基因在兔激素性股骨头坏死模型中的表达变化。方法 健康新西兰大白兔72只,雌雄各半,随机分为对照组和模型组各36只。模型组采用内毒素(10mg/kg)联合甲强龙(20mg/kg)造... 冀全博 徐小洁 张强 徐亚梦 康磊 郑国权 张国强 柴伟 李众利 刘玉杰 唐佩福 王岩关键词:股骨头坏死 WNT信号通路 成骨分化 结缔组织生长因子在雌激素信号通路参与肝纤维化发生中的作用 被引量:1 2012年 临床流行病学资料显示肝纤维的发生存在有显著性别差异。研究证实,雌激素通过雌激素受体信号通路直接参与调控肝纤维化的发生。结缔组织生长因子是一种重要的肝纤维化发生相关细胞生长因子,其可能作为雌激素受体共调节因子,直接调控肝纤维化的发生。 韩聚强 徐小洁 徐小洁关键词:肝硬化 结缔组织生长因子 γ/δ T细胞与丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒感染 被引量:3 2012年 病毒性肝炎的发病机制迄今尚未完全明确,诸多证据表明,乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)所致肝炎可能是肝脏细胞免疫防御反应病毒入侵的结果。γ/δT细胞是新近认识的一个T细胞亚群,是机体抵抗外来病原微生物入侵的重要天然免疫细胞之一。近年研究发现,肝内富含γ/δT细胞,而病毒性肝炎肝内γ/δT细胞数量显著增高。目前有关γ/δT细胞与肝炎病毒感染的研究主要集中在HCV感染领域,即γ/δT细胞通过分泌多种细胞因子抑制体内HCV的复制。目前,有关γ/δT细胞与HBV感染的报道甚为少见。慢性HBV感染体内可能导致γ/δT细胞免疫学功能异常,这可能是导致体内病毒性乙型肝炎慢性化的主要原因之一。 韩聚强 徐小洁 叶棋浓关键词:T细胞 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 小鼠原代肝星状细胞的分离、鉴定及生物学功能分析 被引量:1 2017年 目的:探索C57.BL/6J小鼠肝星状细胞(HSCs)分离、纯化的可行方案,并评价该法所得HSCs的生物学特性。方法:经肝门静脉,先用不含钙镁离子的D-Hanks液充分灌注肝脏,再以适宜浓度的链霉蛋白酶和Ⅳ型胶原酶顺序灌注,随后Percoll非连续密度梯度离心分离、纯化HSCs,台盼蓝拒染法检测HSCs活性,光镜观察体外培养的HSCs的形态学变化,免疫细胞化学鉴定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白的表达,Western印迹检测α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:纯化后每只小鼠获得HSCs约5.5×105个,纯度及存活率均大于95%;免疫细胞化学技术证实培养的HSCs分别表达α-SMA和结蛋白;Western印迹显示原代HSCs体外培养7 d时,α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达量达到峰值。结论:建立的分离、纯化方案可获得高纯度、高活率、功能正常的小鼠原代HSCs,为进一步研究肝纤维化的发病机制提供了技术保障。 韩聚强 韩聚强 杜静华 徐小洁 刘文鹏 李佳睿 李佳睿关键词:肝星状细胞 原代培养 细胞分离 小鼠