张维军
- 作品数：34 被引量：60H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CTL表位的筛选与鉴定
- 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome ,PRRS)是危害养猪业最重要的病毒性传染病之一,严重阻碍了世界养猪业的发展。由于PRRSV的变异与重组、病...
- 张维军
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因CTL表位酶联免疫斑点试验
- 文献传递
- 马γ-干扰素成熟蛋白基因在大肠埃希氏菌中表达及其抗病毒活性的鉴定
- γ-干扰素主要由激活的 T 细胞和 NK 细胞产生,是机体内具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能的重要细胞因子。内源性 IFN-γ水平的高低在很大程度上可以反映机体的细胞免疫状态,对样本中的 IFN-γ进行定量分析,在免疫机...
- 白宇童铁钢刘光亮肖一红王群徐树兰张维军吴东来
- 关键词：Γ-干扰素原核表达抗病毒活性
- 文献传递
- 5种人兽共患病病毒多重RT-PCR检测方法的初步建立被引量：10
- 2009年
- 为建立可同时检测裂谷热病毒(RVFV)、戊型肝炎病毒(HEV)、狂犬病毒(RV)、水泡性口炎病毒(VSV)及口蹄疫病毒(FMDV)5种人兽共患病病毒的多重RT-PCR快速检测方法,本研究根据GenBank登录的上述5种病毒的全基因组序列,设计了5对多重PCR引物,通过优化反应条件,建立检测以上5种病毒的多重RT-PCR方法。通过对同一种属的其他病毒及相关病毒的检测,确定方法的特异性;通过对体外转录合成的RNA进行定量检测的方法,确定方法的敏感度。实验结果表明:在同一RT-PCR反应体系中可同时检测以上5种病毒,扩增片段长度分别为499bp、137bp、274bp、224bp、389bp;而对新城疫病毒(NDV)、赤羽病病毒(AKAV)、牛流行热病毒(BEFV)和乙型脑炎病毒(JBEV)的检测均为阴性;5种病毒RNA的最低检测拷贝数分别为2.91×104、3.14×103、1.25×103、6.65×103和2.38×104。利用该方法对11份RV已知阳性样本和7份HEV已知阳性样本检测结果均呈阳性。本研究建立了一种快速、可同时检测5种人兽共患病病毒的多重RT-PCR检测方法,该方法具有良好的特异性和较高的敏感性。
- 孙庆歌杨银辉张维军王群康晓平李永强白宇童铁钢杨涛步志高吴东来
- 关键词：戊型肝炎病毒狂犬病毒水泡性口炎病毒口蹄疫病毒多重RT-PCR
- 重组马γ-干扰素抗病毒活性测定及单克隆抗体抑制活性鉴定被引量：2
- 2008年
- 为了测定大肠杆菌和杆状病毒表达的重组马γ-干扰素是否具有抗病毒活性,利用这两种干扰素处理马胎肾细胞(EFK-78),然后接种表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水泡性口炎病毒(VSV*GFP),观察干扰素对病毒表达GFP的抑制,测出其抗病毒活性单位分别为1×103AU/mL、1×105AU/mL。评价了制备的九株抗重组马γ-干扰素单克隆抗体是否可抑制重组马γ-干扰素抗病毒活性,证实其中一株可中和重组马γ-干扰素的抗病毒活性。结果表明:杆状病毒表达的马γ-干扰素具有较高的抗病毒活性,其活性可被一株制备的抗重组马γ-干扰素单克隆抗体抑制;首次获得原核表达的具有抗病毒活性的马γ-干扰素。
- 白宇陈伟业童铁钢张维军徐树兰王群孙庆歌刘光亮步志高吴东来
- 关键词：单克隆抗体
- 含禽源启动子的禽流感病毒核蛋白表达载体的构建及其免疫原性的检测
- 为了研究禽流感病毒核蛋白在鸡体内所引起的免疫反应,将其NP基因从重组质粒pVAX-NP上酶切后亚克隆至含禽源启动子的真核表达载体pCAGGS中,经筛选鉴定后获得重组子pCAGGS-NP,将鉴定正确的阳性重组子体外转染真核...
- 王群刘光亮肖一红童铁钢白宇张维军徐树兰吴东来
- 关键词：禽流感核蛋白真核表达载体血清抗体
- 文献传递
- 检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立被引量：5
- 2009年
- 目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleu-kin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法。方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA。结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓度为4mg/L,检测抗体的工作效价为1∶2000。建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15ng/L,特异性良好。结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础。
- 童铁钢白宇张维军王群刘光亮徐树兰吴东来
- 关键词：单克隆抗体夹心ELISA
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CTL细胞表位及其应用
- 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CTL细胞表位及其应用。本发明将猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株M蛋白基因与小鼠泛素基因进行融合并克隆构建DNA疫苗，同时构建了表达M蛋白的WR株牛痘病毒的重组病毒；按照Prim...
- 吴东来张维军刘霓红白宇林燕童铁钢王群杨涛
- 文献传递
- 串联表达Ubiquitin基因与PRRSV M基因DNA疫苗的构建及其对小鼠的免疫试验
- 利用SOE技术将PRRSV M基因与小鼠泛素(Ubiquitin,Ub)基因融合,并将融合后的基因克隆至真核表达载体pVAX1中,构建真核表达质粒pVAX1-U-M。利用真核表达质粒DNA免疫小鼠,通过检测体液免疫反应与...
- 张维军林燕王群孙庆歌杨涛童光志吴东来
- 关键词：泛素DNA疫苗真核表达载体
- 文献传递
- 鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及其产品
- 本发明公开了一种鸡主要组织相容性复合体/肽四聚体的构建方法及由该方法得到的产品。本发明在大量表达的重组BF2－BSP、重组Chβ2m以及合成多肽的基础上，重折叠获得了BF2/肽单体复合物，进而在此基础上进行生物素化，制备...
- 吴东来刘光亮王群肖一红童铁钢白宇张维军徐树兰张文龙殷喆
- 文献传递
- 西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定
- 通过PCR方法扩增西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS...
- 马健男吴东来杨涛王群张维军徐青元田野林燕宋红梅步志高
- 关键词：西尼罗病毒原核表达融合蛋白
- 文献传递
