张明磊 作品数:7 被引量:31 H指数:4 供职机构: 黑龙江中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金 黑龙江省博士后科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型TYR及其相关蛋白mRNA表达的影响 被引量:7 2014年 目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA的表达。结果:逍遥散大孔树脂柱层析40%乙醇洗脱部位对细胞共培养模型作用显著,与阴性对照组比较,逍遥散4、2 g/L组黑素量分别下调82.23%、93.01%;TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达量分别下调29.11%、23.78%、20.05%和25.13%、15.02%、11.64%(P<0.01)。结论:逍遥散有效部位提取物可能通过下调TYR、TRP-1和TRP-2 mRNA的表达而降低人黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成量。 张宁 刘慧 张明磊 刘斌 任燕冬 王雪 李建民关键词:逍遥散 黄褐斑 补骨脂素对A375细胞黑素合成及相关细胞信号通路调控的研究 被引量:6 2014年 目的研究补骨脂素对A375细胞黑素合成的影响以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的作用。方法将补骨脂素作用于A375细胞,采用MTT法检测细胞活性;Na OH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;RT-PCR法测定TYR、酪氨酸酶相关蛋白-1和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-1、TRP-2)以及ERK1、ERK2、JNK2这3个MAPK信号通路关键蛋白激酶的m RNA表达。结果补骨脂素在安全剂量下可显著抑制A375细胞黑素合成及TYR活性,1滋mol·L-1补骨脂素能明显下调A375细胞TYR、TRP-1、TRP-2以及ERK1、ERK2、JNK2 m RNA表达。结论推测补骨脂素通过抑制ERK1、ERK2、JNK2的表达来抑制TYR活性和/或下调TYR、TRP-1及TRP-2 m RNA表达,抑制A375细胞的黑素合成。 王帅 耿放 张明磊 陈晨 王兴焱 王加志 张宁关键词:补骨脂素 A375细胞 MAPK信号通路 黑素 补骨脂二氢黄酮甲醚对A375细胞黑素合成的影响 被引量:2 2015年 目的:研究补骨脂中植物雌激素成分补骨脂二氢黄酮甲醚对人黑素瘤细胞(A375细胞)黑素合成的影响。方法:将补骨脂二氢黄酮甲醚作用于A375细胞,采用MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法检测细胞增殖率、黑素合成量和酪氨酸酶(TYR)活性;用RT-PCR法测定控制黑素合成的关键酶TYR、TRP-1和TRP-2 mRNA表达。结果:100μmol/L、10μmol/L的补骨脂二氢黄酮甲醚显著抑制A375细胞增殖(P<0.05),对细胞有毒性作用;1μmol/L、10^(-1)μmol/L、10^(-2)μmol/L的补骨脂二氢黄酮甲醚对细胞增殖无明显影响(P>0.05),1μmol/L的补骨脂二氢黄酮甲醚对黑素合成有极显著的抑制作用(P<0.01)。1μmol/L补骨脂二氢黄酮甲醚对TYR活性有极显著的抑制作用(P<0.01)。浓度为1μmol/L的补骨脂二氢黄酮甲醚可抑制TRP-1/2和TYRmRNA的表达(P<0.05)。结论:补骨脂二氢黄酮甲醚能够抑制A375细胞黑素合成,推测其机制为抑制TYR的活性和基因表达。 刘国良 李建民 姚远 张宁 姜颖 张明磊 牛春颖 于英君关键词:黑素 黄褐斑 补骨脂二氢黄酮甲醚对A375细胞黑素合成及ER/MAPK信号通路的影响 被引量:11 2015年 目的初步阐明补骨脂二氢黄酮甲醚通过ER/MAPK信号通路干预人黑素瘤细胞(A375细胞)黑素合成的作用机制。方法将实验分为空白组、雌二醇组、补骨脂二氢黄酮甲醚组、雌激素受体(ER)阻断剂(ICI182780)+补骨脂二氢黄酮甲醚组、JNK抑制剂(SP600125)+补骨脂二氢黄酮甲醚组。MTT法测定细胞活性;RT-PCR法测定酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸相关蛋白1/2(TRP-1/2)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun N末端激酶(JNK)的m RNA表达;Western blot测定TYR和JNK的蛋白表达。结果与空白组比较,10-3μmol/L的雌二醇组对细胞活性无影响(P>0.05)。10、100μmol/L的补骨脂二氢黄酮甲醚组能显著抑制A375细胞增殖(P<0.01)。1μmol/L的补骨脂二氢黄酮甲醚组可抑制A375细胞黑素合成及TYR活性(P<0.01),并可抑制TRP-1/2、TYR、ERK1/2、JNK2m RNA的表达(P<0.01),抑制TYR和JNK2蛋白的表达(P<0.01)。ICI182780+骨脂二氢黄酮甲醚组和SP600125+补骨脂二氢黄酮甲醚组均能逆转补骨脂二氢黄酮甲醚组对黑素合成、TYR活性和TRP-1/2、TYR、ERK1/2、JNK2 m RNA表达和TYR、JNK2蛋白表达的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论补骨脂二氢黄酮甲醚能够抑制A375细胞黑素合成,其机制可能是通过植物雌激素与ER结合,启动第二信使激活ER-MAPK信号通路,降低ERK、JNK的表达,从而抑制TYR活性和酶的量,最终达到抑制黑素合成的目的。 刘国良 于英君 姚远 姜颖 张宁 张明磊 高海娜 李建民关键词:植物雌激素 黑素 MAPK信号通路 补骨脂异黄酮对人类皮肤成纤维细胞体外创伤模型愈合的影响 被引量:4 2016年 目的:评价补骨脂异黄酮对人成纤维细胞体外创伤模型的影响。方法:不同浓度(4.5、9、18、36μg/m L)补骨脂异黄酮处理人成纤维细胞。分别用MTT法、羟脯氨酸法、实时定量PCR法测定补骨脂异黄酮对细胞活力、胶原合成、环氧化-2和诱导型一氧化氮合成酶表达的影响。通过补骨脂异黄酮对过氧化氢诱导的细胞损伤保护作用和自由基清除能力的测定,确定补骨脂异黄酮抗细胞氧化的效果。结果:本研究的结果表明,补骨脂异黄酮预处理成纤维细胞具有显著保护由过氧化氢引起的细胞损伤(P<0.05)。36μg/m L补骨脂异黄酮处理细胞12 h后细胞总抗氧化能力显著增加(P<0.05)。此外,补骨脂异黄酮预处理人类成纤维细胞可显著抑制脂多糖(LPS)诱发的COX-2 mRNA的表达(P<0.01)。成纤维治疗组和对照组之间细胞增殖和胶原合成没有明显的差异(P>0.05)。结论:补骨脂异黄酮通过其抗氧化和抗炎作用可能是一种有效的皮肤创伤治疗剂。 刘国良 李建民 姚远 张宁 姜颖 张明磊 牛春颖 于英君关键词:抗氧化 胶原合成 环氧酶-2 两种植物雌激素成分对A375细胞黑素合成作用的机制研究 目的:研究两种补骨脂来源的植物雌激素成分补骨脂二氢黄酮甲醚、补骨脂异黄酮对人黑素瘤细胞(A375细胞)生物学特性的影响,及其对黑素细胞ER-MAPK信号通路的调节作用,阐明植物雌激素成分干预黑素合成的潜在作用机制,为合理... 张明磊关键词:中药治疗 植物激素 实验药理 染料木素对A375细胞黑素合成及相关细胞信号通路调控作用的初步探讨 被引量:2 2015年 目的:研究染料木素对A375细胞黑素合成的影响,并探讨MAPK信号通路与此作用的相关性。方法:以人黑素瘤细胞A375为研究对象,将不同浓度的染料木素作用于A375细胞48 h,另设空白组,采用MTT法检测细胞活性;Na OH裂解法检测黑素量;多巴氧化法检测酪氨酸酶(TYR)活性;RT-PCR法测定酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)以及MAPK信号通路关键胞外信号调节激酶1(ERK1),ERK2,c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)mRNA的表达。结果:与空白组比较,染料木素在安全剂量(10-1,10-2,10-3μmol·L-1)下均可明显抑制A375细胞黑素合成及TYR活性(P<0.01),1μmol·L-1染料木素明显下调A375细胞TYR,TRP-2,TRP-1(P<0.05,P<0.01)mRNA表达,以及ERK1,ERK2,JNK2(P<0.05,P<0.01)mRNA表达。结论:染料木素可通过抑制TYR活性和/或下调TYR,TRP-1及TRP-2 mRNA表达,抑制A375细胞的黑素合成,此作用与抑制ERK1,ERK2,JNK2的表达有关。 张明磊 徐艳明 王雪 耿放 刘国良 雷双媛 张宁关键词:染料木素 A375细胞 黄褐斑 MAPK信号通路