孙亚楠
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：华中科技大学环境科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 鱼腥藻细菌光敏色素的分子设计和光化学活性
- 2005年
- 采用PCR技术从鱼腥藻PCC7120中扩增出细菌光敏色素C端分别缺失234和275个氨基酸的突变基因aphA(C-234)、aphA(C-275),克隆于pBluescript SK(+),将前者插入表达载体pET30a进行表达,在后者的N端连接一段跨膜片段(ts),融合基因转入表达载体pGEMD中进行表达.获得的两种脱辅基蛋白在合适的条件下分别与藻蓝胆素(PCB)进行体外重组.光化学研究表明,两种脱辅基蛋白都能与PCB进行正确的重组,重组产物表现出650～700 nm可逆光致变色效应.锌电泳证实与脱辅基蛋白连接的辅基色素为PCB,酸性尿素变性实验证明可逆光致变色效应来源于PCB在不同波长光照下的顺反异构化.
- 李坚赵开弘董依然孙亚楠
- 关键词：细菌光敏色素基因克隆
- 带跨膜片段的α-PEC的分子构建被引量：1
- 2006年
- 通过分子设计构建一段来自人红细胞膜上的血型糖蛋白A(glycophorin A,GPA)中的跨膜片段基因,并连接到藻红蓝蛋白基因片段(pecA)的N端,将融合基因插入到表达载体pET30a进行表达。表达产物以包涵体形式存在,通过优化条件使其溶解,并与藻蓝胆素PCB在裂合异构酶PecE/PecF催化下进行体外重组,通过可逆光致变色活性大小确定包涵体溶解的最佳条件。结果表明,超声后的细胞加入终浓度8 mol/L尿素,0.2%Triton X-100和一定量的PecE和PecF,透析时采用含0.2%Triton X-100的尿素梯度透析可使重组活性最高。研究为可逆光致变色生物材料在生物光电材料中的应用打下了基础。
- 周明孙亚楠赵开弘
- 关键词：基因表达
- 鱼腥藻PCC7120藻红蓝蛋白操纵子A、E和F基因的克隆、表达和活性分析被引量：3
- 2004年
- 通过PCR技术从鱼腥藻PCC712 0总DNA中扩增藻红蓝蛋白A基因 (pecA)、E基因 (pecE)、F基因 (pecF) ,将pecA、pecE、pecF分别克隆于pBluescript,然后将pecA、pecE、pecF基因分别插入表达载体pET30a进行高效表达。pecA表达产物藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白PecA与藻蓝胆素PCB在pecE/pecF表达产物裂合异构酶PecE/PecF催化下进行体外重组 ,产物经提纯后 ,用紫外可见吸收光谱和荧光光谱检测 ,结果表明生成的色素藻胆蛋白具有藻红蓝蛋白α 亚基所特有的光谱性质和可逆光致变色性质。
- 孙亚楠武栋周明赵开弘
- 关键词：鱼腥藻PCC7120藻红蓝蛋白操纵子体外重组
