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CDH1基因甲基化水平与肺癌的相关性研究被引量：3: 2009年; 目的探讨CDH1(cadherin 1)基因甲基化水平与肺癌及其病理类型之间的相关性.方法应用半定量荧光MSP检测50例肺癌患者的癌、癌旁和远癌肺组织及5例非肺癌对照肺组织标本中的CDH1甲基化的相对比值,并用免疫组化方法对部分结果进行验证.结果肺癌组织、癌旁组织、远癌组织以及非肺癌对照肺组织CDH1甲基化相对比值的中位数分别为0.272、0.227、0.119和0.000.癌组织和癌旁组织(P<0.05)、癌组织和远癌组织(P<0.05)、远癌组织和非肺癌对照肺组织(P<0.05)的CDH1启动子甲基化水平的差异均有统计学意义(P<0.05);癌组织、癌旁组织和远癌组织中的鳞癌、腺癌及腺鳞癌CDH1基因甲基化相对比值之间的差异均无统计学意义(P>0.05).免疫组化结果与半定量荧光MSP检测结果符合.结论CDH1基因甲基化水平与肺癌具有相关性,与肺癌的组织类型无相关性.CDH1异常甲基化和E-cad表达的减弱和缺失可能是肺癌发生和发展过程中的重要因素.; 杨兰辉向莉苏艳丹詹淑芬王玉明段勇; 关键词：肺癌

实时荧光定量RT—PCR检测肺癌中PUMA mRNA的表达: 2009年; 目的建立检测肺癌PUMA mRNA的实时荧光定量RT—PCR方法，初步探讨PUMA mRNA表达水平与肺癌发生发展的关系。方法以GAPDH作为内参照基N，应用实时荧光定量RT—PCR，检测PUMA mRNA在肺癌组织中的表达水平。结果建立了应用实时荧光定量RT—PCR检测肺癌PUMA mRNA的方法。熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证实了PCR反应的特异性；相对定量结果显示，40例肺癌患者的肿瘤组织、对应的癌旁组织、远癌组织和10例肺良性病变组织中均有PUMA mRNA的表达，表达水平在肺癌与肺良性病变之间、肺癌各病理类型之间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论应用SYBR Green I实时荧光定量RT—PCR可以特异、准确、快速地分析不同肺组织中PUMA mRNA的表达差异。非小细胞肺癌的发生发展与PUMA mRNA的表达无明显相关性。; 陈韵如李娅马薇向莉王玉明; 关键词：PUMA 肺癌 SYBR I

铜绿假单胞菌外膜蛋白OprM原核表达及抗体制备被引量：2: 2011年; 目的制备铜绿假单胞菌(PA)主动外排系统外膜蛋白OprM及抗OprM多克隆抗体,为深入研究主动外排系统奠定基础。方法从PA基因组中克隆oprM基因,构建pET28 a-c-OprM表达载体,在大肠埃希菌中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并用免疫转印试验(W estern b lot)验证,建立重组OprM纯化方案,免疫动物制备多克隆抗体。结果扩增出带有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点及保护碱基的oprM基因序列,构建了pET28 a-c-OprM表达载体,诱导表达的重组OprM蛋白为带有H is标签的不可溶包涵体,建立并优化了重组OprM的纯化方法,免疫小鼠获得抗OprM蛋白的多克隆抗体。结论成功制备了OprM蛋白和抗OprM多克隆抗体,为深入研究该蛋白及相关的主动外排系统提供了有效手段。; 向莉郑亚婷刘华李娅王玉明段勇; 关键词：铜绿假单胞菌

铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM的研究进展被引量：11: 2009年; 医院感染在感染性疾病中占有相当比例。院内感染的病原菌中,铜绿假单胞菌的感染高居榜首,且耐药状况十分严重。主动外排系统是细菌存在耐药性并发生获得性多重耐药的主要原因。M exAB-OprM型外排系统因具有广谱的外排活性成为铜绿假单胞菌最具临床意义的药物外排系统。本文对细菌主动外排系统的分类,PA M exAB-OprM外排系统的组成、结构、重要作用及表达调控予以综述,并对其治疗研究作出展望。; 向莉段勇; 关键词：铜绿假单胞菌主动外排系统 MEXAB-OPRM

实时荧光半定量MSP检测肺癌组织CDH1甲基化水平实验条件的探讨: 2008年; 目的探讨实时荧光半定量MSP检测肺癌组织中CDH1DNA甲基化水平的最适实验条件。方法通过改变实时荧光半定量MSP反应条件,探讨MSP反应体系最适浓度和反应条件。结果检测CDH1DNA甲基化实时荧光半定量MSP反应体系为dATP,dCTP和dGTP200μmol/L,dUTP400μmol/L,MgCl23.0mmol/L,引物600nmol/L,热启动TaqDNA聚合酶0.04U/μl,模板3μl,DMSO2.5,1×SYBGREEN染料,1×反应缓冲液,总体系25μl。反应条件为95℃预变性12min,95℃15s、退火温度1min(其中62℃2个循环、60℃3个循环和58℃45个循环)、69℃10s,循环次数50。结论改进和建立了CDH1DNA甲基化水平的相对定量检测方法。; 杨兰辉向莉赵滢韩林王玉明段勇; 关键词：肺癌甲基化

铜绿假单胞菌外膜蛋白OprM原核表达及抗体制备: 目的制备铜绿假单胞菌(PA)主动外排系统外膜蛋白OprM及抗-OprM多克隆抗体,为深入研究主动外排系统奠定基础。方法从PA基因组中克隆oprM基因,构建pET28a-c-oprM表达载体,在E.coli中经IPTG诱导...; 段勇向莉王玉明; 文献传递

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向莉