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刘海霞
作品数:
3
被引量:11
H指数:2
供职机构:
遵义医学院附属医院
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发文基金:
贵州省教育厅自然科学研究项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
陈淼
遵义医学院附属医院
吴艳
遵义医学院附属医院
刘国跃
遵义医学院附属医院
王宇辉
遵义医学院
钱明江
遵义医学院附属医院
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血红素加氧酶-1对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Caspase-3及Cyt-C的影响
刘海霞
陈淼
傅小云
血红素加氧酶-1对大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡及水通道蛋白-1表达的影响
被引量:9
2013年
目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对过氧化氢(H2O2)诱导的氧化损伤大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡及水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响。方法取雄性sD大鼠肺组织,将分离、纯化的AECⅡ细胞原代培养24h后分为4组。正常组加入生理盐水;H2O2损伤组加入0.5mmol/LH2O2 处理;HO-1对照组加入1μmol/LHO-1处理;HO-1保护组同时加入1μmol/LHO-1及0.5mmol/LH2O2处理,将处理后的细胞继续培养2h。分别于处理前及处理后1、3、6、12h取细胞悬液,采用蛋白质免疫印迹试验(Westernblotting)检测AQP-1表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果H2O2损伤组AQP-1表达水平随时间延长逐渐下降,各时间点明显低于正常组;HO-1对照组和HO-1保护组AQP-1表达水平随时间延长呈上升趋势,各时间点高于其他各组,尤以HO-1保护组明显高于H2O2损伤组(1h:60.81±5.78比46.21±4.81,3h:63.05±9.61比39.32±4.96,6h:92.59±8.21比36.82±4.32,12h:86.16±14.84比34.88±2.66,均P〈0.05)。正常组和HO-1对照组细胞凋亡率无明显变化;H2O2损伤组细胞凋亡率随时间延长逐渐升高,各时间点均显著高于正常组;HO-1保护组细胞凋亡率于3h内逐渐升高,6h后下降并保持稳定,各时间点均显著低于H2O2 损伤组[1h:(9.04±2.17)%比(15.14±2.47)%,3h:(12.90±2.04)%比(22.37±4.84)%,6h:(10.42±1.68)%比(27.83±3.93)%,12h:(11.97±1.91)%比(33.63±6.61)%,均P〈0.05]。H2O2损伤组AQP-1与细胞凋亡率呈显著负相关(r=-0.723,P〈0.001),并存在回归关系[y=672.548(0.914)^x,R^2=0.597];HO-1保护组AQP-1与细胞凋亡率无显著相关性(r=0.210,P=0.193),但存在回归关系[y=e^(3.130-59.654/x),R^2=0.225]。结论HO-1可上调H2O2氧化损伤AECⅡ细胞的AQP-1表达水平并降低细胞�
王宇辉
陈淼
吴艳
钱明江
刘海霞
刘国跃
关键词:
血红素加氧酶-1
肺泡上皮细胞
水通道蛋白-1
凋亡
血红素加氧酶-1对过氧化氢损伤的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响
被引量:5
2014年
目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对过氧化氢(H202)刺激后原代培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡率、活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(easpase-3)及细胞色素C(Cyt-c)表达的影响。方法原代培养雄性sD大鼠AEC1I细胞,被随机分为4组:对照组(A组)加入生理盐水;H202损伤组(B组)加入0.5mmo]]LH,0:处理;HO一1预处理组(C组)给予0.2μmol/LHO-1预处理2h后加入0.5mmol/LH202;HO-1抑制组(D组)给予10μmol/L锌原卟啉Ⅸ(ZnppIX)预处理2h后加入0.5mmol/L H202,各组细胞处理后继续培养。于药物干预后2、6、12h采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测活化easpase-3、Cyt-c蛋白表达。结果各组细胞凋亡率均随H202作用时间延长而逐渐升高;B组干预后各时间点AEClI凋亡率均较A组显著增加;C组AEClI凋亡率则较B组明显降低[2h:(11.46±1.47)%比(20.83±1.55)%,6h:(12.30±1.37)%比(27.14±1.53)%,12h:(12.62±1.39)%比(35.66±0.74)%,均P〈0.05];D组2、6、12hAEC1I凋亡率[(24.33±1.36)%、(31.67±1.24)%、(36.93±2.40)%]与B组比较则差异无统计学意义。各组活化easpase-3、Cyt-C蛋白表达量均随H:0:作用时间延长而逐渐增加;B组各时间点活化easpase-3、Cyt-c蛋白表达量均较A组明显增加;c组活化easpase-3蛋白表达量(灰度值)较B组明显减少(2h:0.250±0.039比0.650±0.072,6h:0.470±0.080比0.960±0.118,12h:0.680±0.099比1.830±0.220,均P〈O.05);Cyt-c蛋白表达量(灰度值)也较B组明显减少(2h:0.250±0.074比0.390±0.069,6h:0.340±0.043比0.670±0.120,12h:0.470±0.072比1.360±0.112,均P〈O.05);D组活化caspase-3蛋白表达量(0.720±0.052、1.060±0.109、1.880±0.159)、Cyt-C蛋�
刘海霞
陈淼
杨秀娟
戢慧
陈涛
陈华军
关键词:
血红素加氧酶-1
凋亡
肺泡上皮细胞
过氧化氢
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