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凌雁
作品数:
5
被引量:31
H指数:3
供职机构:
北京医科大学
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发文基金:
国家自然科学基金
中国博士后科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
王晓民
河南医科大学
徐国恒
河南医科大学
万有
河南医科大学
韩济生
河南医科大学
万有
河南医科大学
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北京医科大学
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年份
1篇
1999
3篇
1998
1篇
1997
共
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人TH基因重组腺病毒的构建及生物学活性研究
被引量:7
1998年
将人酪氨酸羟化酶cDNA表达盒克隆于质粒型腺病毒载体p△Elsp1A,得到重组质粒pAd-TH。随后用脂质体法将重组质粒pAd-TH和拯救型腺病毒质粒pBHG11一起共转染293细胞,通过体内同源重组生成重组腺病毒AdCMVth,THcDNA重组进入腺病毒E1区并受CMV启动子控制。采用形态学、病毒核酸酶切和PCR/RT-PCR等方法进行鉴定正确。重组腺病毒滴度达到1010pfu/ml。初步结果表明,该重组腺病毒感染MN9D细胞后可使细胞内多巴胺水平增加1倍,显示出明显的TH生物学活性。提示TH重组腺病毒AdCMVth可作为高效的基因转移载体用于帕金森氏病基因治疗。
徐国恒
凌雁
万有
王晓民
韩济生
关键词:
酪氨酸羟化酶
重组腺病毒
基因治疗
帕金森氏病
重组腺病毒介导GDNF基因在多种细胞的高效转移和表达
被引量:1
1998年
用作者等所构建的重组腺病毒AdCMVgdnf直接感染多种细胞系和大鼠中脑原代神经元细胞,多重感染复数为20PFU/ml。采用免疫组织化学染色方法检测GDNF表达,观察所构建的GDNF重组腺病毒在各种细胞中介导GDNF基因转移和基因表达的能力。结果表明在一系列神经细胞或非神经细胞中,GDNF重组腺病毒均可介导GDNF基因的高效转移和表达。提示GDNF重组腺病毒可作为帕金森氏病基因治疗的高效基因转移载体。
徐国恒
凌雁
万有
王晓民
韩济生
关键词:
GDNF
重组腺病毒
基因转移
帕金森氏病
mRNA差别显示技术及其在生命科学中的应用
被引量:2
1997年
mRNA表达水平的变化决定细胞的功能状态。个体发育、细胞增殖分化与凋谢、生理刺激和药物治疗等过程,都会出现mRNA表达水平的变化。阐明这种变化有助于揭示细胞生理过程的分子机制。新近发展起来的mRNA差别显示技术为此提供了强有力的工具。该技术无需更多的背景资料,可快速有效地分离表达水平出现差别的基因。
徐国恒
凌雁
万有
万有
关键词:
MRNA差别显示
生命科学
GDNF重组腺病毒增加MN9D细胞多巴胺合成与释放
被引量:5
1999年
有表达GDNF的重组腺病毒直接感染中脑多巴胺能神经元来源的MN9D细胞并经神经毒素MPP+处理.感染36h分别收获细胞及其培养基,用反相高效液相色谱方法测定多巴胺含量.结果显示,经GDNF重组腺病毒感染的MN9D细胞内及其培养基中的多巴胺水平分别增加50.7%和53.5%.给予神经毒素MPP+损伤后,细胞内多巴胺含量降低53.5%,但同时给予GDNF腺病毒则可抑制这种降低,并使多巴胺水平增加141.3%.以上结果提示GDNF腺病毒可提高细胞内的多巴胺水平并促进其释放,同时还具有对抗神经毒素MPP+损伤作用,表明GDNF重组腺病毒用于帕金森氏病基因治疗具有良好的前景.
凌雁
徐国恒
万有
万有
王晓民
关键词:
重组腺病毒
多巴胺
帕金森氏病
基因治疗
银染mRNA差异显示方法的建立和吗啡诱导基因的克隆
被引量:17
1998年
目的:建立非同位素银染mRNA差异显示方法,分离吗啡相关基因。方法:以吗啡处理的SHSY5Y细胞中提取的总RNA为模板,用5’dT12MG锚定引物和两条随机引物组合进行DDRTPCR扩增。经测序凝胶电泳分离后,用银染方法显示差异DNA条带,在直视下从凝胶中回收差异条带并进行再扩增,扩增产物克隆入pGEMT载体。结果:建立了非同位素的银染mRNA差异显示方法,分离和克隆了一些吗啡诱导的差异表达基因。
徐国恒
凌雁
梁德勇
崔巍
王晓民
万有
韩济生
关键词:
银染色法
基因扩增
MRNA
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