冯胜军
- 作品数:30 被引量:91H指数:5
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- 空肠弯曲菌外膜蛋白抗血清的制备及其对肠道病原菌鉴别的初步应用
- 2010年
- 目的:探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)28KD-31KD外膜蛋白兔抗血清的制备及其对常见肠道病原菌的检测的菌属特异性。方法:采用CJ活菌静脉注射、CJ28KD-31KD蛋白多次、多点皮下注射分别免疫新西兰种大白兔制备抗血清,Western—blotting法鉴定抗血清的抗原性。纯培养的痢疾志贺氏茸、甲型副伤寒沙门氏菌、肖氏沙门菌,希氏沙门菌、肠产毒性大肠埃希菌、变形杆菌、空肠弯曲茸(CF-1)(茼浓度1X109CFU/m1)等常见的肠道病原菌,分别与不同稀释倍数的CJ活菌抗血清和CJ28KD-31KD外膜蛋白抗血清进行常规的直接凝集反应(试管法),观察抗血清对各种已知肠遣病原菌的属的特异性。结果:制备了cJ28KD-31KD外膜蛋白的兔抗血清,CJ活菌抗血清能够与全部CJ甘氨酸提取物发生免疫反应,CJ28KD--31KD外膜蛋白抗血清仅与28KD-31KD外膜蛋白发生反应。CJ活菌抗血清能够与常见肠道病原体发生凝集反应,而CJ28KD-31KD蛋白抗血清仅与空肠弯曲菌(CF—1)发生凝集反应。结论:CJ28KD-31KD外膜蛋白兔抗血清被成功制备,该类蛋白或其中的某些重要组分可能是一种重要的CJ区别其他肠道病原菌的重要目标成分。该类蛋白成分的抗血清的成功制备,将为CJ的诊断血清建立,以及CJ亚单位、基因工程疫苗的研制提供初步的实验依据。
- 冯胜军肖政孙万邦姚新生李国明刘仿陈群
- 关键词:空肠弯曲菌外膜蛋白抗血清
- 一种用改装消毒器培养空肠弯曲菌的实用方法
- 2005年
- 空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni,CJ)系螺旋科弯曲菌属胎儿亚种,为一类微需氧嗜热Gram阴性杆菌.是世界范围内最常见的胃肠道致病菌之一.在亚洲、欧洲、非洲、澳洲及南美洲急性或亚急性腹泻病例中分离率高达11%以上[1].因此,该类细菌的快速有效培养具有应用意义.目前常用换气法、烛缸法、减压产气法及微氧袋法.但是上述方法均需要较为特殊的仪器,或气体条件不好控制,往往导致培养失败或生长不好.本文报告了一种简便而有效的CJ的培养方法.
- 冯胜军孙万邦肖政张忆雄
- 关键词:空肠弯曲菌亚急性致病菌空肠弯曲杆菌阴性杆菌
- 不同病理类型肾病综合征患者尿蛋白对人肾小管上皮细胞凋亡的影响被引量:21
- 2014年
- 目的探讨不同病理类型肾病综合征患者尿蛋白对人肾小管上皮细胞(hrTESc)凋亡的影响。方法提取人类微小病变肾病综合征、膜性肾病综合征、局灶-节段性肾病综合征患者尿蛋白,进行蛋白成分分析、细菌内毒素试验、蛋白溶液的肌酐水平等质量鉴定后,试验组分别按1、2、4、8 g/L尿蛋白浓度刺激hrTECs 48 h,空白组无尿蛋白,Hoechst33258染色法观察hrTECs凋亡情况。结果尿蛋白组分构成:微小病变肾病综合征清蛋白83.8%、转铁蛋白11.9%、IgG 3.4%;膜性肾病综合征清蛋白56.4%、转铁蛋白34.6%、IgG 6.9%;局灶-节段性肾病综合征清蛋白59.9%、转铁蛋白15.3%、IgG 13.8%。尿蛋白浓度1、2、4、8 g/L时,膜性肾病综合征组较微小病变肾病综合征组细胞凋亡率均升高(P<0.05);局灶-节段性肾病综合征组较膜性肾病综合征组和微小病变肾病综合征组细胞凋亡率均升高(P<0.05)。3组尿蛋白浓度1、2、4、8 g/L时较空白时,2、4、8 g/L时较1 g/L时,4、8 g/L时较2g/L时,8 g/L时较4 g/L时细胞凋亡率均升高(P<0.05)。结论 hrTECs的异常凋亡与尿蛋白具有浓度依赖关系,同时可能与尿蛋白中IgG成分密切相关,而尿清蛋白可能不是最重要的致病因子。
- 吴丽丹冯胜军卓华钦张莞灵刘华锋
- 关键词:蛋白尿细胞凋亡上皮细胞
- 空肠弯曲菌在两种培养基上外膜蛋白中的表达及其体液免疫应答比较
- 2009年
- 目的探讨不同培养基来源的空肠弯曲菌28~31kD外膜蛋白免疫小鼠后的体液免疫应答效果。方法将66只BALB/c小鼠分别随机分为11组,每组6只,采用布氏血培养基、改良卵黄培养基培养来源的空肠弯曲菌甘氨酸提取28~31kD外膜蛋白以不同剂量疫苗组(50、100、200μg/只,加入0.2mL福氏完全佐剂),分别在0、7、14、21和28d,通过背部皮下+腹部皮下多点注射免疫小鼠;空白组、对照组分别采用0.4mLNS、0.4mL福氏完全佐剂。在末次免疫后10d(即第38天),分别应用双向免疫琼脂扩散试验法、试管凝集法检测血清特异性抗体效价,采用ELISA技术分别检测小鼠血清和肠液中的特异性抗体IgG、IgA、分泌型IgA(sIgA)的水平。结果末次免疫后10d后,两种培养基来源的各免疫组中,双向免疫琼脂扩散试验法、试管凝集法检测血清特异性抗体效价分别达到1∶4~1∶16和1∶320~1∶1280,间接ELISA法检测两种培养基来源血清、肠液中IgG、IgA、sIgA的水平与空白组、对照组差异均有显著性(P<0.05);两种培养基来源的同剂量组的疫苗之间IgG、IgA、sIgA的水平差异没有显著性(P>0.05);空白组与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论改良卵黄培养基来源的空肠弯曲菌甘氨酸提取物28~31kD外膜蛋白能够诱导BALB/c小鼠较好的体液免疫应答和高水平的肠液sIgA抗体,与改良布氏血培养基相同,该培养基的选择和使用将为CJ亚单位疫苗、CJ检验、CJ食品卫生检疫的深入研究奠定重要的实验依据。
- 冯胜军吴丽丹孙万邦肖政米娜刘仿陈群陈军剑
- 关键词:空肠弯曲菌培养基外膜蛋白抗体体液免疫
- 医学免疫学理论教学方法探讨被引量:15
- 2014年
- 医学免疫学是生命科学中的前沿学科,是医学专业一门重要的基础医学必修课程,进展更新快,内容抽象、逻辑性强,使初学者普遍感到难以接受。文章以体液免疫应答为例,采用滚动联系、多媒体教学结合传统板书方式、比喻、联系临床、培养创新思维、总结归纳等教学方法,激发学生学习的兴趣,调动学生学习的积极性,有效提高医学免疫学理论教学质量。
- 赵汉宁吴瑗米娜刘仿冯胜军赵毅
- 关键词:医学免疫学体液免疫教学方法
- 空肠弯曲杆菌亚单位抗原研究概况及进展被引量:1
- 2003年
- 空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni,Cj)系螺旋科弯曲菌属胎儿亚种,为一类微需氧嗜热Gram阴性病原菌.该菌菌体纤细,无芽孢,有鞭毛,运动活泼,在光镜下呈螺旋状运动,具有多形性,可呈弧形、螺旋形、短杆形或逗点形等多形态.
- 冯胜军
- 关键词:空肠弯曲杆菌抗原亚单位疫苗
- 膜性肾病患者蛋白尿对肾小管上皮细胞转分化的影响被引量:1
- 2013年
- 目的探讨膜性肾病患者蛋白尿对肾小管上皮细胞转分化的影响。方法提取膜性肾病患者尿蛋白进行蛋白成分分析、细菌内毒素试验、蛋白溶液的肌酐水平等质量鉴定后,尿蛋白组分别按1.0、2.0、4.0、8.0 mg/mL蛋白质量浓度刺激人肾小管上皮细胞(hRTEC)48 h;空白对照组无尿蛋白,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测hRTEC胞浆内平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)的表达,观察hRTEC转分化情况。结果膜性肾病患者尿蛋白组分构成:清蛋白为56.4%、转铁蛋白为34.6%、免疫球蛋白G(IgG)为6.9%。膜性肾病患者尿蛋白诱导hRTEC胞浆中α-SMA水平随蛋白质量浓度的增加而增加(P<0.05)。结论膜性肾病患者的蛋白尿是导致肾间质纤维化的原因之一,并具有质量浓度依赖关系。
- 吴丽丹刘华锋卓华钦张莞灵冯胜军
- 关键词:蛋白尿肾小管细胞学肾小管上皮细胞
- 空肠弯曲菌外膜蛋白亚单位脂质体佐剂疫苗的免疫原性研究被引量:5
- 2006年
- 目的初步探讨自制的空肠弯曲菌(campylobacterjejuni,CJ)亚单位(Mr28000~31000外膜蛋白)脂质体佐剂疫苗的免疫原性,为该疫苗的临床前研究打下基础。方法用双向免疫琼脂扩散试验、试管凝集试验、ELISA(间接法)分别检测经CJ疫苗免疫后的新西兰兔血清IgG抗体效价。结果CJ阴离子组与CJ阳离子组比较,血清IgGA值显著增高(P<0.01),与CJ弗氏组无统计学差别(P>0.1);CJ阴、阳离子组脂质体疫苗接种剂量在0.50mgkg时,血清IgGA值最大;CJ阳离子皮下注射组与肌肉注射组IgGA值无统计学差别(P>0.1);特异性IgG抗体经6个月动态观察,5个月后抗体效价下降。结论实验组全程免疫后均有特异性抗体产生;同一剂量的阴离子脂质体疫苗比阳离子脂质体疫苗血清抗体水平显著增高;脂质体疫苗最佳接种剂量为0.50mgkg,肌肉注射与皮下注射免疫效果无显著差异;特异性抗体高水平维持5、6个月后应加强免疫。
- 李成文孙万邦余妍冯胜军李官成
- 关键词:亚单位疫苗免疫原性
- 空肠弯曲菌28KD^31KD外膜蛋白的初步提取及鉴定被引量:16
- 2005年
- 目的:探讨空肠弯曲菌28KD^31KD外膜蛋白的提取方法及其鉴定。方法:采用改良布氏肉汤培养基培养空ν淝?Campylobacterjejuni,CJ),用0 2mol/L、pH2 2甘氨酸-HCl缓冲液提取CJ外膜蛋白,SephadexG-75分子筛层析法纯化28KD^31KD分子,SDS-PAGE分子量鉴定,Westernblotting印迹法鉴定CJ甘氨酸提取物中外膜蛋白及纯化的28KD^31KD分子抗原性。结果:以甘氨酸提取CJ的外膜蛋白,SephadexG-75层析纯化能够提取出CJ28KD^31KD外膜蛋白,该蛋白分子能够与CJ兔抗血清发生特异性反应。结论:采用甘氨酸提取、SephadexG-75纯化CJ28KD^31KD外膜蛋白系一种稳定可靠的分离层析方法,提取的CJ28KD^31KD外膜蛋白具有良好的抗原性,为特异性的CJ28KD^31KD外膜蛋白的多克隆抗体制备、CJ感染的血清学特异性诊断、CJ亚单位疫苗的研制打下基础。
- 冯胜军孙万邦姚新生肖政
- 关键词:KD外膜蛋白CJ空肠弯曲菌分离层肉汤
- 晚期糖基化终产物对不同血液透析龄患者单核细胞分泌功能的影响被引量:5
- 2007年
- 目的:观察晚期糖基化终产物对不同血液透析龄患者单核细胞分泌炎症细胞因子的影响,探讨晚期糖基化终产物对慢性肾功能衰竭和透析患者微炎症的作用机制。方法:①选择广东医学院附属医院肾内科2004-12/2006-02收治的慢性肾功能衰竭患者63例,其中保守治疗组16例,血液透析组47例,血液透析组按透析时间长短分为短期、中期及长期透析3组,以15例健康体检者为正常对照。②收集清晨空腹或透析前肝素抗凝全血5.0~6.0mL,分离外周血单个核细胞后分3组继续培养24h:AGE-BSA组给予糖基化的牛血清白蛋白(25mg/L)刺激,牛血清白蛋白组给予牛血清白蛋白(25mg/L),空白对照组不给刺激。③培养24h后收取培养上清液采用ELISA法测定白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α的质量浓度。结果:①外周血单个核细胞白细胞介素1β分泌量:自发状态(空白对照)的正常对照组及保守治疗组分别为(10.08±0.77),(14.32±0.54)ng/L,短期、中期及长期透析组高于保守治疗组[(78.55±7.89),(56.16±1.66),(37.03±1.78)ng/L,P<0.05],且分泌量随血液透析时间的增加而减少(P<0.05);给予牛血清白蛋白刺激后,各组的白细胞介素1β分泌量与空白对照比变化不大(P>0.05);给予糖基化的牛血清白蛋白刺激后,各组的白细胞介素1β分泌量均显著高于空白对照(P<0.01),短期、中期及长期透析组低于保守治疗组[(132.09±23.66),(94.09±13.07),(68.14±10.56),(160.34±17.06)ng/L],且随血液透析时间的增加分泌量减少(P<0.05)。②外周血单个核细胞肿瘤坏死因子α分泌量:自发状态(空白对照)的正常对照组及保守治疗组分别为(8.57±0.32),(10.89±0.68)ng/L,短期、中期及长期透析组高于保守治疗组[(43.12±8.01),(30.78±5.34),(19.06±3.91)ng/L,P<0.05],且分泌量随血液透析时间的增加而减少(P<0.05);给予牛血清白蛋白刺激后,各组的肿瘤坏死因子α分泌量与空白对照比变化不大(P>0.05);给�
- 吴瑗陈婷冯胜军刘仿
- 关键词:微炎症晚期糖基化终产物慢性肾衰竭血液透析