代剑华 作品数:31 被引量:94 H指数:5 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市科技攻关计划 公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 电子电信 理学 更多>>
TRADD基因过表达慢病毒在抑制皮肤疤痕形成中的应用 本发明公开了TRADD基因过表达慢病毒在抑制皮肤疤痕形成或治疗皮肤疤痕中的应用,并具体公开了TRADD基因过表达慢病毒的制备方法。本发明的TRADD基因过表达慢病毒能同时改善皮肤疤痕的平整度和色泽均匀度。 彭贵勇 袁月 康秀峰 刘云杰 代剑华胃粘膜正常、肠化和腺癌组织基因组DNA的拉曼光谱分析 目的用拉曼光谱技术来系统研究胃癌不同发生过程中的组织DNA空间结构变化。方法首先提取涉及胃癌发病过程中的胃粘膜正常上皮组织、肠化组织和腺癌组织的基因组DNA,分别对其进行拉曼光谱检测,根据拉曼谱图特征,详细分析了基因组D... 代剑华 彭贵勇 冉曾令关键词:胃粘膜 癌组织 拉曼光谱分析 基因组 文献传递 结直肠癌组织中核干因子和增殖细胞核抗原的表达与血清叶酸水平的关系 被引量:3 2011年 目的探讨核干因子(nucleostemin,NS)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在结直肠癌组织中的表达与血清叶酸水平的关系。方法 2009年3-12月在肠镜下收集50例结直肠癌患者的组织,根据国际结直肠癌的病理分类标准分为高分化组(12例)、中分化组(17例)、低分化组(21例)和正常肠黏膜组(50例),同时取受检者静脉血5 ml;采用免疫组织化学法检测NS和PCNA结直肠癌组织和正常肠黏膜的表达,采用磁性颗粒化学发光免疫法检测血清叶酸水平。结果 NS和PCNA在结直肠癌阳性表达率分别是70.0%(35/50)和72.0%(36/50),两者在正常肠黏膜中未见表达。NS和PCNA在高分化结直肠癌阳性率为41.7%(5/12)和33.3%(4/12),分别显著低于中分化结直肠癌阳性率[76.5%(13/17)和82.4%(14/17)]与低分化结直肠癌阳性率[81.0%(17/21)和85.7%(18/21),P<0.05]。患者血清叶酸水平在结直肠癌NS和PCNA阳性组与阴性组无显著差别(P>0.05)。结论 NS和PCNA在结直肠癌组织中有表达,且与结直肠癌的恶性程度密切相关,但血清叶酸水平与NS和PCNA在结直肠癌组织中的表达无关。 赵海霞 牟东 薛世祥 代剑华 袁月 彭贵勇 房殿春关键词:核干因子 增殖细胞核抗原 血清叶酸 结直肠癌 504例胃息肉发生相关因素的调查研究 被引量:8 2017年 目的探讨胃息肉发生的相关因素,为更有针对性胃息肉的预防提供科学依据。方法收集2016年10月至2017年3月就诊于西南医院各科室的504例行胃镜检查并经病理学证实为胃息肉的患者,以同期健康体检和各科室就诊的504例行胃镜检查未发现胃息肉者作为对照,使用统一设计的调查问卷进行相关因素调查。对调查各因素进行单因素分析,将筛选出有统计学意义的因素纳入多因素Logistic回归分析。结果单因素分析结果显示,质子泵抑制剂使用情况、H.pylori感染史、胃息肉家族史、吸烟、饮酒、喝茶、体育锻炼、进食速度、进食水果、心情状况、精神创伤史及工作生活压力可能与胃息肉发生相关。多因素Logistic回归分析结果显示,使用质子泵抑制剂、H.pylori感染史、胃息肉家族史、长期饮酒、进食速度较快、精神创伤史是胃息肉发生的危险因素,体育锻炼(≥1次/周)、进食水果(≥2次/周)为其保护因素。结论胃息肉的发生与多种因素相关,避免长时间使用质子泵抑制剂及长期饮酒、根除H.pylori感染、适当的体育锻炼与进食水果、保持乐观的心态和养成良好的饮食习惯可能会有效降低胃息肉的发生风险。 何金龙 陈磊 代剑华 张昊翔 冯吉 魏周玲 房殿春关键词:胃息肉 病例对照 LOGISTIC回归分析 窄带成像放大内镜在早期食管癌诊疗中的应用价值 被引量:2 2017年 目的探讨窄带成像放大内镜(NBI-ME)在早期食管癌(食管早癌)或癌前病变定性诊断、定深度诊断和制定治疗策略方面的价值。方法分析总结我院2013年7月至2017年2月收治的111例高度怀疑食管早癌或癌前病变且行内镜下黏膜剥离术(ESD)的病例,以术后组织病理结果为金标准,评价NBI-ME对食管早癌或癌前病变定性诊断、定深度诊断与术后病理结果的一致性及NBI-ME制定治疗策略的价值。结果在定性诊断方面,111例病例中NBI-ME诊断为低级别上皮内瘤变(LGIN)者0例(其中术后组织病理结果为低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变、早癌分别为0例、0例、0例),诊断为高级别上皮内瘤变(HGIN)者33例(其中术后组织病理结果 LGIN、HGIN、早癌分别为3例、30例、0例),诊断为早癌者78例(其中术后组织病理结果 LGIN、HGIN、早癌分别为5例、22例、51例),NBI-ME与术后组织病理结果一致性分析:Κ=0.498,可认为NBI-ME与术后组织病理结果一致性一般。在定深度诊断方面,111例病例中诊断为LGIN者0例(其中术后组织病理结果 LGIN、HGIN、黏膜内癌、黏膜下层癌分别为0例、0例、0例、0例),诊断为HGIN者33例(其中术后组织病理结果 LGIN、HGIN、黏膜内癌、黏膜下层癌分别为3例、30例、0例、0例),诊断为黏膜内癌者67例(其中术后组织病理结果 LGIN、HGIN、黏膜内癌、黏膜下层癌分别为5例、22例、30例、10例),诊断为黏膜下层癌者11例(其中术后组织病理结果 LGIN、HGIN、黏膜内癌、黏膜下层癌分别为0例、0例、0例、11例),NBI-ME与术后组织病理结果一致性分析:Κ=0.469,可认为NBI-ME与术后组织病理结果一致性一般。在制定治疗策略方面,111例病例中除8例病理诊断为低级别上皮内瘤变者可选择随访外,其余病例均应行内镜下治疗。结论 NBI-ME食管早癌或癌前病变定性诊断和定深度诊断上具有一定的临床价值,对食管早癌或癌 李敏 陈瑶 吴宏博 代剑华 彭贵勇关键词:窄带成像放大内镜 早期食管癌 癌前病变 中国10天或14天铋剂四联疗法根除幽门螺杆菌疗效的Meta分析 胡佳丽 何金龙 冯吉 代剑华 魏周玲莫沙必利对模拟急性高原暴露大鼠小肠动力的改善作用 被引量:1 2012年 目的观察莫沙必利对高原缺氧大鼠小肠动力及黏膜屏障的保护作用,初步探讨其对肠道急性缺氧损害的预防作用。方法将90只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组、高原缺氧组、高原莫沙必利组;低压氧舱模拟海拔6 000 m,氧分压(9.31±0.05)kPa,氧含量(19.6±0.2)%,建立大鼠急性缺氧模型,高原莫沙必利组采用莫沙必利灌胃,3次/d,每天剂量0.27 mg/kg。分别于10、24、48、72、168 h取小肠组织。检测急性高原缺氧应激后小肠组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的含量变化;墨汁灌胃实验计算推进距离,检测小肠动力;RT-PCR检测小肠黏膜闭锁连接蛋白1(ZO-1)mRNA的表达情况。结果与同时间段正常对照组比,高原缺氧组NO、NOS含量增高,24、48、72、168 h NO含量差异明显(P<0.05,P<0.01),48、72、168 h NOS含量差异明显(P<0.05,P<0.01);ZO-1 mRNA表达量降低,48、72、168 h差异明显(P<0.05,P<0.01);高原莫沙必利组NO、NOS含量较正常对照组增高,仅48 h NO含量增高明显(P<0.05);高原缺氧组与高原莫沙必利组(168 h除外)各时间点小肠推进距离均较正常对照组明显降低(P<0.05,P<0.01)。各时间点高原莫沙必利组NO、NOS含量较高原缺氧组降低,72 h NO,72、168 h NOS含量差异明显(P<0.05);各时间点高原莫沙必利组小肠推进距离及ZO-1 mRNA的表达量较高原缺氧组增高,48、72、168 h的小肠推进距离及72、168 hZO-1 mRNA的表达量差异明显(P<0.05)。结论莫沙必利可有效促进小肠动力,减轻高原缺氧应激引起的小肠动力障碍及肠道黏膜屏障的损伤,可用于高原缺氧肠道损害的预防。 薛世祥 彭贵勇 杨红勤 牟东 代剑华 袁月 康秀峰关键词:莫沙必利 缺氧 小肠动力 ZO-1 MRNA TRADD慢病毒载体构建及其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响 被引量:1 2012年 目的构建抗食管支架术后再狭窄携人TRADD基因慢病毒表达载体,并检测其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法以购买的人TRADD基因为模板,采用PCR法扩增目的基因片段,PCR产物经回收纯化后与线性化的慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro重组。重组质粒转化DH5α感受态细胞。菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆测序无误后,质粒共转染293FT细胞制备慢病毒。Real-time定量PCR法检测病毒滴度。Western blot检测TRADD-GFP-FLAG融合蛋白的表达。MTT法检测TRADD基因慢病毒对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。结果菌落PCR扩增产物经凝胶电泳,阳性克隆得到1 200 bp片段,基因测序显示重组质粒中TRADD序列与GenBank中序列一致。包装产生的慢病毒转染293 FT细胞48 h后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,病毒滴度为3.22×108IU/ml,Western blot检测到融合蛋白TRADD-GFP-FLAG在293FT细胞中获得有效表达,MTT法证实该融合蛋白具有生物活性,能有效抑制瘢痕成纤维细胞增殖。结论成功构建并包装了pLVX-TRADD-EGFP-3FLAG-Puro慢病毒表达载体,其可明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。 袁月 康秀峰 牟东 薛世祥 代剑华 彭贵勇关键词:TRADD 慢病毒表达载体 基因治疗 正常和癌变胃粘膜组织的共焦拉曼光谱初探 被引量:5 2014年 目的:分析研究胃正常和癌变粘膜组织的拉曼光谱特征,为拉曼光谱应用于胃癌的临床检测诊断奠定基础。方法:收集胃镜检查中活检的19例正常和12例癌变胃粘膜组织标本,采用785 nm激发光拉曼光谱仪进行拉曼光谱采集。比较分析胃正常和癌变粘膜组织的拉曼光谱特征差异并研究其区分正常和癌变组织的价值。结果:1)特征峰1 098 cm-1、1 444 cm-1、1 555 cm-1、1 660 cm-1等在胃癌组织中发生了移位,平均位移(2.57±1.28)cm-1,以红移为主;2)癌变组织中相对峰强比I1087 cm-1/I1207 cm-1≥1.87,其区别胃癌和正常胃粘膜组织的准确率、灵敏度和特异度分别为87.1%、83.3%、89.5%;3)癌组织中增加了表征蛋白质的特征峰1 262 cm-1、1 586 cm-1,但同时减少了表征蛋白质和脂质特征峰1 172 cm-1。结论:拉曼光谱不仅可以准确区分正常和癌变,而且可以探索癌变相关的分子生化改变。拉曼光谱在胃癌的跟踪发现和检测诊断中具有良好前景。 陈瑶 代剑华 张华 周学谦 刘云杰 彭贵勇关键词:胃粘膜 胃癌 拉曼光谱 胃肠道间质瘤63例临床分析 2006年 胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是最常见的胃肠道非上皮性肿瘤,以往长期被诊断为平滑肌源性或神经源性的肿瘤。近年来随着免疫组织化学及电镜技术的发展,对GIST的诊断已有了统一的标准。现将西南医院1999年1月至2006年6月经病理证实的GIST63例报告如下。以进一步提高对该病的认识。 何军 彭贵勇 代剑华 李向红 赵金龙关键词:胃肠道间质瘤 病理学