黄金向
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 使用hTERT启动子联合RNAi靶向逆转乳腺癌的耐药性被引量：2
- 2010年
- 目的:克隆人端粒酶逆转录酶启动子(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT),探讨对乳腺癌细胞的特异性[1],利用RNAi技术靶向沉默耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR乳腺癌耐药蛋白(Breast cancer resistance protein,BCRP)基因[2]的表达,观察BCRP的mRNA变化,BCRP蛋白的表达以及对阿霉素耐药性的变化[3]。方法:构建重组质粒(pGenesil-CMV-shRNA、pGenesil-hTERT-shRNA),分别转染端粒酶阴性及阳性细胞,检测hTERT启动子的靶向性,应用RT-PCR及Western-blot技术检测不同组的细胞的RNA、蛋白差异,MTT法分析药敏性变化[4]。结果:端粒酶阳性的细胞可见很强的荧光,明显强于端粒酶阴性的细胞[5];细胞实验RT-PCR及Western blot检测结果显示:BCRP的mRNA和蛋白的表达受抑制与对照组其差异有显著性(P<0.05);MTT比色法结果显示:对阿霉素的药物敏感性明显提高。结论:使用hTERT启动子联合RNAi成功靶向沉默BCRP基因,乳腺癌MCF-7/ADR对阿霉素的敏感性明显增加,为进一步开发肿瘤的特异性基因沉默治疗奠定实验基础。
- 黄金向王继见莫琳君
- 关键词：重组质粒RNAI乳腺癌MCF-7/ADR
- shRNA/hTERT表达载体靶向逆转乳腺癌的耐药性被引量：1
- 2011年
- 目的克隆人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子,探讨对乳腺癌细胞的特异性,构建shRNA/hTERT表达载体,探讨在动物实验中耐药性的变化。方法构建重组质粒(pGenesil-CMV-shRNA、pGenesil-hTERT-shRNA),用MCF-7/ADR乳腺癌细胞接种于50只裸鼠前肢腋下,并将45只接种成功的动物模型按随机数字表法分为3组:对照组、重组质粒pGenesil-CMV-shRNA组、重组质粒pGenesil-hTERT-shRNA组,应用RT-PCR技术检测裸鼠组织的乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)基因的mRNA及Western blot检测裸鼠组织BCRP基因的蛋白表达、测量裸鼠瘤体体积的变化。结果成功构建人乳腺癌裸鼠模型;动物实验RT-PCR及Western blot检测结果显示:pGenesil-CMV-shRNA、pGenesil-hTERT-shRNA组BCRP的mRNA和蛋白的表达均受抑制,与对照组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05);裸鼠瘤体体积明显缩小,与对照组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05);重组质粒pGene-sil-hTERT-shRNA组抑瘤率为68.5%。结论 shRNA/hTERT表达载体成功靶向沉默BCRP基因,动物实验证实对阿霉素的敏感性明显增加。
- 黄金向王继见
- 关键词：重组质粒SHRNAMCF-7/ADR裸鼠模型
- 使用hTERT启动子联合RNAi靶向逆转乳腺癌MCF-7/ADR的耐药性
- 目的：
克隆人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子,探讨对乳腺癌细胞的特异性,利用ShRNA/hTERT表达载体靶向沉默耐药乳腺癌细胞(MCF-7/ADR)及其裸鼠模型组织的乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因,观察它的m...
- 黄金向
- 关键词：HTERT启动子RNAI靶向人端粒酶逆转录酶裸鼠模型
- 微淋巴管形成对胃癌淋巴结转移的影响
- 2010年
- 目的:探讨微淋巴管形成在胃癌淋巴结转移中的作用及其二者间的病理相关性。方法:取40例胃癌组织(筛选出有无淋巴结转移病例各20例,分为有转移组和无转移组),另取15例胃溃疡良性病变组织作对照组,采用免疫组化SP法检测血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)、血管内皮生长因子受体3(Vascular endothelial growth factor re-ceptor-3,VEGFR-3)表达水平,再以肾水平蛋白(Podoplanin)标记微淋巴管内皮细胞,计数微淋巴管密度(Lymphatic microvesseldensity,LMVD)及分布特点。结果:胃癌组与对照组之间LMVD存在显著差异(P<0.05),LMVD在有转移组与无转移组有显著差异(P<0.05),胃癌组中LMVD与性别年龄无显著相关性,VEGF-C表达胃癌组与对照组有显著差异(P<0.05),在有转移组与无转移组间表达强度有显著差异(P<0.05)。VEGF-C表达与VEGFR-3表达有高度相关性,VEGFR-3的表达在有转移组与无转移组间有显著差异(P<0.05)。结论:VEGF-C与VEGFR-3高表达能够促进微淋巴管的生成,微淋巴管的增多亦可增强VEGF-C与VEGFR-3的表达。微淋巴管的增多在促进胃癌淋巴结转移中有重要意义。
- 王肖泽王继见黄金向
- 关键词：胃癌淋巴转移微淋巴管密度血管内皮生长因子C微淋巴管生成
