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鲁苇媛
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
供职机构:
首都医科大学
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发文基金:
北京市自然科学基金
国家自然科学基金
北京市教育委员会科技发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
杨川杰
河北医科大学第二医院
赵焕英
首都医科大学
郝淳
河北医科大学第二医院
丁库克
首都医科大学
李莉
首都医科大学附属北京佑安医院
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2011
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利用RNA干扰技术构建IER5-SiRNA-Hela细胞系
被引量:4
2011年
目的观察小干扰RNA(siRNA)转染Hela细胞后,对IER5基因抑制效果,筛选出高效的siRNA转染质粒。方法利用siRNA设计软件,将设计好的RNA片断插入到siRNA表达质粒载体PsilencerTM 3.1-H1 hygro中,测序正确后转染至Hela细胞中。利用Real-time PCR的方法 ,测定siRNA对Hela细胞中IRE5的抑制效果。结果在mRNA水平及Western blot测试,IER5-siRNA-Hela细胞的IER5基因mRNA表达抑制效果明显。从细胞形态上讲,IER5-siRNA-Hela细胞与正常Hela细胞相比,IER5-siRNA-Hela细胞比Hela细胞体积大。结论本实验成功的获得了特异性抑制IER5基因的IER5-siRNA-Hela细胞系。
李莉
赵焕英
杨川杰
鲁苇媛
郝淳
乔茶
周平坤
徐勤芝
丁库克
关键词:
REAL-TIMEPCR
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