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魏红梅
作品数:
2
被引量:12
H指数:2
供职机构:
中国药品生物制品检定所
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
袁曾麟
中国药品生物制品检定所
陈天寿
中国药品生物制品检定所
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1篇
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2篇
中国药品生物...
作者
2篇
陈天寿
2篇
袁曾麟
2篇
魏红梅
传媒
1篇
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1篇
中国实验动物...
年份
2篇
1994
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快速PCR法与常规法检测动物细胞培养物污染支原体的比较研究
被引量:3
1994年
本文报告两步PCR法快速检测污染动物细胞培养物的支原体(Mycoplasma).外部引物PF1,PR1和内部引物PF2,PR2选自rRNA操纵子16SrRNA,23SrRNA空间保守区域,第一步PCR产物长度在309~527bp之间,第二步PCR产物长度在110~309bp之间,此方法能扩增污染细胞常见的七种支原体,灵敏度达到203fg/ml,不能扩增常污染细胞的CMV、E.coli以及SP2/0细胞、Hela细胞的DNA.53株细胞培养物,PCR检测20株(37.7%)为阳性,直接培养法检测13株(24.5%)为阳性,DNA荧光染色法检测14株(26.4%)为阳性,其中动物细胞23株,PCR检测9株(39.1%)为阳性,直接培养法检测7株(30%)为阳性,DNA荧光染色法检测8株(34.8%)为阳性,不计ATCC提供的4株阴性细胞,阳性率分别为47.4%,36.8%,42.1%,三种方法检测18株动物细胞结果一致(12株阴性,6株阳性).3株PCR检测阳性,其他方法检测阴性;Vero41DNA荧光染色法检测阳性,其他方法检测阴性:J-111PCR检测阴性,其他方法检测阳性。PCR法与常规法相比,灵敏度提高?
魏红梅
袁曾麟
陈天寿
关键词:
培养法
荧光染色
动物细胞培养
PCR产物
两步PCR法检测细胞培养物中支原体污染的初步结果
被引量:9
1994年
本文报道用两步PCR法快速检测细胞培养物中污染的支原体(Mycoplasma)。两套引物选自16SrRNA和23SrRNA保守区域,外部引物PF1,PR1扩增的DNA片段在360~500bp之间,内部引物PF2,PR2扩增的DNA片段在140~220bp之间。试验表明,两步PCR法能检出污染细胞培养物七种常见的支原体。17份待检细胞培养物,两步PCR法检测,9份(52.9%)为阳性,直接培养法检测,5份(29.4%)为阳性。采用快速热循仪,使PCR反应时间大大缩短,30次循环仅需20分钟。反应液的用量也仅10μl,提高了检测效率,节省了材料,降低了试验用费。本文就两步PCR的灵敏度等特性也作了初步测试。
魏红梅
袁曾麟
陈天寿
关键词:
聚合酶链反应
支原体
细胞培养物
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