马鸣啸
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- H_9N_2亚型禽流感病毒血凝素基因克隆及分子进化分析
- 2004年
- 用RT -PCR方法 ,以 1株H9N2 亚型禽流感病毒分离株RNA为模板 ,扩增了HA全基因cDNA。将HAcDNA克隆于pMD1 8-T载体 ,并对其进行了测序。测序结果表明所克隆的 1 6 85bp核苷酸片段包含了全部HA基因阅读框架和上下游引物 ,编码区为 1 6 83个核苷酸 ,编码 5 6 0个氨基酸。将其序列与其他 8株H9N2 亚型禽流感病毒HA基因及推导的氨基酸序列进行比较 ,其核苷酸同源性在 85 .3%~ 98.6 %之间 ,氨基酸同源性在 88.8%~ 98.9%之间 ,HA基因裂解位点氨基酸序列没有连续碱性氨基酸插入。本研究结果为国内基因工程疫苗等研究奠定了基础 。
- 王振国金宁一金扩世马鸣啸郑敏尹革芬
- 关键词:H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因克隆分子进化
- 共表达H5亚型AIVHA基因与鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒的构建被引量:4
- 2006年
- 以鸡痘病毒(FPV)疫苗株为载体,将H 5亚型A IV血凝素基因(HA)和鸡白细胞介素18(IL-18)基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-L acZ复合启动子(AT I-P 7.5×20)和单一启动子(P 7.5)下游,构建了携带A IV HA基因和鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-H 5HA-IL 18。将H 5亚型A IV HA基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTA 2复合启动子(AT I-P 7.5×20)下游构建了携带H 5亚型A IV HA基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTA 2-H 5HA。应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E 4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),在B rdU药物加压下进行3次蚀斑筛选。以不同代次细胞的mRNA为模板,利用H 5亚型A IV HA基因和鸡IL-18基因特异引物进行RT-PCR和蛋白印迹检测,筛选出能共表达H 5亚型A IV HA基因与鸡IL-18基因和单独表达H 5亚型A IVHA基因的重组鸡痘病毒rFPV-H 5HA-IL 18和rFPV-H 5HA,这些重组鸡痘病毒的构建为A IV活载体疫苗的研制奠定了基础。
- 王振国金宁一马鸣啸费东亮金扩世
- 关键词:禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒
- 猪圆环病毒2型内蒙古株全基因组的克隆及序列分析被引量:6
- 2004年
- 取内蒙古某猪场疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征 (PMWS)病猪的肝、淋巴结、肺、脾等器官组织病料 ,处理后负染 ,透射电镜观察到约 17nm的病毒粒子。用 PCR法从病料中扩增获得 2型猪圆环病毒的全基因组序列 ,其全长为176 7bp,与 Gen Bank中公布的 11株 PCV- 2型序列比较 ,同源性为 95 .2 %~ 99.8%
- 秦晓冰金宁一郑敏马鸣啸鲁会军张洪勇尹革芬葛淑敏邹啸环
- 关键词:猪圆环病毒2型基因组克隆多系统衰竭综合征