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陈樱: 作品数：176 被引量：326H指数：9; 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西大学科研基金更多>>; 相关领域：农业科学文化科学医药卫生生物学更多>>

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广西地区腹泻仔猪呼肠孤病毒的感染及序列分析被引量：1: 2024年; 为了解广西地区腹泻仔猪中哺乳动物呼肠孤病毒(MRV)的感染情况及主要流行毒株,应用套式RT-PCR对广西部分地区2020-2022年173份腹泻猪样品进行检测,并选取部分阳性样品进行S 1基因扩增与分析,进一步了解广西地区MRV主要流行毒株的基因特征。结果显示,2020-2022年173份样品MR总阳性率为18%(32/173),各年阳性率分别为29.6%、9.9%和33%。获得1株S 1基因全长序列,序列比对结果发现该序列与其他MRV S 1基因序列的核苷酸同源性为43.4%~97.9%,氨基酸同源性为26.1%~97.8%;遗传进化分析显示,获得的毒株序列为MRV3型,与其他猪源MRV3型毒株ZJ2013、IND/MZ/3013789/reo在同一分支上,同属于谱系Ⅳ。结果表明广西地区猪群存在一定程度的MRV感染,为进一步防控广西腹泻猪群中MRV的流行提供科学依据。; 隆美金陆颖李茂宁易春华廖梦娟余科辰覃一峰陈樱陈樱黄伟坚韦祖樟

猪肠病毒G型实时定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2: 2020年; 为建立一种能够准确、快速地鉴别猪肠病毒G型的诊断方法,本研究参考猪肠病毒G型的3D基因序列设计1对特异性引物,扩增片段预计大小约为104 bp,将3D基因片段克隆到pMD18-T载体上的阳性重组质粒作为标准品,建立猪肠病毒G型的实时定量PCR检测方法,并应用到临床样品的检测。研究结果显示,该方法设计的引物具有高度的特异性;标准曲线的Cq值与质粒标准品模板在2.92×10^8copies/μL^2.92×10^2copies/μL范围内,呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-4.023;组内与组间重复性试验显示变异系数很小,在0.26%~1.57%之间。该方法的最低检测限量可达2.92×10 copies/μL。使用本方法对2017-2019年广西部分地区的猪场临床腹泻粪便样品进行检测,猪肠病毒G型阳性检出率为18.42%,说明广西部分地区的猪场存在猪肠病毒G型的感染。本研究成功建立了猪肠病毒G型实时定量PCR检测方法,可用于猪肠病毒G型感染的临床检测。; 杨春杰米雪刘雪婷蹇慧刘芳陈樱韦祖樟黄伟坚欧阳康; 关键词：实时定量PCR

塞内卡病毒广西分离株的初步分离与鉴定被引量：3: 2022年; 为了确诊一例疑似SVA感染的临床病例,本试验将从广西地区某猪场母猪和肥育猪鼻及蹄部采集的出现典型水泡性病变的猪水泡液进行无菌处理后接种PK-15细胞,连续传代培养,通过细胞病变、RT-PCR扩增、基因序列测定、TCID_(50)和间接免疫荧光等方法对分离得到的病毒进行鉴定。结果显示:该病毒株在PK-15细胞上生长良好,可见明显细胞病变;接种PK-15细胞进行TCID_(50)测定,病毒滴度达到10^(-6.75)/mL;间接免疫荧光试验结果显示,接种第4代细胞培养物的BHK-21细胞出现特异的绿色荧光;扩增和测定了VP1基因序列后进行同源性及遗传进化分析,发现该毒株与Senecavirus病毒属中的病毒成员同源性最高,与之前2017年报道的广东分离株SVA-CH-GDYS02-2017和SVA-CH-GDLZ01-2017位于较近的进化分支内。以上结果表明,已成功从样品中分离到了SVA,且该毒株可以在PK-15和BHK-21细胞上进行增殖。本研究成功分离到一株SVA,为后续塞内卡病毒的诊断和疫苗研制提供试验材料。; 牛晨霞王豪农作荣全东群曾悦任同伟王玉旭王景隆刘畅陈樱欧阳康黄伟坚韦祖樟

广西地区犬和猫肠道病毒的病原学调查研究: 2024年; 为了解引起广西地区犬和猫腹泻等肠道病原的分布情况,并探究犬和猫新型肠道病毒感染的临床特征,为临床中及早诊治和防控肠道疾病提供参考依据,本试验采集宠物犬和猫粪便拭子样品394份(犬样品172份,猫样品222份),并通过聚合酶链式反应(PCR)或反转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)筛查犬细小病毒(CPV)、猫瘟病毒(FPV)和查帕马细小病毒(ChPV)等13种主要犬和猫肠道病毒,并分析肠道病毒阳性率与年龄、性别、免疫状况和临床症状之间的相关性。结果显示,犬粪便样品中总阳性样品数为49份,占比28.49%;其中CPV的阳性率最高,达到15.12%,临床症状为典型的肠道症状;其次,犬粪便样品中还检测到犬冠状病毒(CCoV,4.65%)、猫杯状病毒(FCV,4.07%)、嵴病毒(KoV,4.07%)、博卡病毒(BoV,3.49%)、犬瘟热病毒(CDV,2.91%)和布法病毒(BuV,0.58%);其中11份粪便样品混合感染了2种及以上种类的肠道病毒,CPV感染占10份。幼龄犬对CCoV和FCV比较易感;各肠道病毒阳性率与性别无相关性,部分肠道病毒阳性率与免疫状况和临床症状有相关性。猫粪便样品中总阳性样品数为32份,占比14.41%;FPV的阳性率最高,达到8.11%;其次,猫粪便样品中还检测到新型肠道病毒,包括FCV(4.05%)、ChPV(1.35%)、BoV(1.35%)、BuV(0.45%)和猫冠状病毒(FCoV,0.45%);其中混合感染样品仅4份,而FCV感染占3份。FPV和BoV阳性率与猫的年龄和免疫状况存在相关性,各肠道病毒阳性率与猫的性别和临床症状无明显相关性。值得关注的是,犬和猫粪便中均可检测到A型流感病毒(IAV),阳性率分别为2.91%和0.45%。综上表明,CPV和FPV仍是引起犬和猫肠道疾病的主要病原,同时也是混合感染的重要组成;多种新型肠道病毒的阳性率虽然不高,但仍是引起肠道或肠外疾病中不可忽视的病原;IAV的检出再次强调了犬和猫作为“中间宿主”的重要作用。本试验结果不仅为犬和猫肠道传染�; 黎波宏黄馨何庆元方友桥满婷婷陈建材周华波韦祖樟欧阳康欧阳康陈樱; 关键词：肠道病毒流行病学调查

广西猫杯状病毒全基因组序列测定及其遗传进化分析被引量：2: 2022年; 为了掌握广西猫杯状病毒(FCV)的流行情况及其变异规律。本研究于2018年3月至2019年9月采集疑似FCV鼻拭子59份,其中阳性检出率49.2%(29/59)。将阳性病料接种CRFK细胞,成功分离获得一株FCV毒株,命名为NN01-19。为深入了解其遗传进化规律和分子特征,本研究通过RT-PCR方法扩增获得该毒株的全基因组序列,并对其ORF2基因进行了遗传进化和序列分析。结果表明,NN01-19毒株基因组全长7709 bp,其中ORF2基因全长2010 bp。遗传进化分析发现该毒株与广西早期分离株GX01-13同属基因I群,但核苷酸和氨基酸同源性仅为77.9%和86.5%。其中,超变区(E区)抗原线性表位新增T448A、T450G、G451Q和T454S四个突变位点。重要的是,该区域还发生了V430T的突变,符合VS-FCV致病性氨基酸突变特点。本研究为深入了解FCV的流行特点及其变异规律提供了参考依据,同时也为今后防控FCV提供了重要的理论基础。; 丁仰保何剑桥刘林林余良政崔柏杨周华波韦祖樟欧阳康黄伟坚陈樱; 关键词：全基因组 ORF2基因遗传进化分析

一例犬传染性性病肿瘤的诊治: 2024年; 犬的传染性性病肿瘤(Transmissible Venereal Tumor,TVT),也被称为传染性性病肉瘤或Sticker’s肉瘤,是一种犬自然发病的水平传播性肿瘤。该病主要损害犬外生殖器,偶尔还会感染犬内生殖器及其他黏膜[1]。该病可发生于犬的任何年龄[2],多发于2~5岁的性成熟的繁殖适龄犬,潜伏期通常为2~6个月。该病主要通过交配进行传播,当动物舔舐时也可能发生在其他部位,如口腔、皮肤等,也有研究表明,该病还可影响眼、鼻、口、大脑和淋巴结等内部器官。感染犬的临床表现主要是肿瘤呈菜花状,肿瘤表面溃疡和发炎,且伴有血液渗出[3,4]。患该传染性性病肿瘤的母犬可表现为阴道流血,这与母犬发情的临床表现非常相似。有研究表明,肿瘤细胞来源于组织细胞[5]。; 张怡欣何颖班云徐韦婕周华波陈樱; 关键词：母犬性成熟内生殖器

水牛匈爱病毒结构蛋白VP1的截短表达及多克隆抗体的制备: 2023年; 为了制备水牛匈爱病毒(BufHuV)结构蛋白VP1截短基因的多克隆抗体,将病毒的VP1截短基因克隆至原核表达载体pET-32a(+)获得重组质粒pET-32a-BufHuV-VP1,重组质粒转化至BL21感受态细胞(DE3)后诱导表达,VP1截短蛋白的分子质量约为31.5 ku,主要以包涵体的形式表达。以纯化好的重组蛋白免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体,通过Western-blot与IFA鉴定其特异性。结果显示,制备的小鼠多克隆抗体能与纯化的VP1重组截短蛋白和感染BufHuV的细胞表达的VP1特异性结合,表明多克隆抗体具有良好的反应原性和特异性。水牛匈爱病毒VP1截短重组蛋白及其多克隆抗体的成功制备为研究BufHuV致病机制、VP1蛋白功能以及血清学检测方法的建立提供了材料基础。; 邹延林张广欣罗宇航朱鑫玥刘黄豪莫筱可谢江王小玲陈樱欧阳康韦祖樟覃一峰潘艳黄伟坚; 关键词：结构蛋白原核表达多克隆抗体

猪丁型冠状病毒截短S蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立与应用: 2024年; 为建立快速、高效检测猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)的血清学方法,构建了pET-32a-S-S1b重组质粒,通过原核表达获得重组S1b蛋白,以此为包被抗原建立了检测血清中PDCoV IgA抗体的间接ELISA方法,对该检测方法的反应条件进行优化,验证了其特异性、敏感性和重复性等。结果显示:重组S1b蛋白呈包涵体表达,大小为34.7 ku,反应原性良好;建立的间接ELISA检测方法的最佳反应条件为:250 ng/孔抗原4℃过夜包被,10 g/L BSA 37℃封闭2 h,待检血清1∶200稀释37℃孵育45 min,二抗1∶10000稀释37℃孵育1 h,显色时间为10 min。测定24份阴性血清,确定临界值为0.388。检测阳性血清敏感度为1∶1600;批间和批内重复试验的变异系数均小于10%;本方法特异性高,与猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、非洲猪瘟病毒、猪圆环病毒和猪肠病毒标准血清无交叉反应。选取30份血清,与Western-blot检测结果比较,该间接ELISA的符合率为96.66%。应用该方法对486份临床血清样品进行检测,阳性率为32.72%。本研究中建立的方法为PDCoV的防控提供了技术支持。; 秦秋英张政黄夏玲洪大林隆美金陈樱韦祖樟韦祖樟欧阳康; 关键词：间接ELISA

一株猪瘟病毒的分离鉴定及E2基因遗传变异分析被引量：5: 2020年; 为分析广西猪瘟病毒(CSFV)遗传变异情况及其与疫苗株的差异,通过RT-PCR方法在猪瘟常规免疫猪场发病材料中检测到1份猪瘟病毒阳性的病料。将病料研磨、过滤后接种PK-15细胞,并在细胞上连续传代进行病毒的分离,通过RT-PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,成功分离到了1株猪瘟病毒,命名为CSFV GXNN1896株。对GXNN1896株E2基因进行扩增、克隆测序和序列比对,结果表明该毒株E2基因与HCLV株、Shimen株等参考毒株E2基因的核苷酸序列同源性为81.9%~97.5%,氨基酸相似度为87.7%~96.8%,E2基因结构域的B、C亚区分别在12个和19个氨基酸的变异,与我国2.1 d亚型哈尔滨分离株NK150425株(GenBank;MF150643.1)同源性最高(96.8%),与德国疫苗毒株Reims(GenBank;AY259122.1)同源性最低(87.7%),与中国猪瘟兔化弱毒疫苗株C株(GenBank;Z46258.1)相比有46个氨基酸的突变。遗传进化树分析发现GXNN1896株的E2基因与参考疫苗毒株遗传距离较远,且位于2.1 d亚群,属于野毒株。说明广西地区流行CSFV毒株逐渐往偏离疫苗株的方向发展。; 刘畅曾悦王豪颜顺通黄伟坚陈樱欧阳康韦祖樟; 关键词：猪瘟病毒

猫常见病毒多重PCR快速检测试剂盒及其引物组: 本发明公开了猫常见病毒多重PCR快速检测引物组，包括针对FCV、FPV、FIV、FHV‑1四种猫呼吸道及肠道病毒的四对PCR引物，它们分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.8的碱基序列。据此，发明人还...; 陈樱郭嘉宁周华波郭金凡曾昊韦祖樟欧阳康黄伟坚; 文献传递

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