郭燕 作品数:11 被引量:68 H指数:6 供职机构: 石河子大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家科技部农业科技成果转化资金 兵团博士基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
绵羊IFN-γ基因的克隆与序列分析 被引量:6 2006年 将无菌采集的绵羊(湖羊)脾脏淋巴细胞进行体外培养,利用刀豆蛋白(ConA)刺激24 h后提取总RNA,采用RT-PCR扩增绵羊IFNγ-基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,经PCR和双酶切鉴定后进行测序。测序结果表明,扩增的cDNA全长554 bp,包含501 bp开放阅读框,编码166个氨基酸,分子质量约为18.4 ku。克隆的绵羊IFNγ-基因与GenBank上已公布的人、牛、山羊、马鹿、马、骆驼、猪、狗、猫和鸡的IFNγ-核苷酸序列进行比较,其同源性分别为75.2%,96.6%,99.0%,95.8%,83.0%,88.8%,86.6%,82.4%,53.9%和32.9%,与其他品种绵羊的核苷酸同源性为100%;氨基酸序列同源性分别为61.7%,94.6%,98.2%,92.2%,77.8%,86.8%,77.8%,76.0%,39.5%和6.7%,这为进一步研究绵羊IFNγ-基因的表达、生物学活性和应用奠定了一定基础。 夏伦斌 连宏军 王新华 闫丽辉 薄新文 钟发刚 荣光 王运宏 郭燕关键词:绵羊 IFN-Γ基因 克隆 新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查 为了解北疆地区牛病毒性腹泻病毒的感染状况,以及BVDV的基因型的分布。从新疆北部奶牛场中采集牛全血、抗凝血及直肠粘膜。利用新疆农垦科学院牛病毒性腹泻病毒标准化(BVDV)抗原捕获ELISA检测试剂盒检测粘膜中的牛病毒性腹... 郭燕关键词:牛病毒性腹泻 奶牛 克隆测序 文献传递 抗菌肽及其在畜牧生产体系中的应用 被引量:3 2006年 陈琛 王新华 薄新文 连宏军 郭燕关键词:抗菌肽 小分子多肽 畜牧 微生物入侵 生物体内 宿主防御 抗BVDV卵黄抗体的制备 被引量:5 2007年 采用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)免疫产蛋母鸡,然后用水稀释法成功地从卵黄中分离出抗BVDV免疫球蛋白(抗-BVDV IgY)。建立起测定鸡蛋中特异性抗BVDV活性的间接ELISA方法,并采用此方法检测每次免疫后第10天的抗体滴度。结果表明,蛋鸡在首次免疫后第10天,卵黄中可以检测到抗-BVDV IgY;5次免疫后,抗体效价达到1:6400,半年后仍能维持在该水平。 邓宇 王新华 郭燕 钟发刚 荣光 夏伦斌 陈琛关键词:BVDV IGY 间接ELISA 绦虫成虫制片方法的改进 被引量:12 2007年 目的 制作结构清晰、颜色鲜亮、不易褪色的莫尼茨绦虫成虫染色标本。方法 采用德氏(Delafield)苏木素染色液、盐酸卡红染色液和硼砂卡红染色液等3种染色液分别对莫尼茨绦虫成虫进行染色。结果 用德氏(Delafield)苏木素染色液1:15稀释液,室温染色12h,盐酸酒精分色5~10min,染色效果最好。结论 德氏(Delafield)苏木素染色法,适用于各种大型绦虫成虫的染色标本的制作,在寄生虫学教学科研及动物检疫等方面有很大的使用价值。 王运宏 薄新文 孙延鸣 刘继荣 郭燕 陈琛 荣光 夏伦斌关键词:莫尼茨绦虫 制片方法 捻转血矛线虫Hc38基因的克隆及其RNAi载体的构建 被引量:4 2007年 根据RNAi目标序列的选取原则和捻转血矛线虫Hc38基因(登录号AY749124)产物的保守结构域所在核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR方法从绵羊捻转血矛线虫雌性成虫中扩增出约400 bp cDNA序列,与AY749124序列同源性为99%。将目的序列亚克隆到RNAi载体L4440中,经PCR和酶切鉴定证明,成功构建了捻转血矛线虫对应于Hc38基因的RNAi载体L4440-Hc38。 荣光 王新华 薄新文 连宏军 钟发刚 邓宇 陈琛 夏伦斌 郭燕 王运宏关键词:捻转血矛线虫 反转录PCR RNA干扰 牛病毒性腹泻病毒新疆分离株E2基因的克隆及序列分析 被引量:5 2008年 应用RT-PCR方法从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)新疆石河子分离株、玛纳斯不同年份两个分离株扩增获得的3株BVDV的E2基因序列,分别命名Shihezi148、Manasi和MNS2(GenBank登录号:EU159699、EU159703和EU169937)。序列分析结果表明3株E2基因长度分别为1121bp、1122bp和1122bp,分别编码373、374和374个氨基酸残基。核酸序列同源性和系统发生分析表明,3株病毒均属于BVDV基因1型(BVDV-1),Shihezi 148株与澳大利亚Bega株亲缘关系最近,同处于BVDV-1c基因亚型群,其E2氨基酸同源性为90.11%。Manasi株和MNS2株E2基因核酸序列仅有4个碱基的差别,它们与Changchun 184和匈牙利VEDEVAC株亲缘关系最近,位于BVDV-1b基因亚型群。Manasi和MNS2株与Changchun 184株E2氨基酸同源性分别高达98.66%和98.93%。 黄新 钟发刚 薄新文 杨华 郭燕 刘志强 王新华关键词:克隆 牛病毒性腹泻病毒及其进化研究进展 被引量:6 2007年 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea virus,BVDV)在我国发现有20多年,而在世界范围来讲已有近100年的历史。由于牛病毒性腹泻病毒造成奶牛生产性能下降、繁殖障碍、持续感染等,是导致集约化奶牛场严重亏损的重要原因。且牛病毒性腹泻导致的黏膜病致死率几乎100%,已经严重阻碍养牛业的发展,但目前我国对牛病毒性腹泻还没有好的防控措施。文章对牛病毒性腹泻的发生历史总结,便于在牛病毒性腹泻病毒的诊断和预防中参考。 郭燕 王新华 钟发刚关键词:牛病毒性腹泻病毒 进化 牛病毒性腹泻病毒石河子株E2基因的克隆及其表达载体的构建 被引量:1 2008年 应用RT-PCR方法从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)新疆石河子分离株中扩增了E2基因,命名Shihezi 148(GenBank登录号:EU159699),扩增序列分析结果表明:Shihezi 148 E2基因长度为1121 bp,编码373个氨基酸残基;同源性分析表明,Shihezi 148与澳大利亚Bega株E2基因核苷酸同源性为88.32%,与中国changchun 184株的同源性为74.42%;通过基因重组技术构建了去除C端跨膜区的截短E2基因的原核表达载体pProEX HTa-E2和包括信号肽和全长E2蛋白的真核重组质粒pVAX1-E2。经过PCR、酶切及测序结果表明pProEX HTa-E2和pVAX1-E2重组表达载体构建成功。 黄新 钟发刚 薄新文 杨华 郭燕 刘志强 赵军民 任耀军 罗盘棋 王新华关键词:牛病毒性腹泻病毒 E2基因 克隆 新疆某地牛病毒性腹泻病毒生物型的鉴定 被引量:9 2007年 从临床怀疑为牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染奶牛的血液中用RT-PCR方法检测BVDV,目的片段回收克隆测序,经Blast分析,与匈牙利疫苗致弱株同源性99%,并用PCR方法鉴定基因型,均为BVDV-Ⅰ型。用MDBK细胞鉴定生物型,不致细胞病变,为非致细胞病变(nCP)型。 郭燕 王新华 邓宇 陈琛 荣光 夏伦斌 王运宏 钟发刚关键词:牛病毒性腹泻病毒