谢锦艳
- 作品数:10 被引量:30H指数:3
- 供职机构:中国中医科学院中医药信息研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省重大科技创新专项计划项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 木犀草素是具有PPARγ激动剂活性的新型AMPK激活剂被引量:7
- 2019年
- 目的:木犀草素是一种天然黄酮类化合物,早期报导其能激活PPARγ,本实验室发现其也能激活AMPK。因此本研究验证木犀草素在脂肪细胞中能否激活PPARγ和AMPK,并探究这两种活性对脂肪前体细胞分化及脂联素高聚化的影响。方法:使用LanthaScreen TR-FRET PPARγ竞争性结合检测试剂盒检测木犀草素与PPARγ的结合能力,并用PPRE转录激活报告基因体系验证木犀草素是否激活PPARγ转录活性,利用油红O染色法检测木犀草素对3T3-L1脂肪前体细胞分化的影响,采用RNA干扰沉默成熟脂肪细胞中AMPKα1,用Western Blot检测相关蛋白水平。结果:木犀草素能直接结合PPARγ,其IC50为1880 nmoL·L^-1,并显示剂量依赖的PPARγ转录激活活性,抑制PPARγSer-273位点磷酸化。木犀草素能升高pAMPK(Thr-172)水平,抑制脂肪前体细胞分化,升高脂联素高聚化水平。结论:木犀草素通过激活AMPK和PPARγ调控脂肪前体细胞分化和脂联素高聚化,是一种具有PPARγ激动剂活性的新AMPK激活剂,有望成为治疗Ⅱ型糖尿病和肥胖等代谢紊乱疾病的潜在药物。
- 张雨点谢锦艳李小川张志杰李珍
- 关键词:木犀草素PPARΓAMPK脂联素胰岛素敏感性
- 开口箭皂苷诱导肿瘤细胞凋亡研究被引量:7
- 2014年
- 目的:研究开口箭皂苷对肿瘤细胞凋亡的影响,并对其机制进行研究。方法:采用MTT法检测开口箭皂苷对体外培养的肿瘤细胞系HepG2、A549和SGC-7901增殖的影响,利用荧光染色技术及流式细胞术研究开口箭皂苷对HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响,利用Western blotting技术检测Bax、Bcl-2、P53蛋白的表达情况。结果:开口箭皂苷对HepG2肝癌细胞具有显著的抑制作用,其24、48及72 h对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为13.99μg/ml、11.78μg/ml和10.01μg/ml,且呈一定的量效关系和时效关系;对A549肺癌细胞的72h的IC50为23.68μg/ml,而对SGC-7901胃癌细胞的增殖无明显抑制作用。流式细胞仪检测结果显示,HepG2细胞经浓度为10、15和20μg/ml的开口箭皂苷处理24h后,S期细胞的比例分别为28.81%、34.96%、46.57%;凋亡细胞的比例分别为30.06%、30.32%和40.34%。Western blotting结果显示,随着开口箭皂苷浓度的增加,Bax、P53蛋白的表达量增加,而Bcl-2的表达量减少。结论:开口箭皂苷可抑制HepG2和A549细胞的增殖并诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与开口箭皂苷上调P53蛋白表达,从而影响Bax和Bcl-2表达,使细胞阻滞于S期,并最终导致细胞凋亡。
- 谢锦艳张东东李玉泽李真宋蓓乔蓉霞刘海静宋小妹
- 关键词:开口箭凋亡
- 糖智宁胶囊抗糖尿病记忆障碍药效研究
- :糖智宁为中药复方制剂,系由葛根、珠子参和黄连三味中药组成.具有活血化瘀,化痰开窍之功效,临床主要用于治疗糖尿病.本文主要研究糖智宁胶囊对链尿佐菌素所致糖尿病大鼠血糖及记忆障碍的影响. 方法:采用链脲佐菌素腹腔一次...
- 许苗苗何瑞刘银环谢锦艳宋小妹
- 关键词:糖尿病记忆障碍药效评价
- 开口箭乙醇提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡活性研究被引量:3
- 2014年
- 目的探讨开口箭根部乙醇提取物(ERT-95)对肝癌细胞HepG2生长的影响及其抗肿瘤作用的可能机制。方法采用MTT法绘制HepG2细胞生长曲线,检测ERT-95对HepG2细胞的生长抑制作用;采用光学显微镜观察HepG2细胞的凋亡形态变化;采用Hochest染色原理检测HepG2细胞凋亡情况;采用Western blot检测Cyt C蛋白的表达;采用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3、caspase-9的活性变化;采用DNA ladder凝胶电泳技术检测DNA的裂解情况。结果 MTT结果显示,ERT-95对HepG2细胞的抑制作用呈剂量依赖性(IC50为52.57μg·mL-1);光学显微镜下,处理组细胞出现皱缩、变圆等形态变化;Hochest-33258染色后的处理组细胞呈现典型的凋亡结构;Western blot结果显示,随着药物浓度增加,Cyt C蛋白表达上调;caspase活性检测显示,caspase-3、caspase-9活性逐步升高;与对照组相比,处理组琼脂糖凝胶电泳图谱出现DNA条带。结论ERT-95有显著的体外促肿瘤细胞凋亡作用,初步研究其促肿瘤细胞凋亡机制是通过线粒体释放Cyt C,进一步活化caspase-9和caspase-3而激活内源性核酸内切酶,导致DNA裂解而实现的。
- 谢锦艳许苗苗刘银环宋蓓刘越刘海静宋小妹
- 关键词:开口箭肝癌细胞HEPG2
- 多成分同时比较芫花及芫花叶化学组成被引量:1
- 2014年
- 目的:多成分比较芫花花蕾和芫花叶的化学组成。方法:以芹菜素、木犀草素、羟基芫花素、芫花素为对照品,采用RP-HPLC方法测定芫花花蕾及芫花叶中4个成分的含量,比较2个药用部位的成分组成差异。Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(58∶42∶0.5),流速0.8 mL·min-1,检测波长350 nm(木犀草素、羟基芫花素)、338 nm(芹菜素、芫花素),柱温35℃。结果:芫花花蕾中这4个成分的质量分数依次为0.017%,0.088 4%,0.069 9%,0.059 3%,芫花叶中这4个成分质量分数依次为0.011 8%,未检测到,0.012 3%,未检测到。结论:芫花叶和芫花花蕾含有两个相同成分,但含量不同;而花蕾中的两个成分在叶中未检测到,表明叶与花蕾成分不同,可根据临床治病目的分别入药。
- 谢锦艳范崇庆宋小妹顾雪竹李娆娆方婧
- 关键词:芹菜素木犀草素芫花素
- 桦褐孔菌提取物对人肝癌HePG_2细胞增殖及凋亡的影响被引量:9
- 2013年
- 目的:探讨桦褐孔菌提取物在体外对人肝癌HePG2细胞株增殖和凋亡的影响。方法:桦褐孔菌提取物10、20、40、60、80μg/ml在24、48、72h处理人肝癌HePG2细胞后,采用MTT法检测细胞生长的抑制率,计算各时间点IC50;0、10、40μg/ml桦褐孔菌提取物作用HePG2细胞24h后,Hoechst 33528染色法观察细胞核的形态学变化;0、20、60μg/ml桦褐孔菌提取物处理HePG2细胞24h后,流式细胞仪检测桦褐孔菌提取物对人肝癌HePG2细胞周期的影响,Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡的作用。结果:桦褐孔菌提取物能时间和浓度依赖性的抑制人肝癌HePG2细胞的增殖,与阴性对照组比较,抑制率有显著差异;桦褐孔菌干预后的HePG2细胞染色后观察到核质浓缩,核碎裂,凋亡小体形成,呈典型的凋亡变化,且呈浓度依赖性;G2/M期细胞数量增加,而G0/G1期细胞数明显减少,有凋亡峰形成,与0μmol/L组相比,有显著差异,且呈浓度依赖性。双染法检测发现与0μmol/L组相比,细胞凋亡率明显增加,并呈浓度依赖性。结论桦褐孔菌提取物可能是通过使肝癌细胞滞留在G2/M期及诱导细胞凋亡等机制,从而抑制肝癌细胞的增殖。
- 王文娟雒向宁晁旭刘琦何瑞谢锦艳
- 关键词:病理学细胞周期
- 3种重楼提取物对人肝癌细胞HePG2及SMMC7721增殖的影响被引量:1
- 2013年
- 目的探讨3种重楼提取物对人肝癌细胞HePG2和SMMC7721增值的影响。方法重楼醇提取物(RP1)、60%乙醇提取物(RP2)、95%乙醇提取物(RP3)的不同浓度20、40、60、80、100μg/mL在48 h处理HePG2及SMMC7721细胞后,采用MTT法检测细胞生长的抑制率,计算各组半数抑制剂量(IC50)。结果 3种重楼提取物均能浓度依赖性的抑制人肝癌HePG2及SMMC7721细胞生长,各组间抑制率比较均有显著性差异(P<0.01);醇提取物(RP1)对两种肝癌细胞的IC50均大于100μg/mL;60%乙醇提取物对两种肝癌细胞的IC50为86.63±1.17和83.79±1.03;95%乙醇提取物对两种肝癌细胞的IC50为60.02±1.27和58.44±1.37。结论 95%乙醇提取物抑制肝瘤细胞增值作用最强,其次为60%乙醇提取物,醇提取物最弱。
- 王文娟雒向宁马晓军晁旭谢锦艳
- 关键词:肝癌细胞细胞形态抑制率
- 不同有机溶剂对人胃癌SGC-7901和结肠癌HT29细胞的细胞毒作用被引量:2
- 2014年
- 目的:探索有机溶剂的细胞毒作用。方法:采用MTT法,研究8种有机溶剂对2种人胃癌细胞株的细胞毒作用。结果:对于SGC-7901细胞,甲醇达到1%时对细胞增殖无明显细胞毒作用,丙酮和丙三醇达到3%时对细胞增殖无明显细胞毒作用,乙醇达到5%时对细胞增殖无明显细胞毒作用;对于HT29细胞,丙酮达到5%时对细胞增殖无明显细胞毒,其余7种有机溶剂的细胞毒作用均比较显著。结论:丙酮细胞毒作用较小,为溶解药物的最佳选择溶剂,正丁醇的细胞毒作用显著。
- 刘琦谢锦艳冯改利张亚强宋小妹
- 关键词:肿瘤细胞溶剂
- HPLC法同时测定维血宁中3种化学成分的含量被引量:1
- 2014年
- 目的:建立同时测定维血宁中虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷及大黄素含量的方法。方法:应用HPLC法测定,色谱柱:Kromasil C18Column(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;柱温:30℃;检测波长:288 nm。结果:虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷和大黄素的线性范围分别为0.09-0.72μg(r=0.9984)、0.4825-3.86μg(r=1.0000)、0.2675-2.14μg(r=1.0000);平均加样回收率分别为98.9%(RSD%=2.8%)、99.6%(RSD%=0.16%)、98.1%(RSD%=0.44%)。结论:该方法同时测定维血宁中的虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷和大黄素的含量,简便易行、准确、重复性好,可为维血宁的质量控制研究提供一种可靠的参考方法。
- 曹瑞谢锦艳柴江何瑞程茜菲宋小妹
- 关键词:HPLC维血宁大黄素虎杖苷
- 5种桦褐孔菌提取物对人肝癌细胞HePG2及SMMC7721增殖的影响被引量:2
- 2013年
- 目的:探讨5种桦褐孔菌提取物对人肝癌细胞HePG2和SMMC7721细胞生长的抑制作用。方法:用桦褐孔菌水提醇沉物(HH1),石油醚萃取物(HH2)、乙酸乙酯萃取物(HH3)、正丁醇萃取物(HH4)及萃取后的水层物(HH5)的不同浓度10、20、40、60、80μg/mL在48h处理HePG2及SMMC7721细胞后,采用MTT法检测细胞生长的抑制率,计算各组IC50。结果:5种桦褐孔菌提取物均能浓度依赖性的抑制人肝癌HePG2及SMMC7721细胞生长。水提醇沉提取物与其他4种提取物作用于HePG2及SMMC7721的抑制率比较均有显著性差异(P<0.05;P<0.01),对于HePG2细胞,正丁醇萃取物的IC50大于80μg/mL,水提醇沉提取物与石油醚提取物的IC50比较无显著性差异,与其他2种提取物比较有显著性差异(P<0.01);对于SMMC7721细胞,正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物及萃取后的水层物的IC50均大于80μg/mL,水提醇沉提取物与石油醚提取物的IC50比较无显著性差异。结论:水提醇沉提取物对人肝癌HePG2及SMMC7721的增值抑制作用略优于石油醚提取物,而显著优于其他3种提取物。
- 王文娟雒向宁马晓军刘琦何瑞谢锦艳
- 关键词:肝癌细胞