王鲁 作品数:9 被引量:82 H指数:5 供职机构: 中国农业科学院烟草研究所 更多>> 发文基金: 国家烟草专卖局基金 中国烟草总公司科技项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 更多>>
甲基磺酸乙酯对烤烟种子发芽率的处理效应 被引量:11 2011年 以不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS)作为化学诱变剂,烤烟不同品种的种子为供试材料,探讨了EMS化学诱变剂对烟草种子发芽率、根长等性状差异的诱变处理效应。结果表明,在浓度为0.1%~1.3%的处理范围内,EMS对种子的发芽率主要呈抑制作用,但低浓度处理对种子发芽率和种子根长有促进作用,高浓度处理对种子发芽率和种子根长均呈显著抑制作用;以半致死浓度为选择标准,确定了不同烤烟品种间EMS诱变处理种子的适宜浓度为0.35%~0.52%,致死浓度均为1.3%;供试品种间EMS处理反映的敏感性为云烟87=云烟97〉红花大金元〉中烟100〉K326。 王军伟 蒋彩虹 宋志美 张丽 王鲁 王元英 刘贯山关键词:烤烟 种子 EMS 半致死浓度 烟草MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析 被引量:4 2011年 MADS-box家族基因在植物的生长发育过程中具有重要功能。在烟草生产中出现的早花现象与MADS-box家族基因相关,为了能从烟草中克隆出与开花时间相关的基因,根据不同植物MADS-box家族基因的保守区序列,设计简并引物,采用RT-PCR技术从烟草品种NC82茎尖中成功分离出27条cDNA片段,长度在122~146 bp之间。序列分析表明,其中有16条具有MADS_MEF2类保守结构域,其推导的氨基酸序列与拟南芥等MADS-box家族基因具有同源性,相似性平均能达到76%,并具有15个保守的氨基酸位点,其中7个位点参与蛋白与DNA的相互作用,4个位点具有蛋白二聚化功能。系统发育分析结果表明,这些保守片段分别和拟南芥9个不同的MADS-box家族基因亚类最近似,其中许多亚家族与成花相关,说明NC82中存在具有调控开花的MADS-box家族基因表达,并可能与NC82低温敏感,易早花特性相关。 李元元 杨爱国 王鲁 罗成刚 贾兴华 刘贯山 苏振刚 王元英关键词:烟草 RT-PCR 绒毛状烟草基因组中SSR位点的信息分析 被引量:3 2011年 通过SSRFINDER软件搜索绒毛状烟草基因组DNA,设置条件是重复单元长度2~5 bp,重复次数10~60,共找到6 441个SSR位点,涉及5 227个Scaffold,SSR序列总长为303 963 bp,约占全基因组的0.12‰,即绒毛状烟草基因组中平均每400 kb会出现一个SSR位点。在所有SSR位点中,二、三碱基重复基元分别占总数的45.2%和49.6%,重复单元的重复次数10~20之间的SSR位点占总数的74.6%。 王卫锋 晁江涛 龚达平 王鲁 李凤霞 陈雅琼 孙玉合关键词:简单重复序列 基元 烟草属植物遗传多样性和亲缘进化关系的荧光AFLP分析 被引量:20 2010年 【目的】研究烟草属不同亚属以及不同类型栽培烟草的遗传相似性关系,为明确烟草野生种和栽培烟草的遗传多样性水平、研究栽培烟草起源演化提供依据。【方法】利用CEQ8000遗传分析系统,对烟草属内4种类型的5份栽培烟草以及28份烟草野生种进行荧光AFLP分析,估算其遗传相似系数,并对28份烟草野生种、5份栽培烟草及其可能的祖先种分别进行UPGMA聚类分析。【结果】利用10对AFLP引物在33份种质中共扩增到2 423个片段,2 394个具有多态性。烟草属33份种质的遗传相似系数在0.021—0.860,平均为0.269。当相似系数为0.309时,28份野生烟草按其亚属聚为3类。2个栽培烟草种的5份不同类型烟草与其对应的可能祖先种首先聚为一类。在不同类型普通烟草中扩增到的AFLP共有片段,有97.7%可以在其可能的祖先种中找到。【结论】烟草属植物具有丰富的遗传多样性。栽培烟草进化过程中,其假设的祖先亲本都有一定贡献,其中N.sylvestris对普通烟草的形成贡献最大。 李凤霞 王卫锋 王鲁 崔萌萌 孙玉合烟草NtLS基因RNA干扰表达载体的构建及遗传转化 被引量:7 2011年 腋芽的形成涉及多个调控基因,其中关键基因编码的蛋白属于植物特有的GRAS蛋白家族,它的突变或功能缺失将影响腋生分生组织的形成。笔者利用RACE技术克隆了烟草NtLS基因(GenBank登录号EU935581),NtLS与调控植物腋生分生组织形成的基因LS/LAS/MOC1序列高度相似。本研究从该基因上选取干扰片段,构建了含有反向重复序列的RNAi干扰表达载体,并通过农杆菌侵染的方法转染烟草W38,以期为NtLS基因的功能研究奠定基础。 王卫锋 太帅帅 王鲁 刘贯山 李凤霞 高晓明 孙玉合关键词:烟草 RNA干扰 基于EST序列的烟草cSNP发掘 被引量:2 2012年 SNP标记是一类应用广泛的第三代分子标记。从GenBank下载普通烟草EST序列共计317 175条,用CAP3软件对序列进行拼接。设定SNP位点的冗余度大于2,采用AutoSNP软件检测cSNP。结合位点所在序列的文库和品种信息以及多个SNP位点的共分离分值来评价其可信度。结果表明,317 175条普通烟草EST拼接成重叠群中15 429个重叠群至少包含4个读长,鉴定出53 477个冗余度大于2的候选SNP,烟草中出现SNP的频率为0.34%。其中SNP的转换率大于颠换,插入/删除表现出A/T偏好。这些高质量SNP标记的发掘为开展烟草基因功能研究和分子育种奠定了良好的基础。 龚达平 王鲁 李凤霞 王卫锋 刘贯山 孙玉合关键词:单核苷酸多态性 单体型 烟草 MADS-box基因控制植物成花的分子机理 被引量:29 2010年 植物花器官的发育和开花是植物生殖发育中最重要的过程,植物在长期的进化过程中产生了春化(低温)途径、自主途径、光周期途径以及不依赖于光温环境条件的赤霉素信号途径来适应多变的环境和调控植物开花过程。本文综述了模式植物拟南芥中由LEAFY(LFY)、CONSTANS(CO)、FLOWERING LOCUSC(FLC)、FLOW ERING LOCUS T(FT)和SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1(SOC1)等基因构成的双子叶植物响应光温条件变化的开花调控网络;以及大麦、小麦中由VERNALIZATION1(VRN1)、VRN2、ODD-SOC2(OS2)和拟南芥CO、FT同源基因构成的禾本科植物开花调控网络。其中最重要的是转录调控因子MADS-box基因FLC、SOC1、VRN1和OS2,并发现组蛋白的乙酰化/脱乙酰化,赖氨酸的甲基化/脱甲基化在调控FLC、VRN1染色质活性状态及基因表达,从而产生开花控制的机理。这些研究发现将有助于对具有重要经济价值的单双子叶植物,通过生物技术手段改良其品种特性以应对非生物逆境,特别是低温胁迫的指导。 李元元 王鲁 苏振刚 王元英关键词:MADS-BOX 转录因子 转录调节 开花时间 绒毛状烟草钙依赖蛋白激酶基因家族分析 被引量:8 2012年 钙依赖蛋白激酶(CDPK)是一个多基因家族,在植物的钙信号转导中具有重要作用。以拟南芥、普通烟草和烟草属其他种中已知的CDPK序列检索绒毛状烟草基因组框架图数据库,获得绒毛状烟草CDPK基因,并对其进行基因结构、GC含量、系统进化关系、主坐标和基因表达谱分析。结果表明:共分离获得25个绒毛状烟草CDPK基因,它们均具有完整的开放读码框;系统进化树和主坐标分析证实这25个CDPK分布于4个亚家族中;RT-PCR分析显示,绒毛状烟草CDPK基因家族的空间表达存在明显的差异性。此为进一步阐明CDPK基因家族在烟草的钙信号转导过程中的功能及分子机制奠定了重要基础。 张丽 张磊 康乐 王军伟 王鲁 龚达平 刘贯山关键词:烟草 进化树 基因表达 烟草抗病毒相关R基因RNAi表达载体的构建 被引量:1 2012年 RNA干扰介导的基因沉默是植物抗病育种和大规模分析功能基因快速而有效的方法。构建烟草抗病毒病相关R基因的RNAi表达载体并导入烟草可获得抗病毒病烟草材料,并为大规模分析鉴定烟草功能基因提供新方法。本研究利用绒毛状烟草基因组测序获得的R基因序列设计引物,通过PCR技术扩增出带有特异性结合位点attB的R基因部分序列。采用GATEWAY方法将目的基因的干扰片段插入到表达载体pH 7 GWIWG2(I),成功构建了烟草抗病毒病相关R基因的RNAi表达载体。 杨帆 李凤霞 孙玉合 王鲁 杨爱国 苏振刚 李元元 赵百英 刘慧 王元英关键词:烟草 病毒病 RNAI GATEWAY技术