熊青青 作品数:10 被引量:29 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 全球变化研究国家重大科学研究计划 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 化学工程 生物学 更多>>
圆二色谱研究胶原模拟多肽三螺旋结构及其热稳定性 被引量:15 2014年 胶原是广泛研究和应用的生物材料,具有独特的三螺旋结构,此结构与其生物学性能密切相关。以胶原模拟多肽(collagen mimetic peptide,CMP)作为胶原的模型分子,通过圆二色谱研究了CMP的三螺旋结构、热稳定性等随序列或长度的改变所发生的规律性变化。根据形成胶原三螺旋结构的重复序列(POG)_n及胶原上α_2β_1整合素识别位点序列GFOGER设计五种不同序列或长度的CMP,采用圆二色谱表征了CMP的三螺旋结构,并通过检测CMP的程序升温变性和程序降温复性过程中圆二色谱的变化,研究了CMP三螺旋结构的热变性过程、解链温度以及复性过程。实验结果显示,五种CMP室温下均以三螺旋结构的形式存在,CMP三螺旋结构的热稳定性随POG的个数增加而增强;不同于胶原,CMP三螺旋结构的热变性是可逆的,升温过程中三螺旋解聚(变性),降温过程又可重新组装(复性),复性过程有明显的'磁滞'现象。研究结果可为进一步研究胶原与CMP分子特征性的三螺旋结构形成规律以及基于CMP的人工类胶原生物材料的研究提供依据。 张之宝 王静洁 陈晖娟 熊青青 刘玲蓉 张其清关键词:热稳定性 MIMETIC 线-梳型阳离子聚合物刷作为药物/基因双重载体的研究 基因治疗的成功主要依赖于使用安全有效的基因载体,在基因载体中同时包封药物,使载体多功能化,可有效达到联合治疗的目的。本项目采用原子转移自由基聚合法制备一种全新的线-梳型阳离子聚合物分子刷,用于构建药物/基因双重载体。其梳... 张明明 沈伟 熊青青 陈文娟 张其清关键词:原子转移自由基聚合 文献传递 花样结构白蛋白缓释载体的制备及在豚鼠内耳跨膜给药的应用 2013年 目的制备花样结构白蛋白(flower—shaped bovine serum albumin,FBSA)微纳材料作为载体进行内耳跨圆窗膜给药研究,为临床寻找新的药物缓释载体奠定基础。方法应用改良的去溶剂法制备FBSA微纳材料,并用荧光显微镜、电子显微镜、粒径分析仪等对其进行系统的表征。通过体外药物释放实验、MTF法来评估其细胞相容性和细胞毒性。通过小动物活体成像观察FBSA在豚鼠听泡内的扩散及在圆窗膜上的附着。结果蛋白基微纳米材料为放射状花样结构,大小约为50~80μm。空白FBSA微纳材料的zeta电位是-16.2mV,其最高的载药量和包封率分别是21.4%和40.0%,具有缓释效果。通过L929细胞的毒性实验测试提示经热变性处理固定后的材料具有更低的毒性和更好的细胞相容性。小动物活体实验可见药物在内耳中扩散及在圆窗膜表面附着。结论成功构建FBSA微纳材料载体,在治疗内耳病的局部给药方面有着良好的应用前景。 于湛 于敏 周志敏 张之宝 杜博 张哲 熊青青关键词:牛血清白蛋白 缓释载体 圆窗膜 内耳 巯基化壳聚糖衍生物自组装纳米球的制备与表征 被引量:2 2014年 以N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)为催化剂,将制备的双羧基聚乙二醇(COOH-PEGCOOH)和部分巯基化聚乙烯亚胺(PEI-SHx)先后接枝于壳聚糖分子,得到巯基化壳聚糖衍生物(CS-PEGPEI)。利用傅立叶红外光谱仪(FT-IR)和核磁共振仪(1 H NMR)对其结构进行表征;通过透析法制备自聚集纳米粒,透射电子显微镜(TEM)和动态激光粒度分析仪(DLLS)分析测试自聚集纳米粒显示,自聚集纳米粒为球状纳米胶束,该纳米球有望成为纳米药物及基因的载体。 刘英杰 段瑞平 刘玲蓉 杜博 王静洁 熊青青 张其清关键词:壳聚糖 聚乙二醇 自组装 β--环糊精聚合物的合成、自组装及作为药物/基因载体的应用研究 环糊精(CD)具有独特的圆筒状疏水性内腔和亲水性外沿结构,其空腔对多种疏水性分子具有良好的包合性能。在药学领域,CD可通过主-客体相互作用包载多种疏水性药物,并提高药物的溶解性、稳定性及生物利用度等。环糊精聚合物(CDP... 熊青青关键词:环糊精聚合物 主-客体相互作用 自组装 药物载体 基因载体 文献传递 白蛋白纳米粒的制备及内耳跨膜给药的初步研究 被引量:3 2013年 目的 目前在临床上国内外尚无对内耳病局部用药的缓释剂,本研究旨在探讨能否将白蛋白纳米粒载体材料作为鼓室跨膜给药缓释剂.方法 采用去溶剂化法制备空白白蛋白纳米粒并进行系统表征和细胞毒性评价.为便于观察,选取一种红色荧光染料即罗丹明B(RhB)作为模型药物,以物理吸附方式与空白白蛋白纳米粒结合形成载药白蛋白纳米粒,测定其载药量、包封率及体外药物释放曲线,同时采用小动物活体成像技术观察其注入豚鼠听泡内跨圆窗膜转运扩散情况.结果 制备的白蛋白纳米粒为实心球形,表面光滑,平均粒径大小为476 nm,Zeta电位为15.4 mV.体外药物释放结果表明,该纳米粒具有缓释效果.经戊二醛交联固定的白蛋白纳米粒具有一定的细胞毒性;而经热变性处理的白蛋白纳米粒具有较好的细胞相容性.小动物活体成像实验可以看到RhB在听泡内滞留扩散,而后经解剖观察,证明白蛋白纳米粒可在圆窗膜表面附着并穿越圆窗膜实现跨膜向耳蜗内转运.结论 制备的白蛋白纳米粒结构完整,制备方法简单、无毒性,可以很好地包载药物并具有缓释功能,为进一步制备可注射跨圆窗膜定向缓释纳米凝胶奠定了坚实的基础. 于湛 于敏 周志敏 张之宝 杜博 张哲 熊青青 孙建军关键词:牛血清白蛋白 纳米粒 缓释载体 圆窗膜 内耳 GPS2的表达纯化以及抗体的产生 2012年 目的 旨在克隆表达纯化GPS2蛋白,并制备抗血清用于研究GPS2的功能.方法 用RTPCR得到GPS2基因,并克隆到pET-28a原核表达载体,用Ni2+-NTA树脂纯化GPS2后,免疫兔得到抗血清.结果成功构建了pET-28a-GPS2原核表达质粒,并实现重组蛋白在大肠杆菌中的高效表达,Ni2+-NTA树脂亲和层析纯化了GPS2蛋白,经过透析复性后得到质量浓度约为300μg/ml的GPS2纯化蛋白;制备了GPS2蛋白的特异性多克隆抗血清,ELISA测定抗血清效价远远高于1:12 800,Western Blot表明该抗血清能够特异性识别结合GPS2蛋白.结论 GPS2在E.coli高效表达,其纯化产物可用于制备抗血清,用于GPS2的功能分析. 蒋丽琴 李学敏 刘玲蓉 熊青青 张其清关键词:克隆 纯化 乳酸基聚合物非球形载药微粒与缓释制剂及其制备方法 本发明涉及一种乳酸基聚合物非球形载药微粒与缓释制剂及其制备方法。通过小分子物质辅助的乳液-溶剂挥发法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)非球形微粒。以PLGA为原料,包载疏水性药物:全反式维甲酸、紫杉醇、表阿霉素、喜树... 张其清 李瑞丰 周志敏 熊青青生物素化壳聚糖修饰的PLGA纳米粒的制备及表征 被引量:8 2010年 合成了生物素化壳聚糖(Bio-CS),并通过核磁共振(1HNMR)及电感耦合等离子体光质谱法(ICP-MS)对其进行结构确证.采用溶剂挥发法(W1/O/W2)制备聚乳酸-羟基乙醇酸(PLGA)纳米粒,并通过共价交联法对纳米粒进行Bio-CS表面修饰.未修饰的PLGA纳米粒在扫描电镜下观察呈规则球状形态,平均粒径为(248.4±21.0)nm,Zeta电势为-(21.21±2.13)mV,Bio-CS修饰后的PLGA纳米粒保持球状形态,平均粒径为(268.3±23.4)nm,Zeta电势为(25.45±2.59)mV.采用X射线光电子能谱(XPS)以及试剂盒对纳米粒表面生物素进行定性及定量研究,结果显示,经过Bio-CS修饰后的纳米粒表面含有N,S元素,生物素取代度为31%的Bio-CS修饰的PLGA纳米粒,其表面生物素含量为(1.36±0.34)μmol/100mg纳米粒. 陈红丽 唐红波 杨文智 陈汉 王银松 梅林 张彤 熊青青 张其清关键词:纳米粒 抗肿瘤 乳酸基聚合物非球形载药微粒与缓释制剂及其制备方法 本发明涉及一种乳酸基聚合物非球形载药微粒与缓释制剂及其制备方法。通过小分子物质辅助的乳液-溶剂挥发法制备聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)非球形微粒。以PLGA为原料,包载疏水性药物:全反式维甲酸、紫杉醇、表阿霉素、喜树... 张其清 李瑞丰 周志敏 熊青青文献传递