温建新
- 作品数：215 被引量：433H指数：11
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家高技术研究发展计划现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 含CpG序列PRRSV ORF5基因真核表达质粒在小鼠的细胞免疫应答被引量：1
- 2009年
- 为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因免疫的效果,构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。经酶切鉴定和序列测定,将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠,检测鼠的脾T淋巴细胞亚群数量(CD4+和CD8+)以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平。结果表明本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的细胞免疫。
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因细胞免疫应答
- 含CpG序列PRRSV SD2 E基因真核表达载体质粒构建及表达被引量：1
- 2008年
- 为了提高猪生殖与呼吸综合征病毒山东株(PRRSV SD2株)基因免疫的效果,将PRRSV SD2 E基因插入哺乳动物表达载体PVAX1中,构建出PVAX1-E质粒。再将已筛选出的CpG-ODN序列通过在其两端的粘性酶切末端定向插入含PVAX 1-E的真核表达载体,构建含CpG基因序列真核重组表达质粒CpG-pVAX 1-E。将重组质粒转染COS-7细胞,经RT-PCR检测E基因mRNA的转录和间接免疫荧光试验(IFA)证实:CpG-pVAX 1-E可表达PRRSV GP5蛋白。试验结果为进一步研究PRRSV SD2 ORF5动物免疫反应奠定基础。
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝
- 关键词：E基因真核表达载体
- PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV复合PCR的应用研究被引量：13
- 2008年
- 采用建立的PCV2-PPV-PRV-PRRSV-CSFV复合PCR检测方法,对山东省不同地区送检的32份临床疑似病料进行PCR检测。结果表明:32份样品中,PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV感染的阳性率分别为25.00%、0%、34.38%、71.88%和3.13%;共检出25份阳性病料,阳性率为78.13%,其中PRV-PRRSV双重感染的比例为31.25%,PCV2-PRV-PRRSV三种病原体混合感染的比例为25.00%;用单项PCR检测作对照,结果两者符合率为100%,表明该复合PCR检测方法具有较高的敏感性,可以作为临床上猪圆环病毒2型感染、猪细小病毒病、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟的病原学快速诊断方法。
- 李维华任慧英刘文华邹玲温建新李海忠
- 关键词：猪细小病毒猪伪狂犬病毒复合PCR
- CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞免疫刺激作用的初步研究被引量：1
- 2007年
- 为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN),设计了9种未甲基化CpG-ODN不同序列,通过人工合成,分别作用于猪外周血淋巴细胞和脾细胞,进行健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力,通过测得的OD490值,计算出淋巴细胞增殖指数(SI),筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示:9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激效果,其中CpG-ODN6、CpG-ODN7刺激强度极显著。为研制DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定基础。
- 温建新李俊周顺任慧英牛钟相王金宝
- 关键词：免疫刺激作用MTT
- 胶东地区肉鸡致病性大肠杆菌的分离及血清型鉴定被引量：4
- 2012年
- 鸡大肠杆菌病是一种大肠杆菌的某些血清型引起的禽类的急性、慢性细菌传染病。笔者对采自胶东地区的禽病门诊、肉鸡养殖场及各地畜牧兽医站的疑似大肠杆菌病病例进行了细菌的分离、血清型鉴定，现报道如下．
- 邹玲任慧英温建新刘文华夏新智
- 关键词：鸡致病性大肠杆菌血清型鉴定肉鸡鸡大肠杆菌病畜牧兽医站
- 马传染性贫血强/弱毒嵌合病毒的体外构建
- 马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)引起马传染性贫血(简称马传贫),导致马持续性感染和反复病毒血症.为了探讨LTR在EIAV病毒复制和转录过程中的作用,并进一步研究E...
- 涂亚斌王柳仇华吉温建新谷守林童光志
- 关键词：嵌合病毒体外构建马传染性贫血病毒分子克隆
- 文献传递
- RT-PCR技术检测猪流感病毒被引量：4
- 2008年
- 根据猪流感病毒(SIV)的M基因的序列,设计合成了1对引物,建立了检测猪流感的RT-PCR方法。应用该方法对H1、H3、H9亚型的猪流感病毒进行基因扩增,均获得了分子量为460bp的特异性目的片段,而对PRRSV、PCV2、PRV、CSFV进行同条件检测,结果均为阴性;SIV扩增产物测序结果与SIV其他毒株序列同源性达99%-100%。敏感性试验表明,该方法可检测到103 EID50的SIV;可直接从猪流感病毒感染小鼠的组织样品中检测到病毒。
- 吕翠马小明尹燕博温建新单虎
- 关键词：猪流感病毒RT-PCR
- PCR及核酸探针检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因的研究被引量：1
- 2008年
- 为了解耐甲氧西林葡萄球菌在畜禽间的存在情况,试验建立针对mecA基因的PCR方法及地高辛标记核酸探针技术,分别用两种方法对75株葡萄球菌分离株进行检测。结果显示,经PCR方法检出42株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的56.0%;经核酸探针方法检出47株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的62.7%,两种方法的总符合率为93.3%。通过研究证实,在畜禽的体表及体内能够分离到耐甲氧西林葡萄球菌,且有较高的分离率,应该引起兽医工作者的足够重视。
- 杜沂平邹玲刘文华温建新任慧英
- 关键词：耐甲氧西林葡萄球菌MECA基因PCR核酸探针
- 不同序列的CpG-ODN对猪体外免疫细胞免疫刺激作用的研究
- 为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN),人工设计合成了9种未甲基化CpG-ODN不同序列,分别作用于健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞,进行体外转化试验.用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检...
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝
- 关键词：寡聚脱氧核苷酸MTT免疫佐剂
- 文献传递
- 基于双语网络教学平台的兽医微生物学课程教学改革被引量：1
- 2016年
- 兽医微生物学的双语教学是培养高水平兽医人才的必然要求。青岛农业大学通过与瑞典农业大学的合作,对兽医微生物学双语教学改革展开研究。笔者主张课前开展问卷调查并选择合适的教材,完善和补充网络课程,制作双语教学课件。探讨了教学方法的改革和课后总结的方法,以期为进一步开展兽医微生物学的双语教学提供思路。
- 李桂梅刘文华温建新邹玲任慧英
- 关键词：兽医微生物学双语教学网络教学平台
