李旭妮
- 作品数：75 被引量：147H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项北京市科技新星计划北京市农业科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌表达腐败梭菌α毒素及其产物的生物学特性鉴定
- 2018年
- 为了制备大肠杆菌源的重组腐败梭菌α毒素并对其生物学特性鉴定。利用PCR扩增α毒素基因,构建重组表达质粒pET32a-csa,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,对产物的反应原性、溶血活性、细胞毒性、小鼠致死毒性、毒力和毒性中和等生物学特性鉴定。结果显示,重组α毒素主要表达形式为包涵体,产物能够与腐败梭菌抗毒素血清反应,不能使绵羊红细胞发生溶血,具有细胞毒性和小鼠致死毒性,毒力超过300 MLD/mL,而且这种毒性可以被抗毒素中和。结果表明,通过大肠杆菌原核表达可以制备具有一定生物活性的重组腐败梭菌α毒素。
- 彭国瑞彭小兵李旭妮董令赢蒋玉文
- 关键词：大肠杆菌腐败梭菌Α毒素生物活性
- 一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白
- 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和产气荚膜梭菌β毒素重组融合蛋白。本发明系采用经过密码子优化、破伤风梭菌毒素C片段与含有多个氨基酸突变的产气荚膜梭菌β毒素突变体的重组融合蛋白，即最大限度地保留两种毒素蛋白的免疫原性，又避免...
- 杜吉革刘莹王磊陈小云李旭妮李启红朱真薛麒张莹辉姚文生印春生
- 文献传递
- 布氏菌病活疫苗活菌计数项目能力验证结果分析被引量：5
- 2016年
- 为了解全国布氏菌病活疫苗生产企业活菌计数能力,2015年对该项目进行了能力验证分析,每名参比企业发放布氏菌活疫苗(S2株)样品3份,要求在规定时间内对其进行活菌计数并提交结果报告。结果显示,参比的17家企业中,15家结果"满意",2家企业结果"不满意",表明全国大部分布氏菌病活疫苗生产企业具备可信任的布氏菌病活疫苗活菌计数检测能力。
- 王楠李旭妮于晓辉徐磊张媛刘博李建毛开荣蒋玉文
- 关键词：活菌计数
- 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒，包括三对引物，即与猪繁殖与呼吸综合征病毒Gen Bank Accession NumberU87392中MN基因结合的内侧引物对、外侧引物对和...
- 吴文学张跃伟李旭妮李佳禾
- 文献传递
- 安徽省白羽肉鸡中副鸡禽杆菌的分离鉴定及流行病学分析
- 2020年
- 通过病原分离对安徽省多家白羽肉鸡养殖场持续出现疑似鸡传染性鼻炎的鸡群进行确诊,从不同批次发生鸡传染性鼻炎疑似症状的鸡体内分离细菌,经细菌分离、纯化、回鸡试验,共分离到8株细菌,经形态及培养特性、生化试验、血清学特性、16S rRNA基因序列分析等方法对分离的细菌进行鉴定。结果表明,所分离的细菌有1株为A型副鸡禽杆菌,7株为B型副鸡禽杆菌,在安徽省持续引起幼龄肉鸡发生鸡传染性鼻炎的流行中B型副鸡禽杆菌是主要流行毒株。
- 王秀丽于永于雷辛凌翔张媛李俊平李旭妮
- 关键词：副鸡禽杆菌传染性鼻炎
- C型产气荚膜梭菌类毒素在家兔和绵羊上抗原含量与免疫效果关系的研究被引量：2
- 2016年
- 为了确定C型产气荚膜梭菌类毒素抗原含量与免疫效果之间的关系,试验以不同剂量的类毒素分别接种家兔和绵羊,免疫18 d后测定血清中和效价,并用1个最小致死量(MLD)的毒素进行攻毒。结果表明:1个家兔MLD的毒素含量为小鼠MLD的20倍,1个绵羊MLD的毒素含量为小鼠MLD的450倍;类毒素含量与免疫效果在一定范围内呈正相关,在家兔和绵羊上能提供保护的最小免疫剂量分别为400个小鼠MLD和500个小鼠MLD的类毒素。
- 彭小兵余洪磊李旭妮蒋玉文陈宏张爱民罗显绎赵海源郑明举沈方
- 关键词：C型产气荚膜梭菌类毒素免疫效果抗原含量毒力绵羊
- B型副鸡禽杆菌田间分离株的毒力及免疫原性研究被引量：4
- 2022年
- 为探索分离自安徽省某大型白羽鸡场的1株B型副鸡禽杆菌的毒力及免疫原性,本试验测定了该菌对5~6胚龄SPF鸡胚及35~40日龄SPF鸡的毒力,并用该菌株制备免疫原,免疫35~40日龄SPF鸡,用攻毒的方法测定菌株的免疫原性,同时对本菌株制备的抗原及目前国内、国外市场上销售的鸡传染性鼻炎A型、B型、C型三价或二价灭活疫苗的免疫效力进行比较。毒力试验结果显示,本菌株对SPF鸡胚的最小致死剂量为110 CFU,对SPF鸡的最小发病剂量为5.5×10^(3) CFU。免疫原性试验结果显示,本菌株制备的抗原免疫鸡能有效抵抗本菌株的攻击,说明本菌株的免疫原性良好,而市场上销售的鸡传染性鼻炎三价/二价灭活疫苗免疫鸡均无法抵抗本菌株的攻击,说明市场上销售的疫苗对本菌株的保护效果较差,B型菌疫苗间的交叉保护效果不理想。本试验为B型鸡传染性鼻炎疫苗的研究提供参考和物质基础。
- 王秀丽于永于雷李旭妮蒋玉文辛凌翔张媛李俊平
- 关键词：副鸡禽杆菌毒力免疫原性疫苗
- 产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆、表达及其抗血清的制备被引量：2
- 2015年
- 本试验通过设计并合成1对引物,PCR扩增B型产气荚膜梭菌C58-2株α毒素完整成熟肽序列,并将其插入到pGEM-T Easy载体中,构建克隆载体pGEM-T-α。对克隆载体pGEM-T-α进行EcoRⅠ和HindⅢ的双酶切,将得到的1 125bp片段以正确的阅读框架定向克隆于pET-28a(+)中,然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plys宿主菌中,37℃、1.0 mmol/L IPTG诱导该片段获得良好表达。经SDS-PAGE分析,其表达的蛋白约为46.1ku,与预期大小一致。Western blotting结果显示,该重组α毒素蛋白可被A型产气荚膜梭菌定型血清识别,表明该重组α毒素蛋白具备与天然毒素相似的反应原性。重组α毒素蛋白在菌液上清、超声波裂解上清和超声波裂解沉淀中均有分布,且以包涵体表达为主,表明重组α毒素蛋白可同时在胞外、周质和胞浆表达。小鼠毒力试验结果表明,重组α毒素蛋白不具有毒性。毒素—抗毒素中和试验结果表明,该抗血清具有α毒素特异性。以重组α毒素蛋白作为抗原免疫家兔制备血清,效价测定结果表明每1mL重组α毒素蛋白抗血清可以中和100MLD的A型毒素。
- 彭小兵田冬青李旭妮彭国瑞王猛蒋玉文
- 关键词：产气荚膜梭菌Α毒素克隆表达抗血清
- 一种串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A及其应用
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A(surface protective antigen A，SpaA)及其应用。该串联优势表位的重组猪丹毒杆菌表面保护抗原A的氨基酸序列如SE...
- 李建张一帜张媛李俊平王秀丽刘元杰李旭妮王甲彭国瑞
- 一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白
- 本发明涉及一种无毒性破伤风毒素和诺维梭菌α毒素重组融合蛋白。本发明制备的重组融合蛋白，系采用经过密码子优化、破伤风毒素C片段与诺维梭菌α毒素的C末端以及N端的无毒性抗原表位的重组融合蛋白生产，即最大限度地保留两种毒素蛋白...
- 杜吉革刘莹张莹辉陈小云李旭妮李启红薛麒朱真王磊印春生姚文生
- 文献传递
