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软骨源性形态发生蛋白2基因转染自体成肌细胞表达软骨细胞表型的实验研究: 2012年; 目的研究软骨形态发生蛋白-2(CDMP-2)对小鼠成肌细胞向软骨分化的作用。方法体外培养小鼠成肌细胞,贴壁细胞传代,取第3代细胞,对照组(A组)以无血清L-DMEM培养液培养,实验组(B、C、D组)以无血清L-DMEM培养液培养,分别加入透明质酸钠、CDMP-2(100ng/mL)和CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞,14d后终止培养,倒置相差显微镜观察细胞形态,甲苯胺蓝染色糖胺聚糖(GAG),行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、灰度值分析和Western blot检测。结果培养14d后转染组和诱导组可见成肌细胞形态由梭形向软骨细胞的多边形转变。甲苯胺蓝染色示糖胺聚糖(GAGs)均匀分布于基质中,免疫组织化学染色和Western blot示实验组Ⅱ型胶原表达阳性,且CDMP-2基因转染组细胞表达Ⅱ型胶原水平高于单独给予CDMP-2,且具有统计学意义;对照组和透明质酸钠组未见阳性表达。结论 CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞能够更好的表达软骨特异性Ⅱ型胶原。; 徐文进王伟王毅李宇段大波; 关键词：成肌细胞软骨分化

RNA干扰沉默BAX基因抑制大鼠软骨细胞凋亡及其可能机制被引量：2: 2012年; 目的研究RNA干扰沉默BAX基因表达对经线粒体途径大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法体外分离培养SD大鼠软骨细胞;BAX siRNA干扰沉默BAX基因表达。RT-PCR检测BAX mRNA;MTT法检测细胞活力;AnnexinV-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率;Western blot检测BAX、BCL-2、细胞色素C蛋白的表达。结果 BAX siRNA干扰24 h后,BAX mRNA表达为1.030±0.153,对照组为1.836±0.164;蛋白质的表达为0.359±0.089,对照组为0.766±0.082,实验组较对照组明显下调(P<0.01)。细胞凋亡受到明显抑制,对照组、model组、model+BAXsiRNA组和model+control siRNA组细胞凋亡率分别为2.87%、20.07%、9.21%和21.19%,并且在BAX基因沉默的细胞中,细胞色素C蛋白表达水平降低,同时BCL-2蛋白表达水平升高。结论 RNA干扰沉默BAX基因可抑制大鼠软骨细胞凋亡并且促进其存活,其机制可能与线粒体途径相关。; 李宇王伟王伟张力段大波王毅; 关键词：BAX基因 RNA干扰软骨细胞凋亡

转染CDMP-2基因的成肌细胞与PLGA材料的相容性: 2012年; 目的探讨转染软骨源性形态发生蛋白2基因的成肌细胞与PLGA(聚乳酸/乙醇酸共聚物)材料的相容性。方法将转染CDMP-2基因的成肌细胞接种于PLGA支架,以成肌细胞与PLGA支架培养组为对照。采用MTT法检测成肌细胞在支架上的生长情况,并绘制生长曲线。结果与结论各组吸光度值差异无显著性意义(P>0.05)。转染CDMP-2基因的成肌细胞可以在PLGA材料上良好的生长,为后续研究成肌细胞修复软骨损伤打下了良好的基础。; 王毅王伟徐文进李宇段大波; 关键词：聚乳酸-羟基乙酸成肌细胞相容性

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李宇