曾令勇 作品数:45 被引量:130 H指数:7 供职机构: 绵阳市第三人民医院 更多>> 发文基金: 四川省卫生厅科研基金 四川省科技厅科技支撑计划项目 四川省科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
构建含肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因慢病毒载体 2014年 背景:腺病毒的表达时间有限,会限制目的基因的表达时间和表达量,不利于实验的持续进行,故文章选择慢病毒作为载体,与目的基因大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因片段进行基因重组。目的:探讨构建含有大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因慢病毒载体的方法。方法:根据GenBank中大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体序列(NM 145681.1),设计出该基因的特异性引物Trail-AgeⅠ-F和Trail-AgeⅠ-R,用PCR法从大鼠cDNA文库中扩增出目的基因,AgeⅠ酶切将该基因克隆入真核表达载体GV218中,产生目的重组质粒,用脂质体Lipofeetamine 2000包裹构建的重组质粒和辅助包装载体,3个质粒共同转染293T细胞,产生含有表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白的慢病毒颗粒,收集病毒进行滴度鉴定,收集细胞提取蛋白进行基因表达情况的检测。结果与结论:筛选出的克隆阳性菌测序获得肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因,全长861 bp,与GenBank中发表的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体核苷酸序列完全一致。包装后的病毒LV-mTrail在转染2 d后收集病毒液,经PCR和Western blot方法鉴定,从基因和蛋白的层面均证实携带有目的基因肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因。孔稀释法及实时荧光定量PCR病毒滴度测定法测定结果为2×109 TU/mL。提示大肠杆菌同源重组法能有效和方便地构建出含有肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒载体。 张海 蒋正方 刘阳 张波 吴贵强 曾令勇关键词:肿瘤坏死因子 慢病毒载体 WESTERN BLOT 湖北汉族人群TRIB1基因TagSNP(rs2235109)位点多态性分布特征及其与冠心病的关联性分析 被引量:2 2010年 目的研究TRIB1基因内含子区rs2235109多态性与冠心病的关系及其在湖北省汉族人群中的分布特征,并比较其基因型和等位基因在正常人和冠心病人群中的分布情况。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)方法对湖北地区152名健康汉族人和42名冠心病患者的TRIB1基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)进行分析。结果上述多态性位点在冠心病和正常人群中的分布无统计学差异,但具有中等多态信息量,几乎达到其PIC的理论最大值。结论 rs2235109 SNP的变异与冠心病人群无相关性,但该位点与其它SNP构成单倍型联用可作为一个理想的遗传标记。 钱冉 曾令勇 黎荣关键词:单核苷酸多态性 冠心病 胺碘酮治疗阵发性和持续性房颤的复律疗效和不良反应分析(附60例报告) 被引量:3 2010年 曾令勇 钱冉 钱月楼关键词:阵发性房颤 口服胺碘酮 房颤复律 持续性房颤 疗效 照明吸管下手术治疗高血压性脑出血 2008年 目的探讨照明吸管辅助下微创手术治疗高血压性脑出血的效果。方法对102例高血压性脑出血患者于发病后24h内行照明吸管辅助下微骨窗人颅血肿清除术。结果术后24h复查脑CT示血肿全部清除51例,血肿大部清除(〉90%)41例,血肿50%-70%清除10例。术后6月ADL疗效评价手术效果满意。结论照明吸管辅助下微骨窗手术可提高血肿的清除率及精确度,能够提高患者生存质量,为高血压性脑出血微创手术提供了新的选择工具。 曾令勇 张海 徐剑锋 蒋正方 吴贵强 刘阳关键词:颅内出血 高血压性 微创手术 外伤性脑出血患者术后病原菌感染对神经生长因子及抑瘤素M水平的影响研究 被引量:8 2016年 目的分析外伤性脑出血患者术后感染病原菌分布,并探讨感染后患者血清中神经生长因子和抑瘤素M水平的变化,为临床治疗提供参考依据。方法对2011年2月-2014年7月诊治的160例外伤性脑出血感染患者设为感染组,分析患者感染后血清中神经生长因子和抑瘤素M水平的变化,同期选取健康体检者160名为对照组,外伤性脑出血未感染患者160例为未感染组,对比3组抑瘤素M变化,数据采用SPSS 20.0软件进行统计分析。结果 160例感染患者主要感染部位以呼吸道感染为主,共33例占20.63%;共分离病原菌160株,以革兰阴性菌为主,共83株占51.88%;感染病原菌后患者神经生长因子、表皮生长因子、转化生长因子及抑瘤素M水平明显降低,且与对照组和未感染组患者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外伤性脑出血患者术后容易感染,且感染后患者血清中神经生长因子及抑瘤素M水平明显降低。 徐剑峰 曾令勇 刘阳 吴贵强 张海 杨华东 高阳 邓李 张波 张鹏 曹辉关键词:脑出血 病原菌 神经生长因子 抑瘤素M 炎症因子 葡萄糖转运蛋白3在胶质瘤中的表达与意义 2009年 目的:探讨葡萄糖转运蛋白3(glucose trans porterproteins,GLUT3)在胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:用免疫组化Envision法检测80例胶质瘤GLUT3的表达。结果:①在胶质瘤中,GLUT3在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级的阳性率分别为35%,60%,80%,100%,在对照组中无表达,各组间有显著差异(χ2=37.19,P<0.01);②各级胶质瘤,表达强度随胶质瘤病理级别增加而增加(r=0.6906,P<0.0001);③GLUT3表达分别与患者年龄(χ2=1.05,P>0.05)、性别(χ2=0.15,P>0.05)、肿瘤大小(χ2=0.30,P>0.05)、部位无关(χ2=0.74,P>0.05)。结论:GLUT3在胶质瘤中的表达强度分别与肿瘤的病理级别呈正相关,可以作为判断胶质瘤生物学行为、预测病人预后的重要指标。 刘阳 张苓 曾令勇 杨华东 张海 徐剑峰 高阳 吴贵强 蒋正方 杨福兵关键词:胶质瘤 葡萄糖转运蛋白3 免疫组织化学 神经介入术后股动脉压迫止血器使用方法的改良 被引量:2 2012年 目的:对NZ-1型动脉压迫止血器使用方法进行改良并总结。方法:回顾分析笔者所在医院2010年1月-2011年12月期间83例改良使用NZ-1型动脉压迫止血器的患者临床资料,全部为经股动脉穿刺置鞘,其中行全脑血管造影患者68例,神经介入治疗患者15例。总结使用方法,分析相关并发症。结果:所有患者安置顺利,1例患者安置过程中一过性不适,安置术后7例患者发生并发症,无严重并发症发生。结论:通过对NZ-1型动脉压迫止血器使用方法的改良,避免了严重并发症的发生,缩短了压迫时间,减轻患者的不适程度,提高了医疗安全性。 徐剑峰 曾令勇 蒋正方 刘阳 吴贵强 田义 李俊关键词:介入 动脉压迫止血器 48例原发性胆汁性肝硬化临床分析 被引量:7 2009年 目的:分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床表现,试验室检查及治疗情况。方法:回顾性分析48例PBC患者临床资料。结果:93.8%是中年女性患者,平均年龄53.2±8.73。主要的临床表现包括肝功能异常(ALT、GGT、AKP升高)95.8%,乏力纳差83.3%,黄疸79.2%,瘙痒66.6%,肝肿大62.5%,脾大58.3%等。常合并干燥综合征(25%),类风湿关节炎(16.7%)等自身免疫性疾病及结缔组织疾病。所以患者AMA及AMA-M2均为阳性。全部病例使用熊去氧胆酸治疗,但仅31.3%患者病情有不同程度好转。结论:加强对PBC的认识,重视对AMA或AMA-M2的检测,尤其对长期不明原因肝功能异常的女性患者。 曾令勇 何志兵 袁晓玲关键词:原发性胆汁性肝硬化 抗线粒体抗体 高血压脑出血微创手术疗效分析 被引量:15 2013年 目的分析高血压脑出血患者采用微创手术治疗的临床疗效。方法将508例高血压脑出血患者随机分为微创组和传统开颅手术组,采用Kamafsky评分对患者的预后及治疗效果进行评价。结果微创组死亡3例,病死率1.18%;传统组死亡21例,病死率8.27%;微创组病死率明显低于传统组(P<0.05)。微创组术后1个月、3个月Kamafsky评分均显著高于传统组(P<0.05)。结论微创手术治疗较传统术式具有明显的优势,在降低病死率,改善预后方面效果明显。 吴贵强 刘阳 曾令勇关键词:高血压脑出血 微创手术 疗效 脑胶质瘤术后行同步放化疗临床效果观察 被引量:1 2014年 目的探讨脑胶质瘤患者术后进行同步放化疗的临床效果。方法选取脑胶质瘤患者89例,随机分为2组,其中对照组43例,观察组46例。对照组患者术后仅给予放射治疗;观察组在对照组基础上同时给予化疗。对比2组患者治疗效果、不良反应和生存率。结果观察组患者治疗效果达完全缓解47.8%和有效89.13%,明显高于对照组27.91%和60.47%;观察组仅有2.17%治疗之后病情仍然进展,明显低于对照组25.58%,上述比较2组差异有统计学意义(P<0.05)。观察组分别有34.78%、10.87%和32.61%发生胃肠反应、脑水肿加重以及骨髓抑制等不良反应,与对照组25.58%、9.30%和39.53%相比差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者1a生存率为89.13%,与对照组为74.42%(P>0.05),观察组患者3a生存率为47.83%,明显高于对照组20.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑胶质瘤患者术后实施同步放化疗可改善患者的治疗效果,提高患者生存率,同时并不会加重患者的不良反应,是一种安全而有效的治疗手段。 张海 刘阳 曾令勇 吴贵强 张波关键词:胶质瘤 放疗 化疗