易佳丽 作品数:13 被引量:163 H指数:8 供职机构: 辽宁医药职业学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省教育厅资助项目 辽宁省教育厅科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
补中益气汤含药血清干扰A549/DDP生长作用的实验研究 被引量:9 2013年 目的从细胞水平探讨补中益气汤含药血清改善A549/DDP耐药作用并选择最佳含药血清的浓度。方法采用随机对照法将24只SD大鼠分为高、中、低剂量组和空白对照组,制备高、中、低剂量补中益气汤的含药血清,分别以5%和10%的浓度作用于人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP 48 h,观察补中益气汤含药血清对A549/DDP生长的影响并通过MTT法检测各组细胞的抑制率,以此筛选出最佳含药血清浓度,计算出最佳浓度含药血清对A59/DDP的耐药逆转倍数。结果补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞有明显抑制作用,且呈浓度依赖关系。5%高剂量组对A549/DDP的抑制率高于5%中剂量组和5%低剂量组,并与5%空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。10%各剂量组对A549/DDP的抑制率与10%空白血清组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。经筛选,10%中剂量含药血清作用48 h为最佳干扰浓度,在此浓度下,A549/DDP对顺铂的IC50明显下降(P<0.05),对A549/DDP细胞的逆转倍数为2.46。结论 10%中剂量含药血清干扰48 h可作为后期药物实验的含药血清加药浓度及观察时间筛选的实验依据,补中益气汤含药血清可逆转A549/DDP的耐顺铂作用。 易佳丽 刘春英关键词:A549 A549细胞株 耐药逆转 中医药疗法治疗乳腺增生研究进展 被引量:88 2014年 从中医对乳腺增生病的认识、病因、病机、治疗方法的研究概况进行综述,从病因病机、分型辨证论治和内治法、外治法等方面介绍近年来乳腺增生的病机研究与中医药治疗的研究进展,为中医药治疗乳腺增生及防治乳腺癌提供依据。 谷丽艳 易佳丽 樊延宏 张立德关键词:乳腺增生 乳癖 中医药疗法 补中益气汤对裸鼠肺腺癌移植瘤PI3K/AKT信号通路作用的研究 被引量:7 2013年 目的:探讨补中益气汤对裸鼠肺腺癌移植瘤生长抑制作用及对磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路的影响。方法:50只裸鼠随机分为①正常对照组,②荷瘤对照组,③顺铂组,④顺铂联合补中益气汤组,⑤补中益气汤组。分别给予相应干预后,处死小鼠,计算抑瘤率;应用免疫组化方法、实时定量PCR(real time PCR,RT-PCR)检测移植瘤组织中PI3K,AKT的表达水平。结果:顺铂联合补中益气汤组对移植瘤的抑制率最强,与其他各组比较有显著差异(P<0.05),顺铂和补中益气汤协同作用的q值1.201;移植瘤中PI3K,AKT蛋白和mRNA基因的表达在顺铂联合补中益气汤组显著降低(P<0.05)。结论:补中益气汤联合顺铂对耐顺铂肿瘤有协同抑制作用;补中益气汤能通过干预PI3K、AKT基因和蛋白的表达而增加顺铂对耐顺铂肿瘤的敏感性。 刘亚莉 唐莹 易佳丽 井欢 刘春英关键词:补中益气汤 肺腺癌 移植瘤 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,mTOR表达的影响 被引量:12 2017年 探讨补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR表达的影响。BALB/C裸鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组和补中益气汤高剂量+顺铂组(高联组)、补中益气汤中剂量+顺铂组(中联组)、补中益气汤低剂量+顺铂组(低联组),培养A549/DDP细胞(浓度为5×106个/m L),接种于各组,观察各组成瘤情况。给予相应治疗,14 d后取瘤组织固定、切片,免疫组织化学方法、Real-time PCR方法检测各组裸鼠移植瘤中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR蛋白和mRNA的表达水平。结果显示补中益气汤联合顺铂可降低移植瘤体积,中联组和高联组的抑瘤率与顺铂组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与荷瘤对照组比较,中联组和高联组Bad,NF-κB,Survivin,m TOR的蛋白和mRNA的表达明显减少(P<0.05),caspase-9的蛋白和mRNA在中联组和高联组的表达逐渐增多,与荷瘤对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Bad,NF-κB,caspase-9的mRNA,中联组和高联组与顺铂组、低联组、荷瘤对照组比较有统计学意义(P<0.05),低联组、顺铂组、荷瘤对照组两两比较,无统计学差异,各因子蛋白和mRNA的表达中联组和高联组比较,无统计学意义。结果表明补中益气汤与顺铂联合作用可抑制A549/DDP移植瘤的生长,补中益气汤抑制A549/DDP移植瘤的作用可能是通过调节Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR,促进细胞凋亡实现的。 刘亚莉 易佳丽 刘春英关键词:补中益气汤 A549/DDP 裸鼠 BAD CASPASE-9 SURVIVIN 补中益气汤含药血清干预A549/DDP细胞Bad、NF-κb、Caspase-9表达的实验研究 被引量:3 2017年 目的探讨补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞中Bad、NF-κb、caspase-9表达的影响。方法用MTT法筛选最佳浓度的含药血清。用免疫印迹法、real time PCR方法检测A549、A549/DDP细胞各组中Bad、NF-κb、Caspase-9蛋白和mRNA的表达水平。采用SPSS 16.0进行数据处理,P<0.05有统计学意义。结果中剂量含药血清培养48h为最佳浓度含药血清;A549/DDP对照组中Bad、NF-κb蛋白和基因的表达明显高于A549对照组(P<0.05),A549/DDP最佳含药血清组Bad、NF-κb的蛋白和基因表达减少,与A549/DDP对照血清组比较有统计学意义(P<0.05)。A549/DDP对照组中caspase-9蛋白和基因的表达明显低于A549对照组(P<0.05),A549/DDP最佳含药血清组caspase-9的蛋白和基因表达增加,与A549/DDP对照血清组比较有统计学意义(P<0.05)。结论补中益气汤含药血清抑制A549/DDP的作用可能是通过调节Bad、NF-κb、caspase-9蛋白、基因的表达,促进细胞凋亡实现的。 刘亚莉 易佳丽 刘春英关键词:补中益气汤 A549/DDP BAD NF-ΚB 补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞PI3K/AKT信号转导通路影响的实验研究 被引量:8 2014年 目的观察补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞A549/DDP的抑制作用,并探讨其对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白和mRNA表达的影响。方法以SD大鼠制备高、中、低剂量的补中益气汤含药血清和空白对照血清。MTT法筛选最佳含药血清组。培养细胞分为空白血清组、最佳含药血清组、LY294002组(阻滞剂组)、最佳含药血清+LY294002组(联合组)和阴性对照组。免疫细胞化学方法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测PI3K、p-AKT蛋白和mRNA的表达情况。结果随着含药血清浓度的升高,对顺铂的逆转倍数不断增加;中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间;最佳含药血清可使A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT蛋白表达减少,与空白血清组比较差异有统计学意义(P<0.05);补中益气汤诱导A549/DDP细胞PI3K、p-AKT mRNA表达显著减少,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与阻滞剂联合作用p-AKT mRNA下降更为明显。结论补中益气汤可通过降低A549/DDP细胞中PI3K、p-AKT mRNA的表达而影响PI3K/AKT信号转导通路,进而发挥对顺铂耐药的增敏作用。 刘亚莉 易佳丽 王莹 井欢 刘春英关键词:补中益气汤 磷脂酰肌醇3激酶 补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株裸鼠移植瘤作用及其机制的研究 被引量:6 2014年 目的探讨补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP裸鼠移植瘤的作用机制。方法 60只裸鼠随机分为6组,空白对照组给予生理盐水0.5ml灌胃,其余5组以5×106/L的A549/DDP接种于裸鼠皮下,待成瘤后,分别给予生理盐水0.5ml灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射同时生理盐水灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射顺铂和高、中、低剂量的补中益气汤灌胃。观察A549/DDP细胞在各组裸鼠的致瘤率,计算抑瘤率;采用免疫组化方法、RT-PCR(real time PCR)检测移植瘤组织中PI3K、AKT的表达水平。结果补中益气汤高、中、低剂量组能不同程度的抑制移植瘤的生长,其中以高、中剂量组最显著,与顺铂组抑瘤率比较有明显的统计学差异(P<0.05);移植瘤中PI3K、AKT蛋白表达和mRNA基因的表达在补中益气汤高、中、低剂量组中均有下降,高、中剂量组降低较多,与顺铂组和小剂量比较有统计学差异(P<0.05)。结论补中益气汤联合顺铂对肺腺癌移植瘤的增殖有明显的抑制作用,补中益气汤能通过调控PI3K、AKT基因和蛋白的表达而干预顺铂的耐药机制,这种干预作用具有一定的量效关系。 刘亚莉 唐莹 易佳丽 井欢 刘春英关键词:补中益气汤 肺腺癌 移植瘤 裸鼠 PI3K 补中益气汤含药血清对人肺腺癌A549/DDP细胞耐药作用的影响 被引量:9 2014年 目的:观察补中益气汤含药血清对人肺腺癌细胞株A549/DDP耐药作用的影响并探讨其机制。方法:采用血清药理学方法制备含药血清;用MTT比色法筛选出最佳含药血清;以最佳含药血清和不同浓度梯度的顺铂干预A549和A549/DDP细胞,MTT比色法计算2种细胞的IC50,同时计算A549/DDP耐药指数和逆转指数;将A549/DDP细胞分为对照血清组、最佳含药血清组、LY294002组、LY294002+最佳含药血清组(联合组)和阴性对照组,给予相应的处置因素后,培养48 h,采用免疫细胞化学方法、Western blotting和real-time PCR等方法检测各组中PI3K、Akt蛋白与mRNA的表达情况。结果:10%中剂量含药血清作用48 h为最佳含药血清及最佳作用时间。最佳含药血清与顺铂联合作用时,A549/DDP细胞对顺铂的敏感性明显增强,最佳含药血清的逆转指数约为2.46。最佳含药血清组和联合组的PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达水平均下降,与对照血清组比较差异有统计学意义(P<0.05)。LY294002组的PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达水平与对照血清组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补中益气汤通过减少PI3K的表达而降低A549/DDP细胞的耐药指数,增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,干预或调整A549/DDP细胞对顺铂的耐药作用。 刘亚莉 王莹 易佳丽 史妍婷 刘春英关键词:补中益气汤 含药血清 肺腺癌 AKT蛋白 补中益气汤含药血清逆转A549/DDP的顺铂耐药及对mTOR表达的影响 被引量:17 2013年 目的:研究补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)顺铂耐药的逆转作用及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达的影响。方法:动物随机分组,制备补中益气汤高、中、低剂量血清(给药剂量分别为11.34,5.67,2.83 g.kg-1.d-1),将A549,A549/DDP细胞体外分为顺铂(DDP)组,空白血清+DDP组,含药血清高剂量+DDP组,含药血清中剂量+DDP组,含药血清低剂量+DDP组,细胞对照组,经过15%各组血清联合DDP不同浓度(10,20,40,80,100,200μmol.L-1)作用48 h,采用MTT法检测补中益气汤不同浓度含药血清对A549/DDP顺铂耐药的逆转作用;采用免疫荧光,免疫细胞化学,Western-blot方法检测mTOR的表达。结果:与DDP组比较,补中益气汤不同浓度含药血清作用于A549/DDP后IC50和耐药倍数均有显著降低(P<0.05),以补中益气汤中剂量组(等临床剂量组)作用最为显著(P<0.01),A549/DDP中mTOR的染色吸光度及荧光强度均明显减弱(P<0.01),蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:补中益气汤能增强A549/DDP对顺铂的敏感性,并能通过降低细胞生存通路中mTOR的表达而有效逆转肺腺癌细胞的顺铂耐药。 史妍婷 井欢 王莹 易佳丽 刘春英关键词:补中益气汤 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 补中益气汤含药血清对A549/DDP中p-Akt和P-gp表达的影响 被引量:11 2013年 目的:研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)耐顺铂(DDP)作用及其对磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)和P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法:采用血清药理学方法制备含药血清,随机对照法将24只SD大鼠分为空白对照组(给生理盐水10 mL·kg-1),补中益气汤高、中、低剂量组(11.34,5.67,2.84 g·kg-1,10 mL·kg-1),每日ig给药1次,连续7 d后提取血清。将A549/DDP分为空白血清组,补中益气汤高、中、低剂量含药血清组,阻滞剂组,高剂量含药血清联合阻滞剂(LY294002)组,MTT法检测各组细胞对DDP的IC50,并计算耐药逆转倍数。免疫细胞化学法检测各组细胞中p-Akt和P-gp蛋白的表达;逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组细胞中Akt和P-gp的mRNA表达。结果:与空白血清组比较,补中益气汤中剂量以上的含药血清可明显降低A549/DDP对DDP的IC50(P<0.05),并呈浓度依赖效应,与阻滞剂联合效果最佳(P<0.05);与A549/DDP空白血清组相比,补中益气汤中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的p-Akt和P-gp的表达显著下降(P<0.01,P<0.05),其中以高剂量联合阻滞剂组下降最多(P<0.01);与A549/DDP空白血清组相比,中、高剂量含药血清组,阻滞剂组和高剂量联合阻滞剂组的P-gp的mRNA表达量都显著减少(P<0.01,P<0.05),中、高剂量含药血清组,高剂量联合阻滞剂组的p-Akt的mRNA表达量也显著减少(P<0.05)。结论:补中益气汤含药血清可逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药,与LY294002联合应用效果更佳,其逆转机制可能与减少细胞内p-Akt和P-gp的表达,增强A549/DDP对DDP的敏感性有关。 易佳丽 井欢 王莹 刘亚莉 刘春英关键词:A549 苏氨酸蛋白激酶 补中益气汤