庄羽美
- 作品数:18 被引量:37H指数:4
- 供职机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省社会发展科技计划苏州市科技发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 可溶性CD40酶联检测试剂盒的研制及其检测的临床意义被引量:4
- 2004年
- 目的 :建立灵敏、特异和稳定的人可溶性CD4 0 (sCD4 0 )酶标检测试剂盒及探讨其检测的临床意义。方法 :采用该室制备的鼠抗人CD4 0单抗 5C11作为包被抗体 ,另一株识别不同抗原位点的单抗 3G3经生物素 (biotin)标记后作为检测抗体 ,建立双单抗夹心的人sCD4 0酶标检测方法和对各种质控参数进行优化。在此基础上测定了健康供血员、甲亢、慢性肾炎、白血病、类风湿性关节炎患者的血清、肺癌患者血清和胸水及多种多发性骨髓瘤 (MM)、淋巴瘤细胞株培养上清中sCD4 0的含量。结果 :成功地研制了人sCD4 0酶联检测试剂盒 ,其灵敏度为 15 6pg ml。该试剂盒 4℃放置 3个月 ,离散度 (CV) <± 7 9% ,回收率为 95 %~ 114 % ,提示检测方法具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得血清中sCD4 0含量的 95 %正常值范围 (x±s)为 10 5 0 0± 18 88pg ml,甲亢、慢性肾炎、白血病、类风湿患者的血清、肺癌患者血清和胸水中sCD4 0的含量明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。结论 :成功地研制了检测人sCD4 0酶标检测试剂盒 ,对一些与CD4 0分子表达或信号异常的疾病患者外周血检测结果显示 。
- 庄羽美黄建安朱华亭周璇马泓冰王凤鸣Elisabeth MonchatreLéna Edelman张学光
- 关键词:可溶性CD40酶联免疫吸附试验试剂盒
- 激发型抗CD40单抗介导恶性肿瘤细胞凋亡及其机制探讨被引量:4
- 2002年
- 目的 探讨激发型CD4 0单克隆抗体对人B淋巴细胞恶性肿瘤的生物学效应及其机制。方法 将激发型CD4 0单克隆抗体 5C11加入肿瘤细胞的体外培养体系 ,采用细胞计数、流式细胞仪等方法分析单克隆抗体 5C11对不同肿瘤细胞株的作用。结果 5C11能引起CD4 0表达的多发性骨髓瘤 (MM)细胞株XG2和恶性淋巴瘤细胞株Daudi发生同型聚集 ,抑制其生长并介导凋亡 ;CD4 0分子介导的XG2和Daudi细胞凋亡作用与可溶性TNF产生无关。结论 激发型CD4 0单克隆抗体通过诱导B细胞恶性肿瘤细胞的凋亡 。
- 汤琳庄羽美周照华余葛华潘建忠张学光
- 关键词:CD40B细胞细胞凋亡
- 重组人sCD40L功能性片段在大肠杆菌中的表达
- 2005年
- 目的克隆sCD40L功能性片段(E107L261)基因并在大肠杆菌体系进行表达。方法从CD40L胞外段全长基因通过PCR方法扩增出sCD40L功能性片段(E107L261)的基因,并在其N端融合6个组氨酸(His);经PCR、酶以及DNA测序证实;将融合得到的sCD40L基因插入pET30a表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)表达体系进行诱导表达。结果构建了pET30asCD40L原核表达载体;将转化菌BL21(DE3)诱导表达后经SDSPAGE电泳以及WesternBlotting鉴定显示在18kd处有sCD40L功能性片段(E107L261)的高效表达。结论sCD40L功能性片段基因的克隆及其表达为进一步研制其同源三聚体形式的功能性重组蛋白奠定了基础。
- 周璇黄勇郑璐庄羽美周桓张学光
- 关键词:CD40配体大肠杆菌
- 阴离子交换层析法纯化gp130单克隆抗体B-S12
- 2006年
- 目的:建立一种从小鼠腹水中获得高纯度、活性好、纯化过程易于放大的抗gp130单克隆抗体BS12的纯化方法。方法:经硫酸铵沉淀等预处理后的腹水样品,在阴离子交换层析柱上进行分离纯化,用MTT法检测纯化后抗体的生物学活性。结果:腹水样品经硫酸铵沉淀、PBS复溶,用pH7.0、20mmol/LTrisHCl缓冲溶液稀释10倍后上强阴离子交换层析柱,NaCl梯度洗脱,可获得纯度大于95%的BS12抗体,回收率达73%,在体外对XG2细胞有明显的促增殖作用。结论:建立了快速高效从小鼠腹水中纯化BS12的方法,为该抗体的进一步应用提供了必要的实验基础。
- 马泓冰徐颖夏瑜朱一蓓庄羽美郁健峰张学光
- 关键词:纯化单克隆抗体腹水
- 分泌独特型免疫球蛋白BALB/c小鼠B细胞淋巴瘤模型的建立被引量:2
- 2002年
- 目的 :构建分泌独特型免疫球蛋白 (idiotype ,Id)的BALB c小鼠B细胞淋巴瘤细胞株 ,建立动物模型 ,为进一步开展Id 树突状细胞 (dendriticcell,DC)疫苗的免疫治疗提供物质基础。方法 :采用降植烷和不完全弗氏佐剂间隔致敏 6~ 8周龄BALB c小鼠 ,继而采用细胞融合技术、ELISA法、免疫荧光标记和流式细胞术 (flowcytometry ,FCM)筛选获得分泌Id的阳性克隆 ;体内诱生腹水和体外无血清培养法制备Id ,优球蛋白沉淀法结合凝胶Suphecray 2 0 0过滤纯化Id ;建立荷瘤模型 ,从荷瘤小鼠骨髓前体细胞诱导DC。结果 :获得 2株稳定分泌Id的BALB c小鼠B细胞淋巴瘤细胞SB4和SB5 ,Id均为IgM κ ;成瘤率均为 10 0 % ,荷瘤小鼠平均生存期为 (3 0± 4)d。结论 :SB4和SB5能持续稳定分泌非自身反应性Id 。
- 古涛席泓庄羽美朱一蓓邱玉华戚春建于葛华李敏马泓冰张学光
- 关键词:B细胞淋巴瘤树突状细胞
- 一株新的鼠抗人CD40单克隆抗体的制备及其应用
- 本研究以高表达CD40分子的XG2细胞株为抗原,应用SP2/0作为亲本骨髓瘤细胞,采用细胞融合、单克隆抗体筛选、荧光标记、免疫印迹和竞争抑制等方法获得并建立了一株持续分泌特异性鼠抗人CD40单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细...
- 庄羽美
- 关键词:CD40单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- CD40突变体的克隆及其生物学意义
- 多发性骨髓瘤(MM)是一种恶性浆细胞增殖性疾病,目前认为其肿瘤性浆细胞在经过生发中心的抗原选择后,从淋巴结移行到骨髓,在骨髓内各种肿瘤性生长因子和其与基质细胞的粘附作用下呈克隆性增殖,形成骨髓瘤。大多数MM细胞表达Fas...
- 郑璐戚春建陶怡庄羽美张学光
- 关键词:生物学意义细胞表达突变体
- 文献传递
- 抗人CD40突变体分子单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及肿瘤坏死因子超家族成员的结合蛋白质或多肽,更具体地说,本发明涉及抗人CD40突变体分子单克隆抗体,其制备方法及其在特异性地识别多发性骨髓瘤细胞膜表面CD40蛋白突变体分子,并改变所说的细胞的生长周期中的应用。
- 张学光庄羽美郑璐
- 文献传递
- 阳离子交换一步层析法纯化抗gp130单克隆抗体被引量:3
- 2005年
- 目的:建立从小鼠腹水中纯化抗gp130单克隆抗体(mAb)B-S12的一步层析方法。方法:小鼠mAb腹水样品经离心后,进行阳离子交换层析柱纯化。检查了上样缓冲液的pH值和洗脱液的离子强度梯度对mAb纯度的影响。纯化后mAb的生物学活性用MTT比色法检测。结果:在pH4.0、20mmol/LHEPES缓冲液条件下上样,用0~1.0mol/L的NaCl梯度洗脱,可获得纯度超过90%的mAbB-S12,回收率为52%。纯化后的mAb对XG-2细胞有明显的促增殖作用。结论:建立的一步纯化方法操作简便,所得mAb的纯度高及生物学活性好。
- 马泓冰庄羽美徐颖郁健锋刘琳李文香张学光
- 关键词:纯化单克隆抗体
- 抗人CD40突变体分子单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及肿瘤坏死因子超家族成员的结合蛋白质或多肽,更具体地说,本发明涉及抗人CD40突变体分子单克隆抗体,其制备方法及其在特异性地识别多发性骨髓瘤细胞膜表面CD40蛋白突变体分子,并改变所说的细胞的生长周期中的应用。
- 张学光庄羽美郑璐
- 文献传递