席建忠 作品数:43 被引量:17 H指数:2 供职机构: 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 自动化与计算机技术 更多>>
一种高通量DNA多位点精确碱基突变方法 本发明公开了一种高通量DNA多位点精确碱基突变方法。本发明所提供的方法是基于重叠延伸PCR高通量对目标基因片段多位点高效引入突变的方法;所用引物不是简并引物,而是准确设计目标突变序列的突变引物;突变位点长度不限于单个氨基... 席建忠 朱丹 王干诚基于CRISPR/Cas9系统高通量筛选研究功能基因 被引量:4 2016年 利用功能缺失型(Loss-of-function)或者功能获得型(Gain-of-function)策略高通量筛选功能基因,是研究人员快速寻找调控特定表型的重要或关键基因的主要方法。RNA干扰(RNA interference,RNAi)的遗传筛选方法因操作简单、成本相对较低等优势,尽管已经得到了广泛的应用,然而其抑制效果不完全、脱靶效应明显等劣势依然存在。近年来兴起的CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat sequences/CRISPR-associated protein 9)技术能快速、简便、准确地实现基因组敲除等编辑功能,因而成为一种强大的遗传筛选工具;在各种细胞系、人和小鼠及斑马鱼等多种模式动物中,大规模运用该方法筛选功能基因已经取得了巨大成功。本文总结了CRISPR/Cas9技术的特点,将其与传统基因工程方法进行了分析比较,回顾了近期相关的高通量功能基因筛选工作,最后探讨了该技术未来的发展趋势。 王干诚 马明 叶延帧 席建忠关键词:高通量 高通量siRNA筛选技术发展与展望 RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术被认为是20世纪生命科学领域最伟大的发现之一,是最具发展前景的生物医药技术和基因功能研究方法。因此,高通量siRNA筛选技术也成为生物学最强有力的研究工具之一。... 席建忠 马明 王干诚 骆宇峰关键词:高通量筛选 RNA干扰 靶基因 腺相关病毒变体及其应用 本发明公开了腺相关病毒变体及其应用。本发明提供了腺相关病毒衣壳蛋白变体为向腺相关病毒衣壳蛋白的氨基酸序列的如下a)和b)两个位置处分别插入SEQ IDNo.1至SEQ ID No.21所示多肽中的任意一个后得到:a)第4... 席建忠 塞嘉非瓣膜性心房颤动相关微RNA的表达 被引量:10 2012年 目的筛选、分析与非瓣膜性心房颤动(房颤)相关的微RNA(miRNA)。方法选择2009年1月至2010年12月北京安贞医院心外科的非瓣膜性房颤患者33例,应用低密度芯片技术,检测非瓣膜性房颤患者和健康人左心耳组织中miRNA表达谱的差异,用生物信息学方法筛选与房颤相关的miRNA及其靶基因,进一步通过定量反转录(RT)-PCR,Western印迹法和体外构建报告载体实验,验证miRNA和其靶基因之间的关系。结果与健康人比较,房颤患者左心耳组织中发现10个差异表达的miRNA:miR-155、miR-142-3p、miR-19b、miR-223、miR·146b-5p、miR-486—5p、miR-301b、miR-193b和miR-519b表达高,miR-193a-5p表达低(均P〈0.05);其中miR-155表达差异最大(9.42±4.74比1.63±0.65),为健康人组织的5.78倍。miR.155的高表达导致了预测的靶基因CACNA1C和相应Cavl-2蛋白的低表达,体外构建报告载体实验发现miR-155可以结合到CACNA1C的3'.UTR区。结论非瓣膜性房颤患者左心耳组织中存在与其发病相关的miRNA,其中miR-155有可能通过调控Cavl-2的表达,参与了房颤的电重构。 王坚刚 孟旭 韩杰 李岩 罗天戈 王珺 辛萌 席建忠关键词:心房颤动 微RNAS 电重构 微流分配装置、其制备方法及用途 本发明涉及一种微流分配装置、其制备方法及用途,属于微量试验设备领域,准确地说属于微流分配领域。本发明的微流分配装置包括一个微流分配芯片,该芯片具有至少一个微流层;每个微流层中具有至少两条并列的微流通道或者一组由一条根微流... 黄岩谊 席建忠 王建斌 周莹文献传递 微肿瘤模型构建及其药敏检测技术中国专家共识(2023年版) 被引量:1 2023年 患者来源类肿瘤细胞簇(Patient-DerivedTumor-LikeCellCluster,PTC)简称微肿瘤或微肿瘤PTC,是一种新型的原代3D肿瘤模型,该模型在病理组织学特征、分子遗传学特征方面保持了跟原始肿瘤组织的高度相似性。同时,该模型在培养过程中保留了原始肿瘤组织中的成纤维细胞和免疫细胞,从而高度还原了原始肿瘤组织微环境特征。微肿瘤PTC模型可广泛的应用于肿瘤基础科学研究、精准治疗和新药研发等领域。然而,由于微肿瘤PTC模型的构建及应用涉及到多种技术,流程多,影响因素多,目前,国内对微肿瘤PTC模型构建、鉴定、药敏检测等操作尚未建立规范标准。为此,特组织编写《微肿瘤模型构建及药敏检测技术中国专家共识(2023年版)》,以利于推动和指导微肿瘤PTC模型构建以及基于此模型药敏检测技术的应用。 中国生物医学工程学会类器官与器官芯片分会 中国医药生物技术协会基因检测技术分会 季加孚 席建忠关键词:肿瘤 肿瘤药敏检测 用于高效基因组编辑的RNA分子的设计、合成及其应用 在原核生物中,CRISPR/Cas(Clustered regularly interspaced short palindromic repeals and CRISPR associated)系统中的cas9蛋白被证... 席建忠 叶延桢 孙常宏文献传递 冠状病毒中和效应蛋白及其应用 本发明公开了冠状病毒中和效应蛋白及其应用。本发明提供了一种蛋白质,为氨基酸序列如SEQ ID No.1的第1‑740位或经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加或具有80%以上同一性且具有相同功能的蛋白质,或在... 席建忠 王博仑 赵俊轩构建灵长类动物miRNA-122敲除模型的方法、灵长类动物肝癌模型及用途 构建灵长类动物肝癌模型的方法,包括以下步骤:a)将特异性靶向miR122的gRNA序列插入到适宜的载体中,构建出体外转录miR122的模板载体;b)将cas9基因的序列插入到适宜的载体中,构建出体外转录cas9基因的模板... 席建忠 孙常宏文献传递