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单纯疱疹病毒Ⅱ型抗原优势表位与乙肝核心蛋白融合DNA疫苗的构建被引量：2: 2009年; 提取HSV-2333株的DNA作为模板,用PCR方法扩增编码HSV-2糖蛋白D抗原优势表位的基因(gDt)和乙肝核心蛋白(HbcAg)的基因序列(HBc),再用重叠PCR方法将gDt插入到HBc编码Hb-cAg刺突部的第81和82位的氨基酸的基因之间,获得融合基因gDt-HBc,将gDt-HBc插入真核表达质粒pcDNA3.1中,构建出真核表达质粒gDt-HBc-pcDNA3.1,转化DH5a感受态细胞后,通过菌落PCR和双酶切鉴定后进行测序鉴定,测序结果与预期结果完全一致,成功构建单纯疱疹病毒Ⅱ型抗原优势表位与乙肝核心蛋白融合DNA疫苗,为下一步的评价工作奠定了基础。; 周朋刘坤王希良于三科; 关键词：DNA疫苗

单纯疱疹病毒2型糖蛋白D在杆状病毒表达系统中的表达、纯化及免疫原性的初步评价: 单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是线性双链DNA病毒,属于α疱疹病毒亚科,是引起生殖器疱疹的主要病原体。HSV-2感染患者后,病毒移行至感觉神经节中并在背侧根神经节中形成潜伏感染。潜伏感染的病毒的周期性活化将使得患者表现出...; 周朋; 关键词：单纯疱疹病毒2型糖蛋白D 杆状病毒表达系统免疫原性; 文献传递

Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白D在杆状病毒表达系统中的表达、纯化及免疫效果评价被引量：1: 2010年; 目的:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白D(gD2)进行表达,纯化后评价其免疫效果,以探索HSV-2重组亚单位疫苗的研制。方法:提取HSV-2DNA作为模板,用聚合酶链式反应(PCR)扩增gD2基因,克隆至pFastBac HTA载体中,利用载体中的His基因标记gD2,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gD2融合蛋白,表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot检验,用镍柱进行纯化,免疫小鼠评价其免疫原性。结果:HSV-2gD2在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组蛋白诱导小鼠体内产生高水平的IgG抗体及中和抗体。结论:gD2基因在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中获得表达,表达产物表现出良好的免疫原性及中和活性,为发展HSV-2亚单位疫苗奠定了基础。; 姜德玉刘坤张伟张伟周朋李君丽王希良; 关键词：糖蛋白D 免疫原性中和活性

从cDNA感染性克隆产生冷适应重配A型人流感病毒及免疫原性的初步研究被引量：2: 2008年; 目的从cDNA感染性克隆产生冷适应重配A型人流感病毒株,并对其生物学特性和免疫原性进行初步测定。方法采用RT-PCR技术,分别扩增2006至2007年疫苗株A/New Caledonia/20/99的HA、NA全长基因片段,构建转录表达双向载体pMDV-A-HA、pMDV-A-NA,将这2个质粒与冷适应拯救系统的6个质粒共转染COS-1细胞,并对拯救的重配病毒的生物学特性和免疫原性进行初步鉴定。结果拯救出具有冷适应表型和温度敏感型的A型人流感弱毒株,初步测定了重配病毒的生物学特性和免疫原性。结论成功拯救具有冷适应和温度敏感表型的A型人流感弱毒株,并初步测定其免疫原性,为我国弱毒疫苗株的拯救和弱毒疫苗的发展奠定了基础。; 叶艺杨鹏辉罗德炎吴朔周朋刘秀梵王希良于三科; 关键词：反向遗传学冷适应弱毒疫苗株免疫原性

呼吸道合胞病毒F蛋白表位与Balb／c小鼠血清白蛋白融合表达及其纯化: 2009年; 为了更深入的研究呼吸道合胞病毒F蛋白优势表位的抗原性，采用生物信息学技术，预测呼吸道合胞病毒F蛋白的抗原表位，选取F205-223与F255-278两个小片段表位作为候选研究对象，构建了编码F蛋白两个表住与Balb／c小鼠白蛋白结构域I的融合基因，并在大肠埃希菌BL21（DE3）中融合表达，表达蛋白采用金属亲和层析法纯化，Western blot检测。结果显示，通过大肠埃希菌原核表达的融合蛋白以包涵体的形式表达，采用尿素变性，亲和层析法纯化后可以获得高纯度的融合蛋白。; 余兵兵周朋王善辉王希良于三科; 关键词：呼吸道合胞病毒

陕西省杨凌某羊场球虫种类调查及药物治疗试验被引量：10: 2005年; 采用粪便漂浮法和卵囊培养法对杨凌某羊场道赛特绵羊的球虫感染情况进行了调查和初步鉴定,结果发现,道赛特绵羊体内存在8种艾美耳球虫,即小型艾美耳球虫、颗粒艾美耳球虫、槌形艾美耳球虫、巴库艾美耳球虫、错乱艾美耳球虫、阿撒他艾美耳球虫、绵羊艾美耳球虫、浮氏艾美耳球虫。感染强度平均为1778OPG。结合药物治疗对比试验,确定复方地克珠利对艾美耳球虫的防治有良好的效果,且其价格便宜、用药方便。; 林青周朋翟军军; 关键词：艾美耳球虫

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周朋