史小玲
- 作品数：82 被引量：158H指数：7
- 供职机构：泸州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省重点科学建设项目四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 嵌合DNA hsp70/CD80真核表达质粒的构建及鉴定被引量：2
- 2004年
- 目的 构建hsp70 /CD80嵌合DNA真核表达质粒 ,并对其进行鉴定。方法 采用基因工程技术 ,分别以pBR32 2-hsp70和 pcDNA3-CD80质粒为模板 ,经聚合酶链反应 (PCR)扩增出hsp70 /CD80嵌合目的基因 ,然后与 pcDNA3载体进行连接重组 ,构建成hsp70 /CD80嵌合DNA真核表达质粒 ,用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列分析等多种方法进行鉴定。结果 hsp70 /CD80嵌合DNA重组真核表达质粒经证实构建成功。 结论 hsp70 /CD80嵌合DNA重组真核表达质粒的成功构建 ,为进一步制备结核病hsp70 /CD80嵌合DNA疫苗奠定了基础。
- 李晖史小玲钟森张建军邓存良
- 关键词：结核病热休克蛋白70CD80
- 多药耐药大肠埃希菌质粒介导的复合β-内酰胺酶耐药基因研究被引量：4
- 2015年
- 目的研究泸州地区质粒介导的产β-内酰胺酶多药耐药大肠埃希菌TEM、SHV、CTX-M、CTX-M-3、CTX-M-22、CTX-M-24等耐药酶复合基因分布及对常见抗菌药物的耐药性。方法采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2006年推荐的方法,测定71株大肠埃希菌对常见的氨基糖苷类、氟喹诺酮类、第三代头孢菌素类的耐药性;采用质粒小提试剂盒制备质粒DNA扩增模板,PCR技术扩增6种基因,产物琼脂糖凝胶电泳,以标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922进行阴性对照,基因测序仪检测碱基序列。结果临床分离的71株大肠埃希菌中多药耐药菌30株占42.86%;含两种酶基因同时检出的有30株,其中CTX-M+CTX-M-3有12株占40.0%,CTX-M-24+CTX-M有12株占40.0%;CTX-M-22+CTX-M-24有6株占20.0%;含3种耐药酶基因共检出13株占32.5%;携带CTX-M-24、CTX-M-3、TEM、CTX-M、CTX-M-24+CTX-M基因的菌株对阿米卡星和妥布霉素的耐药率差异有统计学意义(P<0.05);携带TEM、CTX-M、CTX-M-3基因的菌株对头孢呋辛和头孢哌酮的耐药率差异有统计学意义(P<0.05)。结论复合酶基因中主要CTX-M+CTX-M-3、CTX-M+CTX-M-24为主,以及在同一菌株质粒上出现3种不同的基因型。
- 张正琼黄永茂毕义亮钟利陈枫陈庄史小玲
- 关键词：大肠埃希菌多药耐药质粒介导Β-内酰胺酶基因
- 肝纤维化相关细胞因子双重RNA干扰质粒的构建及转染肝星状细胞研究被引量：1
- 2012年
- 目的构建以大鼠CTGF和TIMP-1基因为靶点的双重RNA干扰表达载体质粒,以检测其转染肝星状细胞的效率。方法筛选出对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计1对含有短发夹结构的RNA干扰靶点序列,分别克隆到质粒载体psiRNA-DUO-GFPzeo,构建含目的靶基因片段的重组质粒载体psiRNA-GFP-CT-GF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com(含有CTGF和TIMP-1),进行酶切和测序鉴定。将构建成功的重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染大鼠肝星状细胞,在荧光显微镜下观察质粒转染情况,用流式细胞仪检测转染效率。结果酶切与测序结果提示重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiR-NA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com成功构建;成功将重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染肝星状细胞,在24小时,空质粒组、CTGF组、TIMP-1组和CTGF+TIMP-1组转染效率分别为15±2%、13±1%、15±1%和14±2%,均低于质粒psiRNA-GFP-Com转染组(Com组,20±2%,P<0.05);在48小时,空质粒组、CTGF组、TIMP-1组和CTGF+TIMP-1组转染效率分别为10±2%、9±1%、8±2%和10±1%,均低于Com组的15±2%(P<0.05)。结论成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNA干扰靶位的双重RNA干扰表达质粒,能转染至肝星状细胞,并且psiRNA-GFP-Com转染效率最高。
- 蒋玉凤周德江张建军黄飞史小玲
- 关键词：RNA干扰质粒载体结缔组织生长因子金属蛋白酶组织抑制因子-1肝星状细胞
- 血清转化生长因子β_1及肝细胞生长因子与慢性乙型肝炎早期肾损害关系的研究
- 2005年
- 目的探讨血清转化生长因子β1(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)与慢性乙型肝炎(CHB)早期肾损伤的关系。方法对2004年泸州医学院附属医院感染科44例慢性乙型肝炎(轻度)住院患者用双抗体夹心ELISA法和放射免疫法测定血清TGF-β1、HGF和尿α1微球蛋白(α1-MG)、尿微量白蛋白(mALB)质量浓度并与20名健康人作对照。结果44例CHB中早期肾损害组24例,无肾损害组20例;慢性乙型肝炎患者血清TGF-β1、HGF高于对照组(P<0.01);早期肾损害组患者血清TGF-β1、HGF明显高于无肾损害组患者(P<0.01);且血清TGF-β1、HGF与早期肾损害指标:尿α1-MG、mALB质量浓度呈正相关(r分别=0.718,0.683,0.664,0.637)。结论慢性乙型肝炎早期肾损害患者血清TGF-β1、HGF均升高,可能是机体损害与抗损害反馈调节所致。
- 宋新文邓存良盛云建陈枫王明勇史小玲
- 关键词：早期肾损害慢性乙型肝炎细胞因子
- 甲型H1N1流感病毒耐药性研究进展被引量：1
- 2011年
- 2009年4月,墨西哥首先爆发了人感染猪流感疫情,随即疫情迅速在全球范围内蔓延,形成了新一轮的流感大流行。这次流行的猪流感病毒为新型的甲型H1N1流感病毒。世界卫生组织于2009年4月30日正式将其更名为A（H1N1）型流感。目前我国对于甲型H1N1流感的治疗,除了运用传统中医的疗法外。
- 王晓燕邹家凤史小玲杨向东陈庄
- 关键词：甲型H1N1流感病毒耐药性
- HSP70/CD80 DNA疫苗对哮喘小鼠气道重构的治疗及机制
- 2013年
- 目的:观察HSP70/CD80 DNA疫苗对哮喘小鼠气道重构的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法:利用OVA腹腔注射致敏小鼠建立慢性哮喘模型。HSP70/CD80 DNA疫苗治疗后,ELISA检测眼球血OVA-IgE和支气管肺泡灌洗液中IL-5的含量,HE染色、AB-PAS染色和PCNA免疫组化观察小鼠肺组织气道重构改变,实时荧光定量PCR测定T-bet、GATA-3在脾脏中的表达。结果:哮喘模型小鼠较对照小鼠血清OVA-IgE升高,气道壁增厚,杯状细胞和黏液分泌增多,平滑肌细胞数增多明显(P<0.05),且IL-5的含量增加,T-bet/GATA-3表达比减低(P<0.05);疫苗治疗能减低血清OVA-IgE,减轻气道壁增厚,杯状细胞增多和平滑肌细胞增生(P<0.05),且减少IL-5含量,T-bet/GATA-3表达比升高(P<0.05)。结论:通过调节转录因子T-bet/GATA-3平衡,HSP70/CD80 DNA疫苗可能对哮喘气道重构存在抑制作用。
- 李燕夏晓群史小玲王晓燕唐利陈枫钟森陈庄
- 关键词：哮喘气道重构T-BETGATA3
- hsp70/CD80嵌合DNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量：8
- 2002年
- 李晖史小玲钟森邓存良张建军
- 关键词：嵌合结核分支杆菌
- HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节Th1/Th2/Treg/Th17细胞对小鼠急性哮喘的抑制作用被引量：5
- 2014年
- 目的考察热休克蛋白70(HSP70)/CD80 DNA疫苗治疗小鼠急性哮喘的疗效,研究该过程中Th1/Th2/Treg/Th17再平衡的作用机制。方法 BALB/c小鼠40只随机分为空白对照组(空白组),哮喘模型组(模型组),pVAX1(+)空载体对照组(空载组)和HSP70/CD80疫苗治疗组(治疗组),每组10只。鸡卵清蛋白(OVA)激发致敏小鼠构建急性哮喘模型,HSP70/CD80 DNA疫苗进行治疗。吸入性支气管激发试验测定气道反应性,ELISA法测定血清中IgE的含量,HE和AB-PAS染色观察肺组织病理学改变,ELISA法观察支气管肺泡灌洗液中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素-17(IL-17)等细胞因子的含量变化,实时荧光定量PCR观察肺组织中T-bet、GATA连接蛋白3(GATA-3)、叉头蛋白3(Foxp3)和维甲酸受体相关孤儿受体(RORγt)等转录因子的表达。结果与模型组相比,DNA疫苗治疗后小鼠气道反应性明显下降(P<0.05),IgE浓度降低(P<0.05),肺组织炎症浸润减少,杯状细胞增生不明显,IFN-γ/IL-4和TGF-β/IL-17比值升高(P均<0.05),T-bet/GATA-3和Foxp3/RORγt比值升高(P均<0.05)。结论 HSP70/CD80 DNA疫苗可能通过改变IFN-γ/IL-4和TGF-β/IL-17的比值、T-bet/GATA-3和Foxp3/RORγt的比值,使Th1/Th2/Treg/Th17恢复平衡,从而发挥对哮喘的治疗作用。
- 李燕谢敏史小玲王晓燕唐利钟森陈庄
- 关键词：哮喘辅助性T细胞17
- 外周血单个核细胞在乙肝相关性肾炎发病机制中的作用研究被引量：5
- 2006年
- 目的通过观察外周血单个核细胞(PBMC)对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨PBMC在乙肝相关性肾炎发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测HBVDNA阳性血清与人近端肾小管上皮细胞(HK-2)培养时HK-2凋亡率作为对照,分别观察健康人及HBVDNA阳性患者PBMC对HK-2凋亡的影响。结果健康人PBMC组HK-2凋亡率明显低于对照组和HBVDNA阳性患者PBMC组(P<0.01)。结论健康人PBMC能抑制HK-2凋亡,而HBVDNA阳性患者PBMC此抑制作用降低,提示HBVDNA阳性患者PBMCs功能缺陷,可能是乙型肝炎相关肾炎(HBV-GN)的发病机制之一。
- 宋新文邓存良盛云建陈枫王明勇史小玲
- 关键词：肾小管上皮细胞外周血单个核细胞乙型肝炎病毒凋亡
- 丙型肝炎病毒NS4B对肝细胞周期及PCNA表达的影响
- 2008年
- 目的研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B对肝细胞细胞周期及PCNA表达的影响,探讨HCV-NS4B在肝细胞增殖机制中的可能作用。方法利用脂质体介导将空白载体PCXN2组及重组质粒PCXN2-NS4B转染入LO2肝细胞,G418筛选。RT-PCR鉴定质粒成功转染入肝细胞内。MTT法绘制生长曲线,观察NS4B对肝细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期的情况;免疫组化方法观察PCNA的表达情况。结果NS4B转染入LO2有表达,生长曲线示HCV-NS4B可促进肝细胞生长;细胞周期检测示转染PCXN2-NS4B组S期、G2/M期较PCXN2组增加,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);转染PCXN2-NS4B组PCNA表达率较PCXN2组高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论HCV-NS4B可能通过调节PCNA的表达,促进DNA合成,促进肝细胞增殖。
- 杨春李昌平陈枫王明勇史小玲
- 关键词：细胞周期增殖细胞核抗原
