刘艳丽
- 作品数：21 被引量：76H指数：5
- 供职机构：四川农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”四川省重点科学建设项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 含绿色荧光蛋白基因的猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒的构建
- 将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中,构建了含PPV VP2基因及其EGFP报告基因的PRV基因缺失转移载体质粒pPI-2.EGFP.VP2.采用磷酸钙转染系统,将pPI-2.E...
- 罗燕郭万柱徐志文刘艳丽殷华平
- 关键词：伪狂犬病毒猪细小病毒VP2基因EGFP重组病毒
- 文献传递
- 单抗介导的免疫组化检测AFB1及在雏鸭感染AFB1致病机理中的初步应用
- 7日龄樱桃谷鸭饲喂黄曲霉毒素(AFB1)含量为150bbp的全价饲料,分别于12、24、48、72、96、120、144、168、192小时各剖杀2只,观察并取心、肝、脾、肺、肾、脑、十二指肠、胰腺等组织.用抗AFB1单...
- 刘艳丽汪铭书程安春胡骑陈孝跃
- 关键词：感染雏鸭免疫组化单抗介导雏鸭致病机理
- 文献传递
- 猪细小病毒PPV-SC1株VP2基因的克隆及生物信息学分析
- 本文根据PPVNADL-2株病毒基因组序列设计了一对引物,以复制型DNA为模板,通过PCR扩增出长约2.0kb的DNA片段,将其插入克隆载体质粒pUC19,构建重组质粒pPVP2,测序显示PPV-SC1VP2基因全长17...
- 罗燕郭万柱刘艳丽殷华平
- 关键词：猪细小病毒VP2基因克隆生物信息学
- 文献传递
- 含绿色荧光蛋白基因的猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒的构建被引量：13
- 2005年
- 将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因产物插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中,构建了含PPV VP2基因及其EGFP报告基因的PRV基因缺失表达载体质粒pPI-2.EGFP.VP2。采用磷酸钙转染系统,将pPI-2.EGFP.VP2DNA和PRV DNA共转染Vero细胞后通过直接荧光观察、Dot-blot核酸杂交筛选得到几株重组病毒,将其中一株(命名为SA215-B)DNA用BamHⅠ酶切和Southern转印杂交进一步验证重组病毒构建成功,并通过SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹检测表明PPV VP2基因在重组病毒内获得表达,产生大小约93 ku的融合蛋白,同时融合蛋白中的PPV VP2结构蛋白仍然保持了原有的反应原性,表明成功构建了含绿色荧光蛋白基因的猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒。
- 罗燕郭万柱徐志文刘艳丽殷华平王新王小玉苟琳
- 关键词：伪狂犬病毒猪细小病毒VP2基因EGFP重组病毒
- 猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒的构建
- 将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因产物插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中,构建了含PPV VP2基因及其EGFP报告基因的PRV基因缺失转移载体质粒pPI-2.EGFP.VP2.采用磷酸钙转染系统,将pPI-2...
- 罗燕郭万柱徐志文刘艳丽殷华平
- 关键词：伪狂犬病毒猪细小病毒VP2基因EGFP重组病毒
- 文献传递
- 含绿色荧光蛋白基因的伪狂犬病毒Fa株重组猪细小病毒VP2基因表达载体的构建被引量：5
- 2005年
- 分别用限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ和KpnⅠ酶切含PRVFa株gI片段的质粒pPI,补平连接后得到去除EcoRⅠ、HindⅢ、EcoRⅤ、BamHⅠ和KpnⅠ酶切位点的大小约5.7kb的质粒pPI-2,再以CMV早期启动子控制的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因,将其插入pPI-2中gI基因起始密码子ATG下游的StuⅠ位点,构建了以gI为同源序列含有EGFP报告基因的转移载体质粒pPI-2.EGFP。然后根据AnaI.Ranz等报道的猪细小病毒(PPV)NADL-2株的序列,设计一对包含其结构蛋白VP2基因的PCR引物,扩增得到VP2基因后,将其插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中,首次构建了含PPVVP2基因及其EGFP报告基因的PRV基因缺失转移载体质粒pPI-2.EGFP.VP2,为进一步构建PRV重组PPVVP2基因活载体疫苗奠定了基础,同时EGFP的引入也为进一步研究PRV在机体内的定植和感染机理打下了基础。
- 罗燕郭万柱徐志文刘艳丽殷华平王小玉
- 关键词：伪狂犬病毒猪细小病毒VP2基因EGFP
- 实验感染黄曲霉毒素雏鸭的病理学及免疫组化检测石蜡切片中黄曲霉毒素的研究
- 应用组织学切片技术、超薄切片技术对黄曲霉毒素(AFB1)实验感染雏鸭病理学变化、超微结构变化进行观察;通过观察雏鸭采食不同AFB1脱毒剂处理饲料后的病理学变化进行了脱毒剂脱毒效果的比较研究;用抗AFB1单克隆抗体建立了检...
- 刘艳丽
- 关键词：黄曲霉毒素感染雏鸭组织学变化超微结构变化免疫组化脱毒效果
- 文献传递
- 蛋鸡群产蛋下降综合症的免疫监测与结果分析
- 2008年
- 三年对云南省部分地区养禽场蛋鸡群进行产蛋下降综合症的免疫抗体监测,结果表明,在8个地区被检的蛋鸡群中,减蛋综合症的免疫效果均较差,抗体效价低,且分布不均匀,离散度高。在此,针对免疫监测结果与疫苗质量的关系进行了讨论。
- 杨斌刘艳丽常志顺王传禹杨向东
- 关键词：减蛋综合症免疫监测疫苗
- 猪细小病毒SC-1株VP2基因的克隆及生物信息学分析被引量：19
- 2005年
- 根据PPV NADL-2株基因组序列设计了一对引物,以复制型DNA为模板,通过PCR 扩增出长约2.0 kb的DNA片段,将其插入克隆载体质粒pUC19,构建重组质粒pPVP2,测序显示PPV-SC-1 VP2基因全长1 740 bp,共编码579个氨基酸.多序列比对结果显示,猪细小病毒VP2基因保守性强,仅存在个别的差异;密码子偏向性分析结果表明,PPV-SC-1 VP2基因在同一氨基酸的不同密码子的选择上存在一定的偏向性,并且与PPV-SC-1 NS1在密码子的偏向性上具有相同的属性,主要偏向于使用以A结尾的密码子;氨基酸疏水性分析表明,PPV-SC-1 VP2蛋白在77～82、291～304、362～373、400～411、465～477等位点存在较明显的亲水区段;跨膜区结构分析显示该蛋白不存在显著意义的跨膜区;分析该蛋白的抗原位点可能位于60～68、81～88、266～275、351～357、398～404位点处.
- 罗燕郭万柱刘艳丽殷华平
- 关键词：猪细小病毒VP2基因克隆生物信息学
- 16SrDNA实时荧光定量PCR检测DPV强毒感染鸭气管及消化道大肠杆菌动力学被引量：4
- 2006年
- 参照Genebank大肠埃希氏菌属(E.coli)16SrDNA保守基因序列设计并合成定量PCR引物及针对大肠杆菌属的Taqman探针,以E.coli标准菌株的PCR扩增产物作为阳性模板制作标准曲线,建立检测E.coli的定量PCR方法。该法Mg2+最佳工作浓度5 mmol/L,能够定量和特异检测E.coli而对肠道优势菌群的代表种葡萄球菌、双歧杆菌呈阴性。检测E.coli的灵敏度可达3个/mL。利用该法对DPV强毒感染鸭急性病例的气管和消化道E.coli检测,结果表明:气管E.coli数量普遍低于对照。食道波动巨大,普遍高于对照;十二指肠、空肠变化不明显;回肠波动巨大,总体高于对照;盲肠显著低于对照;直肠与对照差异不显著。DPV感染致死鸭的气管E.coli数量显著低于对照;食道和十二指肠极显著高于对照;空肠、回肠和盲肠均略高于对照;直肠略低于对照。
- 胡骑程安春汪铭书刘艳丽葛忠源黄永成张素辉杨晓燕齐雪峰陈孝跃
- 关键词：气管消化道大肠杆菌
