刘新琼
- 作品数：75 被引量：197H指数：8
- 供职机构：中南民族大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 无毒基因在稻瘟病菌株007中的克隆鉴定及表达分析
- 2020年
- 为了能明确稻瘟病国际标准菌株race 007中包含的无毒基因及其可能的主效无毒基因,本研究设计5个常见的无毒基因特异性引物进行克隆鉴定,并分别检测液体培养条件下和侵染水稻过程中race 007菌株中5个无毒基因的表达情况。本研究发现,稻瘟病菌株race 007中含有PWL2、AvrPiz-t、Avrpik、Avr-pita、ACE15个无毒基因,克隆鉴定的结果表明这5个无毒基因的变异不大。相比较于液体培养条件下,在侵染水稻的过程中,PWL2表达上调,ACE1、AvrPiz-t、Avr-Pik表达基本不变,而Avr-Pita基因表达出现了下调。因此PWL2基因表达变化较为显著,本研究进一步对PWL2启动子区域进行分析,结果表明该PWL2基因启动子区域存在着一些顺式作用元件来影响PWL2基因的表达。本研究表明,稻瘟病菌race 007含有5种常见的无毒基因且序列变异不大,而且PWL2基因的表达是受到调控并可能发挥主要的致病作用。
- 熊田田韩豪杰卢艳梅张宁王春台刘新琼程钢
- 关键词：稻瘟病菌无毒基因克隆
- 稻瘟病抗性基因Pi36原核表达载体构建·表达与鉴定被引量：2
- 2010年
- [目的]研究稻瘟病抗性基因Pi36的结构和功能。[方法]利用双酶切构建Pi36基因CC、NBS结构域的原核表达载体,通过菌落PCR鉴定和测序验证阳性克隆。然后分别收集不同浓度IPTG诱导,不同温度30和37℃分别培养的大肠杆菌细胞提取蛋白,利用SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达情况。[结果]当IPTG浓度为1mmol/L、30℃培养3h,目的蛋白表达量最大。[结论]为进一步研究稻瘟病抗性基因Pi36的抗病机理奠定基础。
- 王玲张向明刘新琼
- 关键词：稻瘟病抗性基因原核表达载体基因克隆
- 红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)水稻不育系与保持系中3个ANTs基因表达模式的比较
- 2010年
- 探讨红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)水稻不育系‘粤泰A’(‘YTA’)和保持系‘粤泰B’(‘YTB’)中3个腺苷酸转位酶(ANT)基因在三叶期根、茎、叶以及不同发育时期的幼穗中的表达模式。结果表明:ANT1和ANT2在‘YTA’和‘YTB’三叶期的根、茎、叶中的表达量都较高,而在生殖生长不同时期的幼穗中表达量较低。‘YTA’中ANT1在不同时期的幼穗中表达量都较低,而ANT2的表达量到穗生长期II的幼穗才较低。‘YTB’中ANT1在生殖生长的穗生长期III的幼穗有很高的表达。ANT3的表达水平在研究的各组织中的表达都较低,在‘YTB’穗生长期V的幼穗中表达最高。相对于‘YTA’,‘YTB’中只有ANT3在穗生长期III和穗生长期V的幼穗中呈现明显的优势表达;而相对于‘YTB’,‘YTA’中ANT2和ANT3在穗生长期I、ANT2在穗生长期VI幼穗具有明显的优势表达。3个ANTs基因在HL-CMS不育系‘YTA’和保持系‘YTB’不同组织及发育时期的表达模式的差异,暗示它们可能与HL-CMS水稻不育系和保持系的发育调控有关。
- 罗凤燕程钢谭艳平刘学群刘新琼周杰王春台
- 关键词：水稻实时荧光定量PCR基因表达
- 链球菌制剂对NOD鼠脾细胞及血清细胞因子的影响
- 2009年
- 为了探索链球菌制剂对NOD鼠脾细胞及血清细胞因子的影响,试验以NOD鼠为Ⅰ型糖尿病动物模型,在5～20周龄,皮下注射链球菌制剂,每只0.1 mg,对照组注射0.1 mL生理盐水,分别取未发病鼠、已发病鼠及经链球菌制剂免疫后小鼠的眼底血、脾脏制成脾细胞DMEM悬液,夹心ELISA法测IFN-γ、IL-4的含量。结果发病鼠IFN-γ的分泌量高于链球菌制剂的免疫鼠,而IL-4低于后者。链球菌制剂可能通过调节Th1和Th2型细胞因子的平衡来预防性地治疗糖尿病,从而发挥免疫调节的作用。
- 王德彬郑红波刘新琼
- 关键词：NOD鼠血清细胞因子
- 稻瘟病抗性基因Pi36的表达分析被引量：1
- 2007年
- 为研究稻瘟病抗性基因Pi36的表达模式,利用半定量RT-PCR对抗病亲本Kasalath和感病亲本丽江新团黑谷(LTH)进行了接种前和接种后24 h和48 h的表达分析.结果表明:Pi36无论在接种前还是接种后以及无论在抗病亲本Kasalath还是感病亲本LTH中均有表达,并且各个时间段的表达量没有大的差别.由此说明,Pi36属于组成型而不是诱导型表达的基因.
- 张向明李丕顺刘新琼
- 关键词：稻瘟病半定量RT-PCR
- 高杆野生稻PR2同源序列的分离与序列分析
- 2009年
- 根据已知植物病程相关蛋白基因β-1，3-葡聚糖酶基因（PR2）的保守结构域设计2对简并引物，从高杆野生稻基因组DNA中分离出3条防卫基因类似物（defense—genes analogues，DGAs），其中2条具有通读的ORF，另一条提前出现终止密码子。对这3条序列在NCBI上进行同源性搜索发现，在核苷酸水平这3条序列均与水稻的β-1，3-葡聚糖酶基因具有90％～93％的同源性，与已知大麦、小麦、高梁、黑麦、燕麦、玉米等其它植物的β-1，3-葡聚糖酶基因具有69％-81％的同源性。在氨基酸水平与水稻、大麦、小麦、黑麦的β-1，3-葡聚糖酶具有60％～93％的同源性。对具有通读ORF的2条序列RD1-GG6和RD1-GG12进行表达分析，发现经水杨酸（SA）诱导后表达量明显提高。
- 王德彬韦靖鸾张丹刘新琼刘学群王春台张向明
- 关键词：Β-1,3-葡聚糖酶
- 分子生物学与基因工程实验模块化教学新模式被引量：8
- 2011年
- 针对分子生物学和基因工程实验课程的特点,以及实验教学中存在的问题,通过优化整合实验内容,并对实验内容进行模块化,强化设计性实验,改革实验教学运行模式和教学方法、完善成绩考核评价体系等方面,对分子生物学和基因工程实验教学进行改革。实践证明:通过改革,有效地提高了学生的实验操作能力、实践能力、综合素质和创新能力。
- 刘新琼王春台张向明
- 关键词：分子生物学基因工程教学改革模块化
- 栽培稻与Oryza officinalis相似群野生稻基因组VDAC基因的比较被引量：2
- 2008年
- 根据水稻基因组文库日本晴的基因组VDAC基因的序列,设计引物分别扩增6种不同基因组的野生稻(BB、CC、BBCC及CCDD)和2种栽培稻(AA)的基因组DNA的VDAC基因片段。所有分别代表8个VDAC基因的8对引物中,除引物VDAC3外,其它7对引物均能扩增出预期大小的特异条带,其中一些片段是所有试验材料共有的,而另一些则具有明显的基因组或种的特异性。AA、BB、CC基因组均具有VDAC1、VDAC4、VDAC7和VDAC8引物的扩增位点,而DD基因组则不能确定。VDAC6的引物位点是AA基因组所特有。VDAC2引物的扩增位点存在于基因组AA、BB、DD,而CC基因组中则无此位点。而VDAC5则可区分同为CCDD的宽叶野生稻和高秆野生稻。栽培稻种与野生稻种基因组相比能扩增出更多的VDAC基因片段的试验结果,为进一步研究稻属中VDAC基因的起源及进化关系提供了基础。
- 马亢周杰覃瑞刘新琼刘学群王春台
- 关键词：栽培稻野生稻
- 一种水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的原核表达方法及表达载体
- 本发明提供了一种水稻广谱抗性负调控基因OsSSI2的原核表达方法，包括以下步骤：1、pGEX-6P1-OsSSI2原核表达载体的构建。2、重组蛋白的诱导表达：将构建好的pGEX-6P1-OsSSI2的重组质粒和pGEX-...
- 刘新琼陈亚红刘早利王春台
- 文献传递
- 一套具有包容性且精确鉴别并挖掘稻瘟病Pi63抗病等位基因家族的技术体系
- 本发明公开了一套具有包容性且精准鉴别并挖掘稻瘟病Pi63抗病等位基因家族的技术体系，该技术体系根据该基因家族存在清晰的“功能性单倍型‑抗病等位基因”等二级分化而设置其二级检测标记。该技术体系可用于稻瘟病Pi63抗病等位基...
- 潘庆华王兴汪金燕刘新琼黄志朋叶雪梅王玲
