冀为 作品数:4 被引量:28 H指数:3 供职机构: 天津医科大学肿瘤医院国家肿瘤临床医学研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 长江学者和创新团队发展计划 天津市应用基础与前沿技术研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
SHP2不同突变体对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响 2015年 目的:采用慢病毒感染的方式将SHP2基因和SHP2突变体导入乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,研究SHP2及其各突变体对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:构建SHP2-WT和SHP2-T468M、SHP2-N308D和SHP2-2YF 3个突变体的慢病毒载体,完成慢病毒包装后,感染乳腺癌细胞系MDA-MB-231稳定表达。通过蛋白免疫印记检测高表达情况,免疫荧光观察定位情况,划痕、Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:SHP2-WT增强了乳腺癌细胞迁移和侵袭能力,SHP2-T468M,SHP2-N308D与对照相比无显著影响,SHP2-2YF与对照相比降低了乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力。结论:SHP2-WT能显著增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力,这可能与其磷酸酶活性无关,而与其542位和580位酪氨酸的磷酸化有关。 张洁 张飞 冀为 赵元元 牛瑞芳关键词:乳腺癌 磷酸酶活性 迁移 人附睾蛋白4在乳腺癌发生发展中的机制研究 被引量:5 2015年 目的:探讨人附睾蛋白4(HE4)在乳腺癌发生发展中的机制研究。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测15例原发乳腺癌组织及其配对的癌旁正常组织中HE4 m RNA的表达水平。RT-q PCR和Western blot检测常见乳腺(癌)细胞系中HE4 m RNA和蛋白表达水平。通过RNA干扰技术沉默HE4高表达的乳腺癌SKBR3细胞中HE4表达,通过CCK8和克隆形成实验分析沉默HE4表达对SKBR3细胞增殖的影响。流式细胞术检测沉默HE4表达对SKBR3细胞凋亡的影响。Western blot检测沉默HE4表达对Erk和Akt磷酸化水平的影响。结果:HE4 m RNA在乳腺癌组织中高表达;沉默HE4表达抑制乳腺癌细胞SKBR3细胞增殖能力并促进其凋亡,Erk和Akt蛋白磷酸化水平降低。结论:HE4通过影响Erk和Akt信号通路促进乳腺癌发生发展。 周岩 宋伟杰 张飞 冀为 田然 牛瑞芳 黎小沛关键词:乳腺癌 增殖 凋亡 Anxa2和P-gp蛋白相互作用对多药耐药乳腺癌细胞迁移与侵袭影响的研究 被引量:6 2012年 目的:探讨Anxa2和P-gp蛋白相互作用对多药耐药乳腺癌细胞迁移与侵袭的影响。方法:采用小干扰RNA技术下调人多药耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR中P-gp的表达,并筛选稳定的单克隆细胞株;利用噻唑蓝(MTT)比色法和Transwell实验研究P-gp的表达对MCF-7及其耐药细胞MCF-7/ADR的增殖、迁移和侵袭能力的影响;利用免疫沉淀和免疫荧光分析多药耐药细胞中Anxa2和P-gp的相互关系。结果:蛋白印迹法检测发现,Anxa2和P-gp在耐药乳腺癌细胞中均高表达;MCF-7/ADR与其亲本细胞MCF-7相比,迁移和侵袭能力明显增强;MCF-7/ADR细胞中P-gp的表达被抑制后,其迁移和侵袭能力显著下降,并且差异有统计学意义,P<0.05。免疫沉淀证实,Anxa2和P-gp之间存在相互作用;免疫荧光发现,Anxa2和P-gp在细胞膜上存在很好的共定位。结论:降低P-gp的表达可以明显抑制耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR的迁移和侵袭能力,Anxa2和P-gp之间存在较好的共定位和相互作用。提示Anxa2和P-gp的相互作用有可能对增强多药耐药乳腺癌细胞的侵袭转移能力起到一个重要的作用。 张海嫦 张飞 武冰 韩敬华 杨毅 冀为 周岩 牛瑞芳关键词:乳腺肿瘤 P-GP 多药耐药 肿瘤浸润 外周血T淋巴细胞亚群与不同分子分型乳腺癌患者无病生存的相关性研究 被引量:17 2014年 目的:观察不同分子分型浸润性乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群的表达情况,分析乳腺癌患者免疫状态与不同分子分型乳腺癌的相关性。方法:选取2008年1月至2009年8月初诊于天津医科大学肿瘤医院乳腺中心的患者372例。均对入组患者采血,采用流式细胞术分析外周血的T淋巴细胞的亚群CD4+T细胞、CD8+T细胞、调节性T细胞(Treg细胞)及自然杀伤(NK)细胞水平。分析CD4+/CD8+比值的大小、调节性T细胞、自然杀伤细胞的免疫相关指标与乳腺癌不同分子分型Luminal A、Luminal B、HER-2过表达型以及三阴性乳腺癌患者临床病理特征之间的相关性。结果:372例乳腺癌患者中,Luminal A型为133例(35.8%)、Luminal B型为124例(33.3%)、HER-2过表达型为48例(12.9%)、三阴性为67例(18.0%)。在三阴性乳腺癌中外周血CD4+/CD8+比值越高,患者的无病生存时间越长(P<0.05),Treg细胞含量越低,患者的无病生存时间也越长(P<0.05),但CD4+/CD8+比值与Treg细胞含量并非三阴性乳腺癌无病生存的独立预后因素。而其他三种类型的乳腺癌中,CD4+/CD8+比值、Treg细胞含量与患者无病生存率无关(P>0.05)。NK细胞含量与以上4种分子分型乳腺癌患者的无病生存率并无明显的相关性(P>0.05)。结论:外周血CD4+/CD8+比值、Treg细胞含量可有效预测三阴性乳腺癌的无病生存率,但并非其独立的预后因素。 冀为 周岩 牛瑞芳关键词:外周血 免疫细胞 TREG细胞 NK细胞