陈柳
- 作品数：15 被引量：40H指数：3
- 供职机构：北京农学院更多>>
- 发文基金：北京市教育委员会科技发展计划面上项目北京市属高等学校人才强教计划资助项目北京市教委资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 草莓斑驳病毒的快速检测试剂盒及方法
- 本发明公开了检测草莓斑驳病毒（Strawberry？mottle？virus）的专用引物及其应用。检测草莓斑驳病毒（Strawberry？mottle？virus）的专用引物，由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所...
- 尚巧霞陈柳魏艳敏陈笑瑜邢冬梅刘正坪赵晓燕冉策杨建强胡学军陈明远祝宁韩成贵
- 文献传递
- 草莓轻型黄边病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：26
- 2015年
- 【目的】草莓轻型黄边病毒(Strawberry mild yellow edge virus,SMYEV)是侵染草莓的重要病毒,严重影响草莓果实的产量和品质。研究旨在建立利用反转录等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测SMYEV的方法。【方法】根据SMYEV外壳蛋白基因3′端保守序列设计4个特异性引物SMYEV-FIP(5′-CAGATCAGCGACAATTTGGACTCCTGAGGAACTTGCTGCT-3′)、SMYEV-BIP(5′-GCTTTGTC GGGGATCCTGGGAAGGCTAAGTCGAAGAGACC-3′)、SMYEV-F3(5′-TCAAGTTGGTGACCCTTTCC-3′)和SMYEV-B3(5′-CGAGGAAC CAATGTCGTAGC-3′)。对RT-LAMP检测体系中的条件进行优化,设置反应温度为60、61、62、63、64、65℃,反应时间为30、45、60、75 min,分别设置引物SMYEV-FIP/BIP浓度为1.0、1.2、1.4、1.6、1.8μmol·L-1,引物SMYEV-F3/B3浓度0.1、0.15、0.2、0.25、0.3μmol·L-1,设置Mg2+浓度为2、4、6、8、10 mmol·L-1,d NTPs浓度为0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mmol·L-1,betaine浓度为0、0.4、0.8、1.0、1.2、1.4 mol·L-1,DTT浓度为2.0、2.4、2.8、3.2、3.6、4.0μmol·L-1等,并对以上不同反应条件进行检测,确定优化后的RT-LAMP检测体系。选用其他常见的草莓病毒以及健康草莓植株叶片中的RNA作为模板,对RT-LAMP体系的特异性进行测定;将SMYEV的RNA进行10倍梯度逐级稀释,分别获得RNA原液、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6和10-7不同稀释液作为模板,比较RT-LAMP和RT-PCR的检测灵敏度。RT-LAMP反应产物可以进行电泳和紫外成像检测,阳性样品出现瀑布状条带,阴性样品无条带,或者在反应产物中加入SYBR green I核酸染料,直接观察检测,阳性样品为绿色,阴性样品为橙色。【结果】建立了一种特异性检测SMYEV的RT-LAMP方法,经过各反应条件优化后的检测体系为1.0μmol·L-1SMYEV-FIP/BIP、0.1μmol·L-1 SMYEV-F3/B3、4 mmol·L-1 Mg2+、1.6 mmol·L-1 d NTPs、0.4 mol·L-1 betaine、2.0μmol·L-1DTT,60℃反应45 min。选用SMYEV、草莓镶脉病毒(Strawberry vein ban
- 陈柳尚巧霞陈笑瑜邢冬梅冉策魏艳敏赵晓燕刘正坪
- 草莓镶脉病毒的快速检测试剂盒及方法
- 本发明公开了检测草莓镶脉病毒（Strawberry vein banding virus）的专用引物及其应用。检测草莓镶脉病毒（Strawberry vein banding virus）的专用引物，由序列表的序列1所示...
- 尚巧霞陈柳陈笑瑜邢冬梅魏艳敏刘正坪赵晓燕冉策杨建强胡学军陈明远祝宁韩成贵
- 文献传递
- 草莓皱缩病毒的快速检测试剂盒及方法
- 本发明公开了检测草莓皱缩病毒(Strawberry？crinkle？virus,SCV)的专用引物及其应用。检测草莓皱缩病毒(Strawberry？crinkle？virus,SCV)的专用引物，由序列表的序列1所示DN...
- 尚巧霞冉策陈柳陈笑瑜邢冬梅胡学军魏艳敏刘正坪韩成贵
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- 草莓轻型黄边病毒的快速检测试剂盒及方法
- 本发明公开了检测草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge virus）的专用引物及其应用。检测草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge virus）的专用引...
- 尚巧霞陈柳崔高峰祝宁 冉策陈笑瑜邢冬梅 韩成贵魏艳敏赵晓燕杨瑞刘正坪张志勇
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- 草莓镶脉病毒的快速检测试剂盒及方法
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- 尚巧霞陈柳陈笑瑜邢冬梅魏艳敏刘正坪赵晓燕冉策杨建强胡学军陈明远祝宁韩成贵
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- 草莓皱缩病毒的快速检测试剂盒及方法
- 本发明公开了检测草莓皱缩病毒(Strawberry crinkle virus,SCV)的专用引物及其应用。检测草莓皱缩病毒(Strawberry crinkle virus,SCV)的专用引物，由序列表的序列1所示DN...
- 尚巧霞冉策陈柳陈笑瑜邢冬梅胡学军魏艳敏刘正坪韩成贵
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- 草莓轻型黄边病毒的快速检测试剂盒及方法
- 本发明公开了检测草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge virus）的专用引物及其应用。检测草莓轻型黄边病毒（Strawberry mild yellow edge virus）的专用引...
- 尚巧霞陈柳崔高峰祝宁 冉策陈笑瑜邢冬梅 韩成贵魏艳敏赵晓燕杨瑞刘正坪张志勇
- 文献传递
- 桃褐腐病菌激活蛋白对植物的促生作用研究
- 2014年
- 为了解桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)激活蛋白对植物的促生作用,采用硫酸铵沉淀法对桃褐腐病菌的总蛋白进行了粗分离,并分析了各组分对小麦和小白菜种子发芽和生长的影响。结果表明,硫酸铵饱和度为60%时,桃褐腐病菌蛋白质量浓度最高,可达1 403.0μg/mL。在各种分离到的蛋白组分中,饱和度为40%、50%、60%的硫酸铵盐析得到的蛋白组分对小麦和小白菜种子的发芽和生长具有促进作用,说明这些组分中含有能促进小麦和小白菜生长的激活蛋白。
- 陈柳刘正坪刘素花魏艳敏尚巧霞赵晓燕
- 关键词：桃褐腐病菌激活蛋白促生作用
- 京郊设施蔬菜黄瓜花叶病毒的检测
- 蔬菜作物易于感染各种病毒,病毒病的发生已经成为蔬菜作物栽培生产的限制因素(尚巧霞,2009).黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)寄主范围非常广泛,是侵染我国十字花科、茄科、豆科及葫芦科等蔬...
- 陈柳冉策陈笑瑜邢冬梅胡学军尚巧霞
- 关键词：ELISART-PCRCMV
