郭巍
- 作品数:108 被引量:246H指数:9
- 供职机构:河北农业大学更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程文化科学更多>>
- 防治西葫芦和黄瓜白粉病的生物制剂的筛选被引量:17
- 2016年
- 瓜类白粉病是蔬菜上的重要病害之一,为加大对该病害的生物防治力度,本研究采用课题组研发的1×10^9cfu/g玫瑰黄链霉菌水剂和10亿芽胞/g枯草芽胞杆菌悬浮剂以及市场上常用的枯草芽胞杆菌、哈茨木霉菌、寡雄腐霉、武夷菌素、多抗霉素等多种生物制剂进行田间药效试验,比较几种生物制剂的防治效果。结果表明,供试生物制剂对西葫芦白粉病的防效为57.65%~84.98%,其中3%多抗霉素水剂600倍液的防效最好,为84.98%,且具有明显的促生长作用,增产率达12.65%。其次为1 000亿芽胞/g枯草芽胞杆菌可湿性粉剂(武汉天惠)400倍液、2%武夷菌素水剂600倍液和3×10^8 cfu/g哈茨木霉菌可湿性粉剂300倍液,可作为西葫芦白粉病防治的选用药剂。1×10^9 cfu/g玫瑰黄链霉菌水剂对西葫芦和黄瓜白粉病均具有较好的防效,分别为78.68%和73.59%,具有开发和应用的市场价值。
- 毕扬张艳杰郭巍张汀李华义韩兴王成顺李亚宁
- 关键词:瓜类白粉病生物制剂玫瑰黄链霉菌多抗霉素
- 一种真菌培养基及其应用
- 本申请涉及一种真菌培养基及其的应用,特别是在用于培养草莓褐色叶斑病菌产生菌丝中的应用。其中所述真菌培养基的配方如下:以总体积1000ml计,200ml至300ml的草莓果实的榨汁滤液,150克至300克马铃薯煮熟后的滤液...
- 毕扬郭巍张桂军杨宝东张伟宗召莉
- Cry8Ea2杀虫蛋白对华北大黑鳃金龟幼虫中肠微生物菌群影响的研究
- [目的]Bt Cry8Ea2杀虫蛋白对华北大黑鳃金龟具有高杀虫活力,本研究通过比较正常饲喂和饲喂Cry8Ea2蛋白的华北大黑鳃金龟二龄幼虫中肠微生物菌群变化,揭示Cry8Ea2蛋白对微生物菌群的影响,为探讨Cry蛋白杀虫...
- 王伟郭巍
- 关键词:华北大黑鳃金龟PCR-RFLP
- 棉铃虫羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及活性分析被引量:7
- 2011年
- 【目的】克隆棉铃虫中肠羧酸酯酶基因,了解该酶的分子特性,为研究棉铃虫抗药性机理奠定基础。【方法】制备抗血清,对棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hübner))中肠cDNA表达文库进行免疫筛选,得到编码棉铃虫羧酸酯酶基因的cDNA克隆,利用生物信息学软件和网站进行序列分析,构建原核表达载体进行表达,并以α-醋酸萘酯溶液为底物进行活性测定。【结果】测序分析表明,羧酸酯酶基因hc3(GenBank登录号:GU119888)全长2 896 bp,编码795个氨基酸。羧酸酯酶HC3的等电点pI为3.94,活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):Ser204,Glu331,His444;第545—773位包含大量高度重复的Gly,Asp、Glu(GDE区域)构成亲水区。该基因在大肠杆菌BL21中成功表达约100 kD的HC3蛋白,检测表达的羧酸酯酶活性为0.32 mmol/100μL酶液。【结论】成功克隆、表达了棉铃虫羧酸酯酶蛋白HC3,并发现GDE亲水结构域。为进一步了解羧酸酯酶的三维结构及其水解作用并设计新型杀虫剂提供了可能。
- 刘小民李杰郭巍张霞李新娜
- 关键词:棉铃虫CDNA表达文库羧酸酯酶活性分析
- CA培养基在用于培养草莓褐色叶斑病菌产孢中的应用
- 本申请涉及CA培养基在用于培养草莓褐色叶斑病菌产孢中的应用,其中所述CA培养基的配方如下:以总体积1000ml计,100克至400克胡萝卜的榨汁液,以及13克至25克的琼脂。
- 毕扬张桂军郭巍杨宝东张伟宗召莉
- 文献传递
- 苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒增效作用的研究
- 丫纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)能够增强粘虫痘病毒(PsEPV)的侵染力。将供试样品悬液滴在约50mg(一头虫24h内可取食完)一块的人工饲料上,接入4龄的美洲粘虫(Pseudaletia unipucta)幼虫,进...
- 李国勋郭巍李长友宋福平王平
- 关键词:昆虫痘病毒
- 苏云金杆菌固体发酵工艺及其在农业中的应用
- 本发明属于微生物、土壤肥料和植物保护技术领域。秸秆还田是一项培肥地力和增产增效的农艺措施。秸秆在土壤中腐解时间长将造成土壤空隙大,容易形成死苗、冻害、蛴螬等地下害虫孳生等生产问题。本发明提供一种以玉米芯为主要原料,包含保...
- 陆秀君刘文菊耿丽平郭巍刘云飞杨军玉李瑞军陶晡李静刘廷辉
- 文献传递
- 苏云金杆菌与高效氯氰菊酯对美国白蛾的协同作用被引量:10
- 2012年
- 为了明确苏云金杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)和高效氯氰菊酯的协同作用,采用Bt预处理及直接混用2种方式施药,室内饲毒法测定了2种药剂对美国白蛾Hyphantria cunea(Drury)2龄幼虫的活性,同时研究了高效氯氰菊酯对Bt生长曲线的影响。结果表明:试虫先用每mL含1×106个孢子的Bt S19菌悬液预处理,1 d后再用系列浓度的高效氯氰菊酯处理,其48 h的LC50值为0.76 mg/L,而未经预处理,仅用高效氯氰菊酯处理48 h的LC50值为1.28 mg/L;2种处理在高效氯氰菊酯质量浓度为2.25 mg/L时对试虫的半致死时间(LT50值)分别为9.2 h和34.7 h,两者间增效作用明显。对于直接混用,采用1×106个/mL的Bt S19与6 mg/L的高效氯氰菊酯混剂处理,增效作用明显,72 h的共毒系数为122.5,此后再增加高效氯氰菊酯的浓度则表现出轻微的拮抗作用。高效氯氰菊酯处理可使Bt生长对数期延迟,且浓度越高影响越大,说明高效氯氰菊酯可影响Bt芽孢萌发,使菌体增殖延迟。研究表明,先用Bt预处理后再使用高效氯氰菊酯对美国白蛾的作用效果优于二者直接混用。
- 刘云飞陆秀君刘廷辉李瑞军赵焕丽郭巍
- 关键词:美国白蛾高效氯氰菊酯苏云金杆菌
- 暗黑鳃金龟碱性磷酸酶HpALP的基因克隆、表达及其与Bt Cry8Ea3的结合特性
- 2022年
- 【目的】明确苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)晶体蛋白对暗黑鳃金龟Holotrichia parallela幼虫的杀虫机制。【方法】基于暗黑鳃金龟转录组数据,PCR克隆暗黑鳃金龟碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)基因HpALP全长cDNA序列;利用原核表达系统在体外表达HpALP,并进行Western blot检测;利用qRT-PCR测定HpALP在暗黑鳃金龟3龄第2天幼虫不同组织(前肠、中肠、直肠、回肠、马氏管、脂肪体和体壁)中的表达水平;利用配体印记实验及ELISA技术对HpALP蛋白与苏云金芽胞杆菌晶体蛋白Cry8Ea3体外结合特性进行分析。【结果】得到了暗黑鳃金龟HpALP全长cDNA(GenBank登录号:MZ004964),长1536 bp,编码512个氨基酸,预测蛋白质分子量为57.32 kD,等电点为4.70;HpALP与食粪金龟Onthophagus taurus ALP的氨基酸序列一致性最高;原核表达获得重组蛋白HpALP,经Western blot检测HpALP重组蛋白在IPTG诱导8 h时的表达量最高。qRT-PCR分析的组织表达谱结果表明,HpALP在幼虫前肠中丰度最高。HpALP重组蛋白可以与Cry8Ea3特异结合,解离常数Kd值为76.21±26.44 nmol/L,最大亲合力Bmax值为0.59±0.068;而HpALP重组蛋白与对照Cry1Ab35不结合,Kd值为142.50±137.30 nmol/L,Bmax值为0.013±0.005。【结论】分离鉴定了暗黑鳃金龟HpALP蛋白,它与Bt Cry8Ea3亲和力强,推断其为Cry8Ea3的受体蛋白。研究结果为明确Cry8Ea3蛋白对暗黑鳃金龟的作用机制提供了理论依据。
- 乔英翠赵丹王哲陆秀君郭巍郭巍
- 关键词:暗黑鳃金龟碱性磷酸酶ELISA
- 甜菜夜蛾肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA的克隆及功能鉴定被引量:1
- 2022年
- 【目的】本研究旨在阐明甜菜夜蛾Spodoptera exigua幼虫体内肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition protein,PGRP)在响应苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)感染过程中的功能。【方法】利用PCR方法扩增甜菜夜蛾幼虫肽聚糖识别蛋白基因SePGRP-SA全长cDNA;采用qRT-PCR分析SePGRP-SA在甜菜夜蛾不同发育阶段(卵、1-5龄幼虫、预蛹和蛹)及4龄幼虫不同组织(中肠、马氏管、围食膜、脂肪体、血淋巴和表皮)中的表达。通过RNAi技术沉默SePGRP-SA基因72 h后,qRT-PCR检测SePGRP-SA沉默效率及甜菜夜蛾4龄幼虫中肠抗菌肽相关基因(Ceropin,Attacin和Defensin)和细菌载量的变化。RNAi沉默SePGRP-SA 24 h后,以苏云金芽胞杆菌菌株Bt-GS57饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫0,24,48,72,96和120 h,计算幼虫校正死亡率;饲喂甜菜夜蛾4龄幼虫Bt-GS57后0,24,48和72 h,利用qRT-PCR检测中肠SePGRP-SA,Ceropin,Attacin和Defensin的相对表达量。【结果】克隆获得甜菜夜蛾SePGRP-SA全长DNA(GenBank登录号:MW265930),开放阅读框长576 bp,编码191个氨基酸,其编码蛋白的预测分子量为21.59 kD。序列分析结果表明,SePGRP-SA具有典型的PGRP和Ami2保守结构域,信号肽为19个氨基酸,为分泌型蛋白;系统进化分析发现,SePGRP-SA与斜纹夜蛾Spodoptera litura的SlPGRP亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达91.1%。发育表达谱结果表明SePGRP-SA在甜菜夜蛾4和5龄幼虫、预蛹和蛹中高表达;组织表达谱结果表明,SePGRP-SA在4龄幼虫各组织中均表达,其中以血淋巴中表达量最高。与注射dsEGFP(对照)相比,注射dsSePGRP-SA的甜菜夜蛾4龄幼虫在72 h时中肠SePGRP-SA基因表达量下调了95.26%,Cecropin,Attacin和Defensin表达量显著下调,中肠细菌载量显著升高。注射dsEGFP和dsSePGRP-SA的甜菜夜蛾4龄幼虫饲喂Bt-GS57,72 h时幼虫校正死亡率分别为50.00%和73.33%,表明幼虫对Bt-GS57的敏感性明显增加。甜菜夜蛾4龄幼虫取食Bt-GS57后,中肠SePGRP-SA,Cecr
- 李亚子赵丹郭晓昌吴涵刘兆瑞郭巍
- 关键词:甜菜夜蛾免疫调控肽聚糖识别蛋白RNAI