赵东霞
- 作品数:8 被引量:3H指数:1
- 供职机构:南京林业大学更多>>
- 发文基金:江苏高校优势学科建设工程资助项目引进国际先进农业科技计划江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 催化槲皮素生成异鼠李素的重组菌构建及其转化条件优化
- 2017年
- 异鼠李素是一种黄酮类化合物,广泛存在于银杏、沙棘、旱柳和枸杞等植物中,具有多种药理作用。植物来源的O-甲基化酶能对槲皮素羟基进行甲基化,因而构建重组菌高效表达O-甲基化酶可应用于催化槲皮素生成异鼠李素。笔者对大豆来源的O-甲基化酶SOMT-9编码基因进行了密码子优化,其密码子适应指数(CAI)从优化前的0.59,提高为0.87。将优化后的基因SysOMT-9插入表达载体pGEX-2T,构建获得重组质粒pGEX-SysOMT。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),通过改变诱导温度及诱导剂浓度,实现了SOMT-9可溶性表达。在此基础上对其转化条件进行了优化,其最佳转化条件为:起始菌量OD600为10,转化温度为30℃,诱导剂IPTG用量为0.01mmol/L,助溶剂DMSO质量分数为1%,1%甘油,40μmol/L的S-腺苷基甲硫氨酸和1mmol/L槲皮素。在此条件下,重组菌在12h内,可将127mg/L的槲皮素,转化生成133mg/L异鼠李素,摩尔转化率为42%,是优化前的7.8倍。
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- 关键词:槲皮素异鼠李素重组菌
- α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用
- α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用,属于基因工程技术及生物医药领域,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶对人参皂苷Rc的转化能力强,本发明所述α-L-阿拉伯呋喃糖...
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- 文献传递
- 一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用
- 一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述β-葡萄糖苷酶热稳定性优异,能耐受高温;本发明所述β-葡萄糖苷酶具有较高β-1,6-糖苷键水解能力同时具有较强的α-1,6-阿拉伯吡...
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- 一种酶法制备稀有人参皂苷Rh1的方法
- 一种酶法制备稀有人参皂苷Rh1的方法,利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和黑曲霉(Aspergillus niger)的α-鼠李糖苷酶,降解人参皂苷Re生产Rh1。本发明通过酶法催化人参...
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- 文献传递
- α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用
- α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶及其在制备人参皂苷Rd中的应用,属于基因工程技术及生物医药领域,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶对人参皂苷Rc的转化能力强,本发明所述α‑L‑阿拉伯呋喃糖...
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- 一种β‑葡萄糖苷酶及其制备方法与应用
- 一种β‑葡萄糖苷酶及其制备方法与应用,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述β‑葡萄糖苷酶热稳定性优异,能耐受高温;本发明所述β‑葡萄糖苷酶具有较高β‑1,6‑糖苷键水解能力同时具有较强的α‑1,6‑阿拉伯吡...
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- 一种酶法制备稀有人参皂苷20(S)-Rg3的方法
- 一种酶法制备稀有人参皂苷20(S)-Rg3的方法,利用来源于Thermotoga petrophila的β-葡萄糖苷酶和Thermotoga thermarum DSM 5069的阿拉伯呋喃糖苷酶,降解人参皂苷Rb1、R...
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