贾玉成
- 作品数:6 被引量:14H指数:2
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- 皖贝母茎尖脱毒组织培养技术研究
- 2009年
- 应用ELISA方法对茎尖培养和热处理结合茎尖培养脱毒生产无病毒皖贝母种苗效果进行研究,结果表明,茎尖培养<0.5 mm的茎尖无法成活;1~2 mm茎尖虽然成活率高但没有脱毒效果;0.8~1 mm茎尖的脱毒率为20%;0.5~0.8 mm的茎尖脱毒率为40%;0.3~0.5 mm茎尖脱毒率为60%。0.8~1.0 mm茎尖经50±1℃热处理20 min脱毒效果最好,脱毒率达100%;愈伤组织和不定芽的诱导需要不同的激素配比,诱导愈伤组织的合适培养基为:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 4 mg/L,诱导不定芽并能一次成苗的合适培养基为:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,平均每个外植体产生2~3个不定芽。
- 杜宇韦传宝贾玉成
- 关键词:皖贝母脱毒病毒检测
- 芋花叶病毒检测试剂盒的研制被引量:9
- 2009年
- 用IPTG诱导融合表达芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DMV)CP基因的菌株,通过12%SDS.PAGE和5%-20%梯度SDS—PAGE二次制备电泳获得纯化的CP免疫家兔,获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清.硫酸铵沉淀初步提取IgG,然后用Protein A—Red Sepharose亲和层析进一步纯化IgG,IgG与甘油1:1混合获得效价1:3100的一抗,将一抗、羊抗兔二抗和4-硝基苯基磷酸二钠组成DMV检测试剂盒.用研制的检测试剂盒对芋、魔芋和马蹄莲叶片样品的间接ELISA检测表明,DMV在田间普遍发生,并确定研制的试剂盒完全可用于DMV检测.
- 韦传宝贾玉成杜宇
- 关键词:芋花叶病毒抗血清制备试剂盒研制
- 韭葱黄条病毒六安分离物CP基因原核表达与抗体制备
- 2009年
- 根据已报道的韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计引物,扩增LYSV六安分离物的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的LYSV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为84.0%~95.8%,相应推测出的氨基酸序列同源性为86.8%~97.6%。将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western blot分析对CP具有高度特异性。硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1∶3700的一抗,可用于田间LYSV病样检测。
- 贾玉成韦传宝
- 关键词:原核表达抗血清制备
- 洋葱黄矮病毒检测试剂盒的研制
- 2009年
- 根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)序列设计引物,扩增洋葱黄矮病毒(OYDV)六安分离物外壳蛋白(CP)基因。序列同源性分析结果袁明,与目前已报道的OYDV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为84.0%-95.8%,相应推测的氨基酸序列同源性为86.8%~97.6%。将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中诱导表达。通过12%SDS—PAGE和5%-20%梯度SDS—PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Westernblot分析对CP具有高度特异性。硫酸铵沉淀初步IgG,然后用Protein A-RedSepharose亲和层析进一步纯化IgG,IgG与甘油1:1混合获得效价1:4800的一抗。将一抗、羊抗兔二抗和4-硝基苯基磷酸二钠组成OYDV检测试剂盒,可用于田间OYDV病样检测。
- 贾玉成韦传宝
- 关键词:CP基因原核表达抗血清制备
- 大豆花叶病毒CP基因原核表达与抗血清制备被引量:4
- 2009年
- 根据已报道的大豆花叶病毒(SMV)序列设计引物,扩增SMV的外壳蛋白(CP)基因,序列同源性分析结果表明,与目前已报道的SMV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为85.0%~96.8%,相应推测的氨基酸序列同源性为87.9%~98.9%。将CP基因插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE两次制备电泳纯化诱导产物,免疫家兔获得抗CP血清,Western blot分析对CP具有高度特异性。硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1∶3800的一抗,可用于田间SMV病样检测。
- 陈文华韦传宝贾玉成祁伟
- 关键词:大豆花叶病毒CP基因原核表达抗血清制备
- 三种大蒜病毒六安分离物CP基因克隆及检测试剂盒的研制
- 大蒜病毒病害是造成大蒜产量损失和品质下降的重要原因,每年因大蒜病毒造成的损失巨大。近年来,随着各国间贸易往来的日趋频繁,使得大蒜病毒在全球范围大面积传播,给大蒜生产带来了巨大的危害。侵染大蒜的植物病毒主要包括香石竹潜隐病...
- 贾玉成
- 关键词:原核表达抗血清制备间接ELISA
- 文献传递