葛新顺
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- CD22分子的生物学功能研究进展被引量:1
- 2007年
- CD22分子普遍存在于正常B细胞及B细胞恶性肿瘤,其对BCR细胞信号传导的抑制作用已被广泛认可。近些年来对CD22分子的研究主要集中在胞内信号传导通路、生物学功能、抗体靶向治疗上,并且取得了许多突破性的进展。虽然CD22分子的胞内信号传导尤其是核内信号的传导通路至今还不是很明确,但在血液系统恶性肿瘤的靶向治疗方面有广阔的应用前景。
- 葛新顺廖晓龙
- 关键词:CD22SIA信号传导靶向治疗NHL
- 用于靶向结合髓系白血病细胞的抗CD33的工程抗体及其表达载体和用途
- 本发明公开了一种用于靶向结合髓系白血病细胞的抗CD33的工程抗体及其表达载体和用途,由SEQ ID NO.3重链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO.4轻链可变区氨基酸序列组成。应用RT-PCR技术,成功的从杂交瘤细胞中...
- 廖晓龙陈小军王洋王敏左玉丰郭桂庆葛新顺屈浩王建祥韩忠朝
- 文献传递
- 抗人CD33单链抗体的基因构建、表达及其生物活性检测被引量:4
- 2007年
- 目的:构建及表达抗人CD33单链抗体(抗CD33-scFv)基因,并检测其生物活性。方法:采用RT-PCR方法从分泌抗人类白细胞表面分化抗原CD33单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中克隆出VL和VH可变区基因,再通过重叠延伸拼接(splice-overlap extension)PCR方法在VH和VL可变区基因之间引入柔性连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗人CD33-scFv基因。将其克隆至原核表达载体PET-28a(+)并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达。结果:SDS-PAGE和Westernblot分析结果表明,抗CD33-scFv在Rosetta(DE3)菌中获得高效表达,重组蛋白的相对分子质量(Mr)为30000,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经过溶解包涵体,镍柱亲和层析纯化和体外复性过程,获得了高纯度的scFv片段。流式细胞术(FCM)分析结果证实抗CD33-scFv可与人类白细胞表面的分化抗原CD33结合,保留了鼠源性mAb的与CD33结合的活性。结论:重组抗人CD33-scFv基因构建与表达成功,并且通过复性得到有生物活性的scFv,为下一步针对髓系恶性肿瘤的靶向治疗奠定了基础。
- 陈小军王洋屈浩葛新顺左玉丰廖晓龙
- 关键词:CD33SCFV复性