罗深秋
- 作品数：134 被引量：346H指数：9
- 供职机构：南方医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- EGFR反义RNA的转染对人类鼻咽癌CNE-2细胞EGFR的表达下调及恶性表型的抑制(英文)被引量：1
- 2003年
- 目的利用反义RNA 抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应。方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选并分离阳性克隆,将两个EGFR 反义cDNA转染的克隆细胞命名为CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8,而空载体转染的细胞命名为CNE-2/pLXSN。125I-EGF配体结合分析细胞膜上EGFR的表达,台盼蓝染色法测定细胞生长的改变,并用软琼脂集落形成实验检测细胞转化,最后,将筛选的各组阳性克隆细胞分别注射入裸鼠皮下,不同时间观察肿瘤生长的抑制改变及肿瘤的转移状况。结果配体结合实验结果显示,两个选择的克隆CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8细胞表面EGFR的数量分别较未转染细胞CNE-2下降18%、45%,表明EGFR反义RNA的表达下调了细胞膜上EGFR的表达;同时,EGFR反义RNA表达的CNE-2细胞生长速率和软琼脂生长能力也较对照组细胞明显降低。注射入裸鼠皮下后,EGFR反义RNA表达的阳性克隆细胞表现出肿瘤生长减慢,淋巴结和肺转移能力也明显降低。结论这些实验结果提示EGFR 反义cDNA转染的CNE-2细胞能下调EGFR的过量表达并部分抑制鼻咽癌的恶性表型,这为进一步阐明EGFR在鼻咽癌的发生。
- 邓凡王瑜曾方银邹志鹏白晓春陆地柯志勇罗深秋
- 关键词：鼻咽癌CNE-2细胞EGFR反义RNA
- 磷脂酶C-γ1在人胚组织中的表达被引量：3
- 2001年
- 目的研究磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)在人胚组织中的表达情况。方法收集人胚组织(包括软骨、软骨膜、骨骼肌)并行石蜡包埋及切片,采用免疫细胞化学ABC染色法观察人胚组织细胞中PLC-γ1的表达情况。结果PLC-γ1在这几种细胞中均有较强的表达,主要位于胞质中。结论PLC-γ1相关的细胞内信号传递途径对于人早期胚胎细胞的发育、增殖具有重要的生物学意义。
- 侯云霞罗深秋冀群升
- 关键词：磷脂酶C-Γ1胚胎组织免疫细胞化学
- 应用M13引物PCR指纹法分析假丝酵母菌氟康唑耐药性被引量：1
- 2003年
- 目的探讨M13微卫星引物PCR指纹法用于假丝酵母菌氟康唑耐药性基因分型的可行性。方法采用纸片扩散法分析假丝酵母菌氟康唑耐药性,并进一步对41株假丝酵母菌进行M13引物PCR指纹分析,采用RAPD200软件邻接法(neighbour joining,NJ)聚类分析电泳带型模式。结果41例主要从痰液和阴道分泌物中分离的假丝酵母菌标本中中,氟康唑药物敏感11株(26.8%),依赖8例(19.5%),耐药22例(53.7%),PCR指纹分析至少可检测到12种不同的条带,条带数目从2条到12条不等,电泳带型模式与感染部位和氟康唑药物反应性有关。结论假丝酵母菌氟康唑耐药性菌珠所占比例较大,M13微卫星引物PCR指纹法可用于假丝酵母菌的分子流行病学调查和氟康唑耐药性基因分型。
- 王应斌王宏郭辉玉赵永忠罗深秋
- 关键词：假丝酵母菌氟康唑耐药性纸片扩散法抗真菌药物
- 慢病毒导入的PLCγ1 siRNA对人大肠癌细胞增殖和黏附的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:制备在人大肠癌细胞系LoVo中稳定抑制PLCγ1(phospholiase C-gamma 1)的重组病毒,建立PLCγ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法:制备产生PLγ1 siRNA分子的重组慢病毒,在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应用Western-blot和RT-PCR对细胞中PLCγ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析,XTT法和黏附能力测定分别检测其对细胞增殖和黏附的影响。结果:PLCγ1 siRNA显著下调了LoVo细胞中PLCγ1的表达,所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,LoVo细胞的黏附能力显著降低,细胞增殖无明显改变。结论:研究证实了 PLCγ1基因可显著地影响大肠癌LoVo细胞的黏附能力,为利用PLCγ1介导的信号通路进行肿瘤基因治疗提供了实验依据。
- 谭丽罗深秋林骏凌朝辉
- 关键词：慢病毒小干扰RNA增殖
- 磷脂酶C-γ_2与信号转导被引量：3
- 1999年
- 白洁王宏罗深秋冀群升
- 关键词：信号转导染色体定位分子结构
- 稳定表达PLCγ1 siRNA慢病毒的构建及对人大肠癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的制备在人大肠癌系LoVo中稳定抑制磷脂酶C(PLC)γ1的重组慢病毒,建立PLCγ1表达降低的细胞系,以便客观研究该基因的作用。方法制备产生PLCγ1siRNA分子的重组慢病毒,在慢病毒感染LoVo细胞后以杀稻瘟菌素筛选稳定表达细胞系。应用Western-blot和RT-PCR对细胞中PLCγ1的蛋白和mRNA表达水平进行分析。应用流式细胞仪分析PLCγ1siRNA对细胞凋亡的影响。结果和结论PLCγ1siRNA显著下调了LoVo细胞中PLCγ1的表达,所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,显著增加了5-FU诱导的凋亡。
- 谭丽罗深秋林骏
- 关键词：慢病毒LOVO细胞小干扰RNA凋亡
- dsRNA阻断大鼠骨髓源性神经干细胞Hes5表达的实验研究被引量：5
- 2004年
- 目的 观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率，并对其影响因素进行初步探讨。方法 将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞，通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞，应用人工合成的dsRNA于不同浓度转染神经干细胞，Western bloting检测dsRNA是否能阻断转录因子Hes5的表达，0．5％锥虫蓝法测定各浓度组中培养细胞活力。结果 200、300nmol／L浓度的dsRNA能特异有效地阻断Hes5的表达，而50～200nmol／L浓度的dsRNA有利于干细胞存活。结论 dsRNA能在神经干细胞内启动RNA干扰作用，适宜浓度的dsRNA能在特异有效地阻断内源性基因的表达的同时，最大限度地保持细胞活力。
- 王海燕徐如祥姜晓丹罗深秋
- 关键词：DSRNA骨髓源性神经干细胞基因表达
- 间隙连接功能多样性:连接蛋白基因敲除研究被引量：2
- 2001年
- 编码细胞间间隙连接通道结构蛋白的基因是称为连接蛋白 (connexin ,Cx)基因的多基因家族 ;间隙连接蛋白基因有 2 0种 ,且多数细胞同时表达多种连接蛋白 ,其功能研究较为复杂 ;小鼠 7种连接蛋白基因的敲除为研究连接蛋白功能多样性提供了良好模型 。
- 白晓春刘安玲罗深秋
- 关键词：连接蛋白基因敲除小鼠
- 苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡被引量：14
- 2008年
- 目的体外研究苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随的细胞凋亡改变。方法体外培养K562细胞,采用不同浓度的苦参碱诱导K562细胞4d,分别采用倒置显微镜、透射电子显微镜观察诱导前后细胞的形态学和超微结构改变,进一步采用免疫细胞化学方法检测细胞周期调控蛋白p27kip1表达变化。结果与阴性对照组K562细胞相比,0.10g/L浓度的苦参碱诱导后K562细胞形态学和超微结构均显示有凋亡特征,同时细胞内p27kip1蛋白表达明显增加。结论苦参碱在体外诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡,可能与p27kip1蛋白表达增加相关。
- 张翠梅高建慧李德乐李璟施玉麒林骏罗深秋
- 关键词：苦参碱K562细胞细胞分化细胞凋亡
- 小鼠成纤维细胞中PLC水解肌醇磷脂的数学模型被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建小鼠成纤维细胞中磷脂酶C水解肌醇磷脂的数学模型 .方法 :以细胞实际信号传递过程为基础、以准稳态近似为原则 ,利用微分方程建立数学模型模拟肌醇磷脂的代谢过程 .结果 :建立了一磷酸肌醇和表皮生长因子受体间浓度关系的微分方程 ,并以此来描述肌醇磷脂的水解速度 .结论 :本数学模型描述了肌醇磷脂代谢的生物学特征以及主要产物间的浓度依赖关系 ,讨论了各个参数对肌醇磷脂代谢的数学模型的影响 ,分析了磷酸肌醇
- 苏永春陆地邓凡白晓春罗深秋邓亲恺
- 关键词：磷脂酶C肌醇磷脂数学模型
