米政实
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 广东珠三角地区犬细小病毒分离与鉴定被引量:1
- 2012年
- 为了解珠三角地区犬细小病毒(CPV)的流行情况及研制有效的疫苗,本研究开展了CPV流行病学调查,并将32份疑似CPV感染犬的粪便样品处理后接种F81细胞进行病毒分离,并对分离株进行鉴定。鉴定结果显示:32份样品中有19份样品提取液在F81细胞上可以产生明显的细胞病变;HA效价可达到1∶256。回归动物试验显示分离株可以导致犬出现明显的CPV感染症状,PCR鉴定也进一步确定所分离的病毒为CPV。通过VP2基因同源性分析显示分离株与国内主要的流行基因亚型CPV-2a的同源性达98%以上。
- 黄永亮施赫赫冯顺意王怡飞米政实刘慧思徐晓娟张莹吴晓薇牛学锋郭霄峰
- 关键词:犬细小病毒
- 广东省某猪场链球菌的分离与鉴定被引量:2
- 2012年
- 为了解广东省茂名某猪场暴发猪链球菌病的详细情况及制作灭活疫苗给猪群接种免疫。该研究通过分离细菌、PCR鉴定、生化试验等方法分离、鉴定细菌,并通过动物试验了解该分离菌的致病性。最后通过药敏试验找出高敏药物用于临床治疗及了解该猪场细菌病的耐药性,指导临床合理用药。
- 郭慧霞米政实梁曼怡王怡飞徐晓娟张良黄永亮
- 关键词:猪链球菌耐药性动物试验
- 犬细小病毒分离株VP2基因进化分析
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)已演变出CPV-2、CPV-2a、newCPV-2a、CPV-2b、newCPV-2b、CPV-2c等基因亚型。为了进一步了解犬细小病毒在中国的流行及其分子进化,我...
- 黄永亮王怡飞徐晓娟冯顺意米政实施赫赫吴晓薇牛学锋郭霄峰
- 关键词:犬细小病毒基因变异分离株
- 犬干扰素α1基因在大肠埃希菌中的表达及其抗病毒活性的测定被引量:2
- 2013年
- 目的在大肠埃希菌中高效表达重组犬干扰素α1(canine interferon alpha1,CaIFNα1)基因,并对其抗病毒活性进行初步研究。方法根据大肠埃希菌密码子的偏嗜性,人工合成犬干扰素α1成熟蛋白编码基因,同时引入大肠埃希菌EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点,将改造后合成的CaIFNα1核苷酸序列定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-CaIFNα1,并进行PCR及双酶切鉴定;将鉴定正确的重组表达质粒pET-CaIFNα1转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达的重组融合蛋白经SDS-PAGE及Western blot鉴定,并采用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测其抗VSV病毒活性。结果重组表达质粒经PCR及双酶切鉴定,证明构建正确;重组融合蛋白CaIFNα1相对分子质量约39 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的61.5%,可被鼠抗His单克隆抗体及鼠抗CaIFNα1多克隆抗体特异性识别,在MDCK细胞上呈现较高的抗病毒活性,为2.0×106U/ml。结论已成功改造了CaIFNα1基因,并在大肠埃希菌中实现了高效表达,表达产物具有较高的抗病毒活性。
- 徐晓娟王怡飞王玉米政实黄永亮郭霄峰
- 关键词:干扰素Α犬科大肠埃希菌原核细胞生物学活性