王权
- 作品数：203 被引量：620H指数：13
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项上海市科技兴农重点攻关项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 弓形虫膜表面抗原SAG2蛋白的高效表达及免疫活性分析被引量：8
- 2010年
- 在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达弓形虫膜表面抗原SAG2蛋白,并对其免疫活性进行分析。应用PCR技术从刚地弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码SAG2的基因片段,亚克隆至原核表达载体pET32a(+),在大肠埃希菌(E.coli)BL21内表达,并对其表达条件进行优化,Western blotting和ELISA分析纯化蛋白的免疫原性;纯化的重组蛋白免疫小鼠制备多抗,用间接免疫荧光试验(IFA)分析表达蛋白的免疫反应性。成功构建重组质粒pET32a(+)-tSAG2,所表达的融合蛋白大小约为38kD。在IPTG终浓度为0.1mmol/L、诱导时间4-6h和培养温度32℃条件下,重组SAG2蛋白主要以可溶性形式在大肠杆菌中高效表达,每升培养菌液约获得可溶性重组SAG2蛋白16mg。Western blotting及ELISA结果显示纯化蛋白具有良好的免疫原性。IFA显示重组蛋白的抗血清能够识别刚地弓形虫表面的SAG2天然蛋白,所表达蛋白具有良好的免疫反应性。截断的SAG2基因在大肠杆菌中得到了高效表达,重组蛋白保持了天然蛋白的免疫活性,为进一步利用该重组蛋白进行弓形虫病免疫诊断及基因工程亚单位疫苗的研制奠定基础。
- 聂福旭蒋蔚王权陈永军胡永浩
- 关键词：刚地弓形虫蛋白表达免疫活性
- Real-time qPCR检测安氏隐孢子虫卵囊方法的建立及应用
- 李安平王权黄克和朱志宏王赞江袁耀明曾晓华
- 运用伊氏锥虫抗原变异规律进行免疫预防的初步研究
- 2001年
- 为了克服锥虫抗原变异对宿主免疫反应的干扰 ,探索伊氏锥虫病高效保护性抗原 ,根据伊氏锥虫在宿主体内第一次发生变异产生的变异抗原免疫原性相同的规律 ,设计了伊氏锥虫变异前抗原 (VSG1)和第二次变异所产生的抗原 (VSG2 )复合物作为免疫原 ,对小鼠进行免疫与单用变异前抗原免疫鼠相比较 ,两组鼠都用带变异前抗原的虫攻击 ,另以未免疫的鼠作对照 ,结果 VSG1+ VSG2免疫组小鼠 8只全部获得保护 ,单用 VSG1免疫组小鼠10只和未免疫组小鼠 10只血中全部出虫而死亡 ,前者比后者出虫时间和存活时间延长。提示运用伊氏锥虫抗原变异这一规律设计的这种免疫复合物 。
- 沈杰王权周勇志
- 关键词：伊氏锥虫免疫保护
- 主要人畜共患寄生虫病诊断技术的应用研究
- 钱应娟王永康张惠英周金林王权陈永军张北民周勇志
- 该项目组应用PAPS快速诊断技术、DIGFA滴金免疫检测技术和PCR微量检测技术建立了动物弓形虫、旋毛虫、隐孢子病的诊断技术；并应用PAPS弓形虫病诊断试剂对上海市闵行区、嘉定区、宝山区、浦东新区和四川省的猪场及犬进行了...
- 关键词：
- 呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定被引量：1
- 2014年
- 将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得了稳定分泌抗4-NPAHD单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为B10E7。使用本细胞株制备的McAb对4-NPAHD的半数抑制质量浓度(IC50)为3.65 ng/mL,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。本抗体的研制为建立间接竞争酶联免疫方法奠定了基础。
- 石金磊陈永军刘迎春蒋蔚张花景李欣彤乔元彪王权
- 关键词：单克隆抗体
- 弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用
- 为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,本实验利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截断型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,...
- 蒋蔚刘迎春陈永军安立刚张花景王权
- 关键词：单克隆抗体免疫荧光检测免疫保护
- 五种重要致病性弧菌高通量液相芯片检测方法的建立被引量：5
- 2021年
- 为建立一种快速、准确同时检测5种致病性弧菌的高通量液相芯片技术,本研究针对霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌的10个目的基因,包括5个种特异性基因和5个毒力基因,分别设计特异性引物和探针,多重PCR扩增后的产物与偶联有不同核酸探针的微球混合物进行杂交反应,利用液相芯片检测仪分析结果。结果显示,本方法同时检测这5种致病性弧菌时,检出限最高达到1.8×10^(2)CFU/mL;检测包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、河流弧菌、沙门菌、李斯特杆菌和铜绿杆菌等常见细菌时,均无交叉反应,表明特异性好;检测不同批次的样品时,变异系数均小于8%,表明重复性良好。本研究建立的液相芯片检测方法能够快速同时检测这5种致病性弧菌,具有高通量、灵敏性高、重复性好、可控性强、节省样本和时间等优点,对水产品中多种重要致病性弧菌的检测和流行病学调查提供了技术支持。
- 郭容董晓妹别闯南王权韩先干叶建强蒋蔚
- 关键词：弧菌毒力基因液相芯片
- 伊氏锥虫在小鼠体内抗原变异规律及免疫保护试验
- 2003年
- 为了探索伊氏锥虫抗原的变异规律及其用于免疫预防的可能性 ,首先对伊氏锥虫安徽株单虫克隆 2个早期变异体 Sh Tat1.1、Sh Tat1.2采用蛋白酶抑制剂 TL CK处理 ,分离纯化这 2种变异体的 VSG,用 Sh Tat1.1VSG免疫 KM小鼠 ,Sh Tat1.1锥虫攻击免疫鼠后 6 d分离锥虫 ,经间接免疫荧光试验 (IFT)和班点酶标记试验 (Dot- EIA)鉴定为Sh Tat1.2 ,说明同一克隆锥虫感染兔、小鼠第 1次发生抗原变异后产生的变异体相同。依据这一规律 ,设计了免疫预防保护试验 ,试验小鼠分 3组 :一组为未免疫对照组 ,一组为 Sh Tat1.1VSG单一抗原免疫组 ,另一组为 Sh Tat1.1VSG、Sh Tat1.2 VSG混合免疫抗原免疫组 ,各组均以 Sh Tat1.1锥虫攻击 ,结果 Sh Tat1.1VSG+Sh Tat1.2 VSG免疫组小鼠全部获得保护 ,单用 Sh Tat1.1VSG免疫组小鼠和未免疫小鼠血中全部出虫、死亡 ,前者比后者出虫时间、存活时间延长。提示运用伊氏锥虫抗原变异这一规律设计的这种复合抗原 ,能激发宿主克服虫体抗原变异对免疫保护的干扰。
- 王权沈杰周勇志周金林
- 关键词：免疫保护试验伊氏锥虫家畜
- 利用SYBR Green检测牛隐孢子虫Rea1-Time PCR方法的建立及应用
- 根据GenBank公布的隐孢子虫SSU rRNA基因序列设计一对引物,并以标准基因组DNA为模板。初步建立检测奶牛隐孢子虫的基于SYBR Green的Real-Time PCR方法,对奶牛微小隐孢子虫(C.parvum)...
- 王权李安平朱志宏王赞江袁耀明
- 关键词：实时荧光定量PCR隐孢子虫
- 文献传递
- 水产品中主要禁用药物和毒素快速检测新型技术标准研究
- 李健王艳王权陈沁王巧全熊炜陈政晓张强
- 1)在建立单通道液相芯片检测己烯雌酚、甲孕酮、氯霉素和孔雀石绿的基础上，率先自主研制同时检测水产品中孔雀石绿、氯霉素、己烯雌酚、甲孕酮的新型生物液相芯片.2)采用针对隐性孔雀石绿(为孔雀石绿在鱼体内的主要代谢产物)单抗研...
- 关键词：
- 关键词：水产品试剂盒
