牟笑 作品数:23 被引量:56 H指数:4 供职机构: 江苏大学附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 镇江市科技支撑计划(社会发展)项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
小窝蛋白-1对人甲状腺上皮细胞增殖、凋亡及胞内活性氧水平的影响 被引量:2 2019年 目的:探讨小窝蛋白-1(Caveolin-1)对人甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1增殖、凋亡和胞内活性氧产生的影响。方法:将正常人甲状腺上皮细胞(Nthy-ori 3-1)分为实验组和阴性对照组,分别转染Caveolin-1敲减病毒上清液以及阴性对照病毒上清液,以未转染的Nthy-ori 3-1细胞为空白对照组,应用嘌呤霉素筛选出阳性细胞,qRTPCR和蛋白质印迹检测3组细胞Caveolin-1的mRNA和蛋白表达;MTT法检测Caveolin-1敲减后细胞增殖能力变化;流式细胞术检测Caveolin-1敲减后细胞的凋亡率;荧光探针DCFH-DA法检测Caveolin-1敲减后细胞内活性氧水平。结果:Caveolin-1抑制性慢病毒感染后,Nthy-ori 3-1细胞Caveolin-1 mRNA和蛋白水平均显著降低(P均<0. 01)。抑制Caveolin-1表达后,Nthy-ori 3-1细胞增殖能力较阴性对照组明显降低,凋亡率明显增加,细胞内活性氧水平明显升高(P均<0. 01)。结论:Caveolin-1表达降低通过增加胞内活性氧水平和细胞凋亡,抑制细胞增殖,介导甲状腺上皮细胞损伤。 刘宝翠 郑婷婷 董利阳 牟笑 许铖铖 毛朝明关键词:甲状腺上皮细胞 小窝蛋白-1 凋亡 活性氧 慢病毒转染 ULBP3联合CEA、CA125、SCCA在肺癌中的诊断价值 被引量:3 2021年 目的研究肿瘤标志物UL-16结合蛋白3(ULBP3)联合癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCCA)在肺癌中的诊断价值。方法选择2018年3月至2019年12月在江苏大学附属医院病理确诊的106例肺癌(腺癌70例、鳞癌36例)患者作为肺癌组,57例良性肺病患者作为对照组。采用时间分辨免疫荧光法检测血清ULBP3水平,采用化学发光法检测血清CEA、CA125、SCCA水平。比较两组血清ULBP3、CEA、CA125、SCCA水平,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析ULBP3、CEA、CA125、SCCA对肺癌的诊断价值。结果肺癌组患者血清CEA、CA125、SCCA、ULBP3的水平显著高于对照组[(52.1±15.3)μg/L比(3.9±0.5)μg/L,(65.8±8.8)kU/L比(27.6±3.2)kU/L,(5.4±1.0)μg/L比(2.3±0.4)μg/L,(18.6±5.8)μg/L比(2.5±0.3)μg/L](P<0.05或P<0.01)。不同性别、年龄、病理类型、临床分期以及有无吸烟史的肺癌患者血清ULBP3水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线结果显示,CEA、CA125、SCCA、ULBP3诊断肺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.712(95%CI 0.633~0.790)、0.625(95%CI 0.539~0.712)、0.667(95%CI 0.579~0.755)、0.891(95%CI 0.841~0.942),ULBP3联合CEA、CA125、SCCA检测的AUC为0.926(95%CI 0.888~0.964)。CEA、CA125、ULBP3诊断肺腺癌的AUC分别为0.805(95%CI 0.724~0.887)、0.707(95%CI 0.608~0.807)、0.891(95%CI 0.834~0.949),ULBP3联合CEA、CA125诊断肺腺癌的AUC为0.956(95%CI 0.922~0.989)。SCCA、ULBP3诊断肺鳞癌的AUC分别为0.716(95%CI 0.604~0.827)、0.874(95%CI 0.804~0.943),ULBP3联合SCCA诊断肺鳞癌的AUC为0.890(95%CI 0.825~0.954)。结论肺癌患者血清ULBP3、CEA、CA125、SCCA表达异常,四项指标联合检测对肺癌的诊断效能较高。CEA、ULBP3、CA125联合检测对肺腺癌诊断效能较高,ULBP3、SCCA联合检测对肺鳞癌诊断效能较高。 牟笑 罗旋 刘佳梦 董利阳 毛朝明 汪雪峰关键词:肺癌 糖类抗原125 鳞状上皮细胞癌抗原 ULBP3分子在消化道肿瘤病人中的临床意义 研究背景:NKG2D是NK细胞表面活化性受体,其配体包括MHC-I类分子相关蛋白A和B(MICA/B)、UL-16结合蛋白(ULBP),MICA/B多存在于恶性血液病细胞表面而ULBP1,ULBP2多表达在实体瘤细胞表面... 牟笑 秦伟 毛朝明关键词:NK 肝癌 血清CEA、CA242和PET/CT显像联合检测对胰腺癌的诊断价值 被引量:8 2023年 目的 探究血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原242(CA242)及计算机断层扫描(PET/CT)联合检测对胰腺癌的诊断价值。方法 回顾性选取2016年6月至2020年10月拟诊断为胰腺癌的患者106例为研究对象。所有患者均术前进行血清CEA、CA242检测及PET/CT显像检查,分析血清CEA、CA242与PET/CT显像联合检测对胰腺癌患者的临床诊断价值。结果 106例拟诊断为胰腺癌的患者行手术病理显示胰腺癌患者88例,胰腺良性疾病者18例。胰腺癌组血清CEA、CA242水平分别为(^(18).58±5.69)ng/mL、(41.55±14.42)U/mL,均高于胰腺良性组的(10.92±2.24)ng/mL、(^(18).68±6.25)U/mL (P<0.05)。PET/CT影像显示胰腺癌患者病灶可见^(18)F-FDG代谢增加,且病变局部放射性浓集明显增高,胰腺良性疾病中显示病变局部放射性浓集不增高或轻微增高。PET/CT影像检查诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度分别为88.6%、77.8%、86.79%,血清CEA诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度为84.1%、66.7%、81.13%,血清CA242诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度为85.2%、72.2%、83.02%,联合检测诊断胰腺癌的敏感度、特异度、准确度为95.5%、94.4%、95.28%,均高于单项检测。结论 血清CEA、CA242和PET/CT显像联合检测对胰腺癌的诊断价值高。 李林 毛朝明 司马玉洁 牟笑 周建明关键词:胰腺癌 癌胚抗原 计算机断层扫描 人ULBP3在不同肿瘤细胞和肿瘤组织的检测及分析 被引量:5 2014年 目的研究UL16结合蛋白3(ULBP3)在不同类型肿瘤细胞和不同实体肿瘤中的表达。方法流式细胞术检测膜型ULBP3在SW620结直肠癌细胞、SGC7901胃癌细胞、A549肺癌细胞和结肠腺癌、胃腺癌、肺腺癌组织中的表达情况,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中ULBP3的表达;时间分辨荧光免疫分析法检测肿瘤细胞株培养上清和肿瘤患者血清可溶性ULBP3(sULBP3)的水平。反转录PCR方法检测ULBP3 mRNA在肿瘤中的表达。结果 ULBP3在SW620细胞、SGC7901细胞中表达,在A549细胞中不表达;ULBP3在结直肠腺癌、胃腺癌、肺腺癌组织中广泛分布;sULBP3存在于SW620细胞、SGC7901细胞培养上清液和结直肠腺癌、胃腺癌、肺腺癌患者血清中。结论 ULBP3可在不同实体中肿瘤细胞表达,血清sULBP3是潜在的肿瘤标志物。 毛朝明 牟笑 蒋茜 许铖铖 刘红利 郑婷婷关键词:自然杀伤细胞 肿瘤免疫 过量碘抑制甲状腺细胞自噬并诱导凋亡与桥本甲状腺炎有关 被引量:11 2015年 目的探讨过量碘对人甲状腺细胞自噬、凋亡的影响以及与桥本甲状腺炎的关系。方法免疫组织化学法检测桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中自噬及凋亡相关蛋白表达水平,以良性甲状腺腺瘤手术标本的正常组织作为正常对照。用不同浓度的碘化钾(KI)处理Nthy-ori 3-1甲状腺细胞12 h后,利用Western blot法检测细胞自噬相关蛋白哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达水平,分别采用流式细胞术、MTT法检测细胞凋亡和增殖水平。结果与正常甲状腺组织比较,桥本甲状腺炎组织中自噬水平较低,凋亡蛋白水平较高。与对照组比较,浓度梯度KI处理致甲状腺细胞m TOR表达水平明显升高,而LC3B-Ⅱ表达水平明显下降,以10 mmol/L KI处理时变化最明显;高浓度KI处理促进甲状腺细胞凋亡率明显升高;细胞增殖率随KI浓度增加而呈下降趋势,50 mmol/L KI处理时增殖率最低。结论过量碘能够抑制甲状腺细胞自噬,诱导其凋亡。桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中自噬水平低下,较高水平的凋亡,提示过量碘可能与桥本甲状腺炎的发病有关。 许铖铖 郑婷婷 吴菲 卜玲 毛朝明 牟笑 刘红利 周月鹏关键词:碘 自噬 凋亡 桥本甲状腺炎 血清CA125在胃癌术后腹膜转移中的临床价值 周建明 毛朝明 高健青 陈跃华 孙桂云 牟笑 许铖铖 朱丽 李林MRP14在桥本甲状腺炎和甲状腺乳头状癌中的价值 2021年 探讨髓相关蛋白14(myeloid-related protein 14,MRP14)在桥本甲状腺炎和甲状腺乳头状癌鉴别诊断中的意义。方法:免疫组织化学染色法检测桥本氏甲状腺炎患者、甲状腺乳头状癌患者及正常对照者(癌旁正常组织)甲状腺组织中MRP14蛋白的表达情况。用不同浓度的IL-1β分别作用于甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺乳头状癌细胞TPC-1 4 h ,荧光定量PCR法检测MRP14 mRNA的表达;细胞免疫荧光法检测MRP14蛋白的表达。结果:与对照组相比,桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中MRP14蛋白明显增多,且差异有统计学意义,而甲状腺乳头状癌患者甲状腺组织中MRP14蛋白的表达差异无统计学意义。IL-1β能从mRNA水平(P<0.01)和蛋白水平促进Nthy-ori 3-1细胞MRP14的表达,而IL-1β对TPC-1细胞MRP14的表达影响差异无统计学意义。结论:桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中高表达MRP14,IL-1β能够明显促进Nthy-ori 3-1细胞高表达MRP14,而对TPC-1细胞MRP14的表达无影响,提示MRP14对鉴别桥本氏甲状腺炎和甲状腺乳头状癌具有一定临床价值。 罗旋 许铖铖 牟笑 刘佳梦 毛朝明关键词:IL-1Β 桥本氏甲状腺炎 甲状腺乳头状癌 γδT细胞在桥本氏甲状腺炎发病机制中的作用及干预研究 研究背景:γδT细胞在人类自身免疫性疾病中的作用尚不清楚.众多研究表明γδ T细胞具有抗原提呈、免疫调节及辅助T细胞的功能,参与自身免疫性疾病的发病.研究证实健康人外周血和次级淋巴中的γδ T细胞与B细胞共培养导致IgG... 刘红利 许铖铖 郑婷婷 牟笑 毛朝明关键词:桥本氏甲状腺炎 ΓΔT细胞 全反式维甲酸 自身抗体 人ULBP1重组蛋白的克隆表达和多克隆抗体制备 2012年 目的:表达人UL16结合蛋白1(ULBP1)胞外段重组蛋白,并制备兔抗人ULBP1多克隆抗体。方法:利用RT-PCR技术获得人ULBP1分子胞外段的基因编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-ULBP1。测序鉴定正确后转化入大肠杆菌感受态细胞M15,经IPTG 30℃诱导4 h后,对表达产物进行鉴定。用镍柱对人ULBP1重组蛋白进行纯化,并将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔,采用流式细胞术(FCM)、Western blot法对制备的多克隆抗体进行生物学鉴定。结果:成功构建了原核表达载体pQE30-ULBP1(aa81~244),并获得了高纯度的人pQE30-ULBP1(aa81~244)重组蛋白。制备的多克隆抗体能够识别肺癌细胞株A549表面表达的天然构象ULBP1分子。结论:成功表达了人ULBP1(aa81~244)重组蛋白并成功制备了兔抗人ULBP1的多克隆抗体。 蒋茜 施良 牟笑 毛朝明关键词:重组蛋白 多克隆抗体