沈庆丰
- 作品数：7 被引量：34H指数：4
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 柠檬黄的ELISA检测方法的建立被引量：12
- 2008年
- 利用免疫学基本原理,获取抗柠檬黄的单克隆抗体,以此建立了从食品中检测柠檬黄的间接竞争ELISA.试验表明:OVA-TE最适包被浓度为1μg/mL;酶标抗体最适工作浓度为1:3000;酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃,1h;封闭液为1%明胶;底物显色时间为15min;对柠檬黄的最低检出量为26.34ng/mL;抗体的最适稀释倍数为1:12000倍;对该方法进行交叉性试验和重复性试验,结果表明此法是一种特异、灵敏、快速的检测方法,并适合大批量样品检测.
- 邱凯马国文柳增善任立松沈庆丰
- 关键词：柠檬黄单克隆抗体
- 抗氯霉素单克隆抗体的制备、纯化及其特异性鉴定被引量：10
- 2008年
- 目的:获得能稳定分泌高亲和力抗体的抗氯霉素杂交瘤细胞。方法:重氮化法偶联制备氯霉素(CAP)的免疫抗原和检测抗原(CAP-BSA和CAP-OVA)。应用常规技术融合,三次有限稀释克隆和间接竞争ELISA法筛选杂交瘤细胞株,并鉴定抗体特异性。结果:得到一株能够稳定分泌高亲和力,特异性强抗体的杂交瘤细胞株4B12,辛酸-硫酸铵法纯化体内诱生法制备的腹水;纯化后的抗体效价>1:256000,杂交瘤细胞染色体平均数为50±2,分泌的抗体属于IgG1亚类,相对分子质量为157.92ku,亲和常数为8.26×108M-1;与甲砜霉素、庆大霉素、泰乐菌素、青霉素、链霉素和卡那霉素无交叉反应。结论:该细胞株可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。
- 王颖任立松李研东沈庆丰柳增善
- 关键词：氯霉素抗体单克隆纯化
- 抗软骨藻酸单克隆抗体制备及ELISA检测方法建立
- 软骨藻酸由海洋中的硅藻产生后常通过食物链蓄积于海洋贝类、蛤类等海产品体内,进而引起海洋动物乃至人的食物中毒,国外由于误食有毒海产品而引发中毒的事件时有发生,严重影响了人们的身体健康和对海产品的开发利用。本实验通过活泼酯法...
- 沈庆丰
- 关键词：软骨藻酸单克隆抗体快速免疫ELISA
- 文献传递
- 磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及其鉴定
- 2011年
- 目的制备磺胺二甲嘧(Sulfadimidine,SM2)啶单克隆抗体,并对其进行鉴定。方法经小鼠腹腔免疫SM2-BSA抗原,采用常规技术进行细胞融合,间接竞争ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,有限稀释法进行亚克隆,硫酸铵-辛酸法纯化抗体,并鉴定其抗体效价、杂交瘤细胞染色体数量、相对分子质量、抗体亚型、亲和力和特异性。结果筛选到1株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株3D7,细胞培养液上清和抗体效价分别为1∶6.4×102和1∶1.28×105;纯化后3D7抗体效价>1∶128 000,杂交瘤细胞染色体平均数为50±2对,分泌的抗体属于IgG1亚类,相对分子质量为164 280,亲和常数为6.09×108 M-1,与6种磺胺类药物及青霉素、庆大霉素和泰乐霉素交叉反应IC50大于1 mg/ml,交叉反应率小于0.01%。结论已成功制备了SM2单克隆抗体,该抗体能满足建立免疫学检测方法的需要。
- 王颖安宇李研东沈庆丰杜承柳增善罗云波
- 关键词：磺胺二甲嘧啶抗体单克隆
- 西加毒素的研究概况被引量：6
- 2009年
- 西加毒素是由剧毒纲比甲藻产生,是一种毒性极强的珊瑚鱼毒素,通过食物链传递而蓄积于各种珊瑚鱼体内。西加毒素与钠通道受体靶部位VI结合,激活钠通道,增加钠离子通透性。人类误食了含有西加毒素的珊瑚鱼即引起中毒。近几年,随着珊瑚鱼大量的出口,西加毒素中毒已经成为世界性的健康问题。西加毒素中毒可造成胃肠功能紊乱、心血管功能障碍、持续长时间的神经感觉异常,并且以温度感觉倒错最具特征性。西加毒素轻度中毒病例可出现暂时性近视及眼痛症状,饮酒可加重病情。曾经西加毒素中毒的人再次中毒的机会较大,症状会更严重。由于目前对含西加毒素的鱼类缺乏一种简便、准确的检测手段,使得西加毒素中毒事件时有发生。为避免中毒,建议勿食用重1.5 kg以上的珊瑚鱼,特别是其头和内脏。通过对西加毒素的来源和转移,积累西加毒素的鱼类,西加毒素中毒的分布情况、中毒的机理、对人类的危害,西加毒素的制备方法及检测方法的概述,为有关研究提供参考。
- 李春媛周玉张磊沈庆丰
- 关键词：中毒公共卫生
- 一种快速制备软骨藻酸单克隆抗体的免疫方法
- 一种快速制备软骨藻酸单克隆抗体的免疫方法，涉及免疫安全检测技术中单克隆抗体的制备，其步骤为，取8周龄雄性BALB/C小鼠，第一天使用弗氏完全佐剂乳化完全抗原，抗原佐剂比6∶4，注射后肢足垫18－22μl/脚，第三或四天待...
- 周玉张媛媛沈庆丰张磊李春媛支百惠卢士英
- 文献传递
- 三株沙门氏菌的鞭毛基因重组及蛋白的免疫特性被引量：1
- 2008年
- 三株强致病性的甲型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌I相鞭毛抗原分别为H-1a、H-1i、H-1c。设计三对引物,利用PCR扩增出具有决定抗原表位特异性的基因片段,长度分别为1088bp、633bp、1056bp。利用引物上的Linker和重叠延伸PCR扩增技术将此三段抗原决定区基因序列串联,获得重组鞭毛基因,共长2747bp。构建鞭毛重组基因(F-a-i-c)的原核表达载体pET-28a-F,将重组质粒转化大肠杆菌BL21株,经IPTG诱导表达蛋白,SDS-PAGE电泳分析后得到目的蛋白大小约为95kDa,并优化表达条件。在37℃下终浓度为1mmol/L的IPTG诱导6h后,经薄层扫描分析得到目的蛋白表达量约为11.2%。超声破碎细胞后,纯化含有目的蛋白的包涵体,对八周龄雌性豚鼠做足垫免疫组,间接ELISA检测抗体效价为1:512000,敏感性为8μg/ml,这为后期抗体检测研究奠定了基础。
- 饶星卢士英王颖李月婷沈庆丰柳增善柳增善
- 关键词：沙门氏菌基因重组蛋白表达免疫原性
