栗海峰
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：河北师范大学生命科学学院铁代谢分子生物学实验室更多>>
- 发文基金：河北省科技厅科研项目国家自然科学基金河北省应用基础研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 运动对大鼠铁代谢相关蛋白表达的影响及补铁剂的药理学研究
- 刘玉倩段相林常彦忠王海涛于鹏赵斌田燕艳王书敏栗海峰
- 该项目的应用领域主要是运动营养补充品的研究。其技术原理：主要应用组织学技术、免疫组织化学技术、分子生物学技术和显微图像分析等技术研究和探索了不同强度游泳运动后大鼠血清铁状态的变化，机体铁分布的改变，骨骼肌铁贮存、铁利用，...
- 关键词：
- 关键词：蛋白表达铁代谢药理学
- 大豆异黄酮与疾病防治研究进展被引量：5
- 2007年
- 杨震玲栗海峰常彦忠
- 关键词：大豆异黄酮雌激素自由基生理机能
- 小鼠铁调素1功能肽Hepc25的表达及纯化
- 2012年
- 目的利用原核生物表达载体表达小鼠铁调素功能肽Hepc25,并对其进行纯化。方法选取编码25aa的Hepc25基因与硫氧还蛋白基因融合后在大肠杆菌中大规模诱导表达该融合蛋白,以RT-PCR法扩增小鼠Hepcidin1功能肽基因Hepc25,将目的基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中获得pET-32a-Hepc25,再以pET-32a-Hepc25转化大肠杆菌BL21表达融合蛋白,收集菌体蛋白,用Western blotting和SDS-PAGE法检测融合蛋白,优化融合蛋白高表达条件。依次利用亲和层析、离子交换层析和凝胶排阻层析法纯化融合蛋白,融合蛋白经肠激酶酶切、高效液相色谱法(HPLC)分离纯化获得了目的蛋白Hepc25。结果成功构建了小鼠pET-32a-Hepc25融合蛋白表达载体,融合蛋白表达量约占大肠杆菌BL21总蛋白量的28%,融合蛋白在33℃、120r/min、终浓度为0.2mmol/L的异丙基-β-D硫化半乳庶糖(IPTG)诱导8h的条件下表达量最高,融合蛋白纯度达95%。融合蛋白经过色谱分离、酶切和HPLC分析,目的蛋白的纯度也达95%以上。结论利用原核生物表达载体成功表达并纯化了小鼠铁调素功能肽Hepc25,并筛选出了高表达的优化条件。
- 赵述强石振华栗海峰段相林常彦忠
- 关键词：铁代谢SDS-PAGE免疫印迹法小鼠
