柴秀娟 作品数:9 被引量:37 H指数:4 供职机构: 石河子大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 科技型中小企业技术创新基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
芽胞杆菌高产纤维素酶菌株的诱变选育与培养基优化 被引量:7 2017年 为获得高产纤维素酶菌株,采用紫外(UV)诱变和紫外-亚硝基胍(UV-NTG)复合诱变方法对新疆吐鲁番地区土壤中分离得到的产纤维素酶菌株芽胞杆菌C-8进行诱变筛选,并通过二次正交旋转组合试验和响应面试验对诱变筛选得到的菌株进行培养基的优化。结果表明,UV诱变菌株UV-5和UV-NTG比出发菌株C-8纤维素酶活分别提高了1.15倍和3.23倍;当发酵培养基中碳源浓度为3%、氮源浓度为1.5%、吐温-80的浓度为0.15%时,纤维素酶活达到453.20 U·m L-1,是出发菌株C-8的5.49倍和复合诱变菌株UV-NTG-10的1.7倍。本研究结果为纤维素酶的扩大发酵以及后期工业化生产提供了理论依据。 郭建强 柴秀娟 庞学兵 裴娟 王爱英关键词:芽胞杆菌 诱变选育 纤维素酶 响应面优化 棉花枯萎病菌拮抗内生菌的筛选和拮抗效果检测 被引量:10 2016年 从甘草、阿魏、苦豆子中筛选出4株对棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporium)抑制效果较好的内生菌,通过其生理生化检测、16S r DNA序列分析进行鉴定;选择抑菌效果最好的拮抗菌A,分别测定其胞内、胞外分泌物的抑菌效果,并检测该菌株对棉花种子萌发和活性氧酶系统的影响。结果表明,拮抗菌A为解淀粉枯草芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其胞内分泌物对枯萎病菌菌丝生长、产孢、孢子萌发的平均抑制率均高于胞外分泌物。拮抗菌A处理棉花可提高其成活率,但不引起植株系统诱导抗性。拮抗菌A的主要抑菌物质存在于细胞内,抑制产孢是其主要拮抗途径。 崔郑龙 柴秀娟 孔德真 王爱英关键词:棉花枯萎病菌 拮抗菌 胞外分泌物 抑菌效果 转CBF_1基因棉花的耐旱生理研究 被引量:2 2015年 以转CBF_1基因棉花及其野生型棉花为材料,设置轻度(900 mL)、中度(400 mL)、重度(300 mL)和对照(1 200mL)浇水处理的不同干旱胁迫和复水处理,考察各种处理后对盆栽植株不同部位叶片光合性能和离体叶片在暗处理条件下叶绿素含量的变化,以及在大田苗期、蕾期、花期、铃期断水胁迫对棉花产量的影响,为转基因抗旱棉花新品种的培育提供理论依据。结果表明:(1)在盆栽试验中,随着干旱胁迫时间的延长和复水3d处理,各浇水处理的转基因和野生型棉花叶片净光合速率(P_n)、原初光能转化效率(F_v/F_m)表现出先降低后增加的变化趋势,受到胁迫后对顶部叶片的影响比中部叶片大,且转基因棉花叶片保留数量显著高于野生型棉花;它们的离体叶片叶绿素a、叶绿素b的含量随着干旱胁迫时间的延长而逐渐下降,但转基因棉花的下降速率显著低于野生型棉花。(2)在田间试验的苗期、蕾期、花期、铃期干旱胁迫下,各干旱胁迫处理的转基因植株的皮棉产量、衣分、种子质量、株高均显著高于野生型棉花;转基因棉花的籽棉产量分别比正常灌溉处理降低了78.4%、55.1%、12.7%、8.3%,野生型棉花则分别降低了80.4%、55.4%、19.2%、14.4%,不同时期的水分胁迫严重影响了棉花籽棉产量,但是转基因棉花的籽棉产量显著高于野生型棉花。研究认为,在不同干旱胁迫条件下,转CBF_1基因棉花表现出优良的生长和生理优势,可提高棉花的耐旱性。 孔德真 崔郑龙 柴秀娟 祝建波 沈海涛 王爱英关键词:转基因棉花 CBF1 光合效率 产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及产酶条件的优化 被引量:9 2014年 采集新疆吐鲁番地区土样,从中分离筛选1株产纤维素酶菌株C-8;经形态观察、生理生化及16S rRNA序列分析,初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。该菌株所产纤维素酶的最适合作用pH和温度分别为9.0、40℃,且具有良好的pH稳定性和温度稳定性。为了提高C-8菌株产纤维素酶能力,利用响应面法对其发酵产酶条件进行优化。采用Plackett-Burman设计筛选出影响其产酶条件的3个主效应因素,最陡爬坡试验逼近最大响应值区域,利用Box-Behnken响应面分析法优化发酵产酶条件。结果表明,起始pH、CMC-Na%和培养温度为主要影响因素。通过三因素三水平的响应面分析得到最优条件为起始pH8.0、CMCNa%2.5%、培养温度28℃。在此条件下纤维素酶活可达193.89 U/mL,与优化前相比,酶活提高2.35倍。 柴秀娟 李曹龙 孔德真 崔郑龙 王爱英关键词:芽孢杆菌 纤维素酶 发酵优化 一株纤维素酶菌株的筛选、鉴定、酶学性质的研究及产酶条件的优化 柴秀娟 李曹龙 崔郑龙 王慧 王爱英高产纤维素酶菌株诱变选育与筛选 以新疆吐鲁番地区土壤中筛选获得产纤维素酶菌株芽孢杆菌(Bacillus sp) C-8为出发菌株,分别经紫外、亚硝基胍(NTG)诱变原始菌株,筛选最佳诱变条件;再经紫外-NTG的复合诱变,获得突变菌株后采用透明圈法进行初... 柴秀娟 崔郑龙 李曹龙 王爱英芽孢杆菌蛋白酶基因apr的克隆、表达及序列分析 被引量:2 2014年 克隆从新疆吐鲁番地区土样分离获得产蛋白酶菌株Bacillus tequilensis C9蛋白酶基因apr,建立蛋白酶基因异源表达体系。采用PCR技术克隆获得目的基因,利用生物信息学软件进行序列分析,构建pET-28a原核表达重组质粒,转化BL21大肠杆菌,37℃下IPTG诱导表达融合蛋白,测定酶活。蛋白酶基因apr全长1098 bp,与Bacillus subtilis aprE(AB734697)有98%的同源性,编码含有299个氨基酸残基的成熟蛋白,是易溶、亲水性较强的蛋白,属于Peptidases_S8_S53 superfamily蛋白家族,融合蛋白分子量约为29 kDa,蛋白酶酶活为28.4 u/mL。试验为构建蛋白酶基因高效表达体系奠定理论基础。 李曹龙 柴秀娟 杨晶 王爱英 祝建波关键词:芽孢杆菌 蛋白酶 基因克隆 高温产甘露聚糖酶菌株的筛选及产酶条件、酶学性质的研究 从吐鲁番地区土壤中分离筛选获得株产β-甘露聚糖酶的12株菌株,其中9号菌株的H/C值达到3.796,并将该菌株作为研究对象.通过单因素试验和正交优化试验,研究了该菌株的最佳发酵产酶条件,结果发现最优碳源为魔芋粉,最优氮源... 宋丽娟 王爱英 李曹龙 柴秀娟 崔郑龙 沈海涛 祝建波响应面法优化产蛋白酶菌株的发酵条件 被引量:7 2013年 从新疆吐鲁番地区土样中分离筛选获得1株产蛋白酶菌株Bacillus tequilensis C9,采用Plackett-Burman(PB)设计法筛选出影响其产酶条件的主效应因素为葡萄糖含量、装液量和接种量。应用中心组合设计以及响应面分析,建立了以蛋白酶酶活为响应值的二次回归方程模型,得到最优发酵产酶条件为:葡萄糖含量1.3%,装液量45mL,接种量5%。此条件下蛋白酶活为86.17 U/mL,与优化前相比酶活提高2.1倍。 李曹龙 柴秀娟 杨晶 王爱英 祝建波关键词:发酵条件 PLACKETT-BURMAN设计