杨素清
- 作品数：26 被引量：151H指数：5
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学哲学宗教更多>>
- 一株新的肺腺癌细胞系的建立及其生物学特征分析
- 目的:体外培养和建立人肺癌细胞系对于研究肺癌癌变,侵袭转移,多药耐药的分子机理,生物学特征,以及开发抗肺癌新药等均有十分重要的理论和临床意义。本研究目的在于建立人肺腺癌细胞系,为肺腺癌体外实验提供研究材料。方法:将患者胸...
- 郭爱林杨素清董嵩朱建权黄玉娟黄逸生吴红穗吴一龙
- 关键词：肺癌细胞系肿瘤细胞细胞培养
- 文献传递
- 肺癌细胞株中层粘连蛋白5多态性与其表达水平的关系被引量：1
- 2012年
- 目的探讨肺癌细胞株中层粘连蛋白5(LN5)5′非翻译区多态性与其表达水平的关系。方法应用测序及实时定量PCR方法检测12株肺癌细胞株中LN55′非翻译区多态性和LN5基因mRNA表达水平,分析相互之间的关系。结果 LN55′非翻译区-183G/A中GA基因型的LN5mRNA表达水平明显高于GG基因型(t=7.136,P<0.001)。本研究中尚未发现LN5基因-6C/A和-89A/G多态性位点与其mRNA表达的相关性。结论本研究提示LN5启动子区-183G/A多态性位点具有转录调控功能,为进一步的机制探讨提供了依据。
- 安社娟陈志红朱建权严红虹杨素清陈世良孟薇苏健黄迎谢至郭伟浜吴一龙
- 关键词：肺癌多态性
- siRNA抑制肺腺癌细胞DNA—DPKCS表达与放射敏感性关系研究
- 2010年
- 目的探讨稳定表达的小干扰RNA（siRNA）抑制DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA—DPKCS）表达对非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期及放射敏感性的影响。方法构建DNA—DPKCS—siRNA重组质粒转染肺腺癌细胞A549。流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，成克隆实验测定细胞存活曲线。结果建立了与A549细胞同源的DNA—DPKCS低表达细胞系549pRNA—DNA—DPKCS、阴性对照549pRNA—C细胞、空白549pSUPER细胞。与A549细胞相比549pRNA—DNA—DPKCS细胞的DNA—DPKCS mRNA（0．110：1．000；F=80．55，P〈0．01）、蛋白表达水平（0．870：2．967；F=63．96，P〈0．01）以及DNA—DPKCS活性（0．004：0．266；F=51．62，P〈0．01）均显著降低。549pRNA—DNA—DPKCS细胞2Gy存活分数、平均致死剂量、亚致死性损伤剂量均较A549细胞明显降低（0．25：0．76；F=996．86，P〈0．01：1．42：1．62：F=17．41，P〈0．05；0．06：1．00；F=68．92，P〈0．01）。DNA—DPKCS表达受抑后549pRNA—DNA—DPKCS细胞较A549细胞s期和G2期细胞比例明显减少（24．5％：35．5％；F=4．83，P〈0．05和10．7％：11．0％：F=32．04，P〈0．01）。结论抑制DNA—DPKCS表达可提高肺腺癌细胞A549的放射敏感性，同时调控细胞周期时相分布。
- 潘燚李伟雄杨素清曾子君林映如郭爱林
- 关键词：核糖核酸干扰
- 影响教学医院医务人员临床本科教学积极性的因素与解决思路被引量：6
- 2010年
- 附属医院是高等医学院的重要组成部分,是临床学院行使医疗服务、人才培养双重职能的重要场所。而医务人员积极投入本科教学是保证医院教学质量的关键。本文针对目前附属医院教学管理中存在的种种困难,通过完善管理机制、创新激励制度激发广大医务人员教学的积极性和主动性,从而进一步提高医院临床教学水平,保证医学人才培养质量。
- 肖莉华杨素清曾庆良林慧芳秦鉴
- 关键词：医学教育管理本科教学
- MassARRAY质谱分析肺癌多基因突变方法的建立与应用被引量：3
- 2015年
- 目的:以Mass ARRAY质谱i PLEX分析技术为平台建立适合中国肺癌人群多基因同步检测的方法。方法:通过文献检索并结合国内外研究进展,确定与中国肺癌人群发病、耐药以及转移等密切相关的13个靶基因或相关传导通路基因(EGFR、KRAS、ALK、FGFR1、FGFR2、FGFR3、PIK3CA、BRAF、PTEN、MET、ERBB2、AKT1、STK11)。对目的基因突变进行筛选并确定99个热点突变。按Mass ARRAY突变位点标示方法和引物设计固定格式,引物设计软件在线设计297条引物(正、反向扩增引物和延伸引物各99条)。以8个肺癌细胞系以及6例肿瘤组织样本建立检测方法,与Lung Carta试剂盒对比验证。扩大检测100例肺癌组织样本,与EGFR和KRAS直接测序法比较敏感度与特异度。结果:使用本方法检测肺癌细胞系的基因突变,其中1例肺癌组织新检测到FGFR2基因突变,其他结果与Lung Carta试剂盒一致。与直接测序法相比较灵敏度为100%,特异度为96.3%。结论:成功建立Mass ARRAY质谱分析肺癌多基因突变检测方法,适合中国肺癌人群且具有临床应用前景。
- 田红霞张绪超王震陈剑光陈世良郭伟浜杨素清吴一龙
- 关键词：肺癌突变
- 两种抗体检测非小细胞肺癌PD-L1表达水平的对比分析被引量：2
- 2017年
- 目的评价SP142和E1L3N两种兔单克隆抗体在临床肺癌标本中检测结果的一致性。方法连续收集了158例临床肺癌标本,制备成中性甲醛固定石蜡包埋的样品,采用SP142和E1L3N抗体,优化免疫组织化学方法检测PD-L1在肿瘤细胞和免疫细胞的表达情况。采用卡方检验和相关系数分析检出率和HScore得分的一致性和差异性。结果在158例肺癌组织中,SP142和E1L3N抗体检出的PD-L1总阳性率为54.4%(86/158)和62.7%(99/158)。两种抗体在肿瘤细胞染色分布较一致。当肿瘤细胞阳性比例(TPS)在1%≤TPS<5%、5%≤TPS<50%和TPS≥50%区间时,SP142抗体的检出阳性率分别为6.3%、17.1%和24.1%,E1L3N抗体的检出阳性率分别为7.6%、22.8%和26.6%,两种抗体的检测率总体上具有一致性(P=0.368)。当考虑染色强度时,肿瘤细胞HScore得分总体上相关性好(r=0.624,P=0.001)。但在所有TPS≥5%或TPS≥50%的阳性标本中,有43.9%(40/91)或42.0%(21/50)具有不一致性。在免疫炎症细胞检测中,两种抗体的染色分布异质性大。以1%为界值,SP142抗体和E1L3N抗体的检出率分别为19.6%和16.5%。结论 SP142和E1L3N两种兔单克隆抗体采用优化的免疫组织化学方法检测临床非小细胞肺癌标本中肿瘤细胞比例具有较好的一致性。两种抗体联合检测具有互补性,可能有助于检测出更多阳性患者用于临床治疗参考。
- 谢至吕志异卢丹霞颜文青陈宇伍思培黄迎杨素清吴红穗张绪超
- 关键词：肺癌PD-L1免疫组织化学免疫治疗
- 利用SELDI-TOF-MS蛋白质指纹图谱技术建立肺腺癌诊断模型被引量：3
- 2010年
- 目的:寻找肺腺癌患者血浆(清)蛋白特异性生物标志物,用最佳的标志蛋白组合建立肺腺癌诊断模型,并探讨其用于肺腺癌筛查的可行性。方法:应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及CM10芯片,检测45例肺腺癌患者和40例正常人血清蛋白质指纹图谱,用Biomark Wizrd和Biomark Patterns Software软件对结果进行分析,建立肺腺癌诊断模型;双盲法分析另外19例肺腺癌和20例正常人血清的SELDI质谱数据,验证该模型诊断肺腺癌的准确度。结果:肺腺癌患者和正常人血清蛋白质指纹图谱间有31个差异蛋白(P<0.05),其中以分子量为11.66kD的蛋白在两组血清中的差异最为显著(P<10-7),该蛋白对诊断肺腺癌有很强的敏感性和特异性;软件自动筛选出分子量为11.66kD的标志蛋白为主根结点,联合3882.9、4673.2、3158.2和2047.2等4个标志蛋白建立了最佳的肺腺癌诊断模型,对肺腺癌诊断(盲法)的敏感性为84.2%(16/19),特异性为90.0%(18/20)。结论:SELDI-TOF-MS技术建立的肺腺癌血清检测法,快速、简单、特异和敏感,为肺腺癌诊断和筛查提供了一个可行的途径和方法。
- 陈剑光杨学宁郭爱林李荣唐红艳杨衿记甘彬杨素清周清吴一龙
- 关键词：肺肿瘤蛋白质指纹图谱技术血清肿瘤标记物
- 赫赛汀对吉非替尼诱导肺癌A549细胞凋亡的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:研究吉非替尼与赫赛汀联合应用对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:应用MTT法,流式细胞仪Annexin V-PI双标法、DAPI荧光染色等多项方法,体外研究吉非替尼与赫赛汀联合对A549细胞的促凋亡作用。结果:吉非替尼与赫赛汀单独应用及联合应用均可以明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,促进细胞凋亡,并呈浓度及时间依赖性,2者联合作用人肺腺癌A549细胞24h、48h、72h的凋亡率显著高于单用吉非替尼或赫赛汀组(P<0.05),2者呈现出相加的抗瘤效果。结论:吉非替尼与赫赛汀联合应用在体外对人肺腺癌A549细胞有明显的促凋亡作用。
- 李文瑜郭爱林杨素清陈志红谢至吴一龙
- 关键词：易瑞沙赫赛汀肺肿瘤A549细胞
- RNA干扰MAGEA3对人肝癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨小发夹RNA(shRNA)载体介导抑制人肝癌细胞中黑色素瘤相关抗原A3(MAGEA3)的表达和对肝癌细胞凋亡的影响。方法:构建pS ilencer-MAGEA3短发夹状siRNA真核基因表达载体,采用脂质体介导的方法将其转染到人肝癌细胞(m el-ed1)中,用W estern印迹法、RT-PCR检测MAGEA3基因在肝癌细胞中的表达;通过原位末端标记TUNEL法、DNA片段化及Annexin V/PI双标记法检测,观察其对肝癌细胞凋亡的影响。结果:成功构建pS ilencer-MAGEA3短发夹状siRNA真核基因表达载体,转染特异性小发夹RNA质粒表达载体的MEL-ED1细胞中MAGEA3基因表达显著抑制(90%)。与对照组比较,pS ilencer-MAGEA3转染组肝癌细胞培养48 h后,DNA片段化检测出“DNA ladder”、TUNEL法显示细胞典型凋亡特征,Annexin V/PI双标检测转染组细胞凋亡率为21.41%±1.98%,明显高于pS ilencer-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01)。结论:MAGEA3小发夹RNA质粒载体可显著抑制MEL-ED1细胞中的MAGEA3基因的表达,促进肝癌细胞的凋亡,MAGEA3基因具有抑制凋亡的作用。该研究为应用RNA i进行肿瘤的基因治疗提供了实验依据。
- 李文瑜郭爱林杨素清胡少为文剑明
- 关键词：RNA干扰肝肿瘤细胞凋亡
- 重组慢病毒介导RNA干扰抑制DNA依赖蛋白激酶催化亚基表达对肺癌细胞中C225诱导表皮生长因子受体核转位及敏感性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 构建人DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）基因RNA干扰慢病毒载体,观察在非小细胞肺癌细胞株中沉默DNA-PKcs对C225诱导的表皮生长因子受体（EGFR）核转位及C225抑制细胞增殖的影响.方法 构建慢病毒干扰载体（LV-si-DNA-PKcs）感染A549细胞.荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测DNA-PKcs mRNA表达;Western blot检测DNA-PKcs和细胞核EGFR蛋白的表达.细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测C225对细胞的增殖抑制作用.结果 LV-si-DNA-PKcs感染的A549细胞见绿色荧光,感染率达95％以上;LV-si-DNA-PKcs有效干扰DNA-PKcs蛋白及mRNA表达水平（P＜0.05）.加C225前未见细胞核EGFR表达.C225处理1h,LV-si-DNA-PKcs细胞株见细胞核EGFR表达,持续用药4、24 h细胞核EGFR表达无明显增加;在LV-si-control细胞株及空白组,C225处理1、4、24h后细胞核EGFR表达逐渐增多.C225处理48 h后,LV-si-DNA-PKcs细胞株的细胞存活率开始低于其他2组细胞,72 h细胞存活率明显降低[（40.04±2.89）％比（55.82±7.11）％、（52.67±1.43）％,F=9.392,P＜0.01].结论 抑制A549细胞中DNA-PKcs表达,在一定程度上抑制了C225诱导的EGFR细胞核转位,增强C225对细胞的增殖抑制作用.
- 潘燚姚陈刘大钺李伟雄张红丹杨素清
- 关键词：西妥昔单抗
